广东出入境检验检疫局科技计划项目(2011GDK15)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：广东出入境检验检疫局南方医科大学更多>>
- 发文基金：广东出入境检验检疫局科技计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程更多>>
- PCR-焦磷酸测序检测副溶血性弧菌研究被引量：1
- 2013年
- 目的建立副溶血性弧菌(Vibrioparahaemolyticus,VP)的PCR-焦磷酸测序方法。方法根据副溶血性弧菌toxR基因设计扩增引物和测序引物,先用PCR特异性地扩增目的片段,再制备单链模版,最后用焦磷酸测序法检测DNA碱基序列,检测的序列为CCAAGGATTCACAGCAGAAGCCACAGGTGCTTTT,则判断为副溶血性弧菌。结果扩增引物和测序引物表现出良好的特异性。PCR扩增结果:20株VP均扩增出大小为137bp的DNA片段,而创伤弧菌等对照菌株未扩增出DNA条带。焦磷酸测序结果:20株副溶血性弧菌均测出与预期相符的DNA碱基序列,而其他对照菌株未测出DNA碱基序列或检测结果与测序引物后的序列不匹配。VP标准菌株ATCC17802发生A-T突变,密码子CCU变成CCA,而两个密码子都是脯氨酸的密码子。结论该方法特异性高,是快速检测VP有效手段。
- 许龙岩袁慕云唐勤阳静邹志飞相大鹏
- 关键词：副溶血性弧菌聚合酶链式反应焦磷酸测序碱基序列
- PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌研究被引量：3
- 2013年
- 目的建立结合PCR-焦磷酸测序检测单核细胞增生李斯特氏菌的方法。方法根据单核细胞增生李斯特氏菌的hly基因设计扩增引物和测序引物,特异地扩增目的片段,再制备单链模板,在测序引物引导下进行焦磷酸测序,通过测序结果与GenBank中的hly基因序列的比对进行鉴定。结果扩增引物和测序引物表现出良好的特异性,16株单核细胞增生李斯特氏菌菌株均扩增出大小249 bp的DNA片段,焦磷酸测序结果与hly基因序列100%匹配,而阴性对照菌株均未扩增出DNA条带,焦磷酸测序结果为阴性。结论建立的方法特异性高,是快速从DNA序列水平上检测单核细胞增生李斯特氏菌的有效手段。
- 许龙岩袁慕云唐勤阳静相大鹏
- 关键词：单核细胞增生李斯特氏菌
