国家自然科学基金(31271039)
- 作品数：7 被引量：17H指数：3
- 相关作者：郑强荪曾迪魏婷欧东波赵佩更多>>
- 相关机构：第四军医大学唐都医院空军军医大学中国人民解放军空军军医大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 甲状腺素促进miPS细胞向心肌细胞分化的非基因机制的作用
- 2016年
- 目的探讨三碘甲腺原氨酸(thyroxine,T3)在诱导小鼠诱导多能干细胞(mi PSC)向心肌细胞分化过程中非基因的机制作用。方法培养Oct4-GFP+mi PS细胞,利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法诱导mi PSC向心肌细胞分化,在诱导过程中分别添加甲状腺素T3和甲状腺素类似物三碘甲腺乙酸(triiodothyroacetic acid,Triac)。实验共分对照组、T3处理组、T3+Triac处理组。分别在诱导分化第4、6和12天,在倒置显微镜下观察细胞的分化情况,采用免疫荧光染色法检测分化第12天心肌细胞特异性结构蛋白α-actinin及肌钙蛋白(cardiac troponin,c Tn)T的表达,Western blot法检测c Tn T和p-JNK/JNK的表达情况。结果诱导分化第4、6和12天,T3处理组跳动EB数量明显多于对照组和T3+Triac组(P<0.05);免疫荧光染色显示T3处理组的α-actinin和c Tn T表达量较对照组和T3+Triac组明显增强(P<0.05);Western blot结果表明T3显著提高c Tn T的表达量(P<0.05);细胞内信号分子JNK蛋白的磷酸化水平明显大于对照组和T3+Triac组(P<0.05)。结论甲状腺素通过的非基因机制促进mi PS细胞向心肌细胞分化,这种作用机制可能跟JNK信号通路有关。
- 燕松欧东波赵佩李晓莉魏婷陈焱郑强荪
- 关键词：甲状腺素JNK
- Integrin β_1在维生素C诱导小鼠诱导性多能干细胞向心肌样细胞分化中的作用被引量：2
- 2013年
- 目的:探讨整联蛋白β1(Integrinβ1)在维生素C(Vc)诱导小鼠诱导性多能干细胞(induced pluripotent stemcells,iPSCs)向心肌样细胞(cardiomyocytes,CMs)分化中的作用。方法:在立式显微镜下,分别摘取胚胎(12.5 d、14.5 d及16.5 d)BALB/c胎鼠、新生(出生1 d,P1)和成年BALB/c小鼠的心脏,提取总RNA,半定量及实时定量PCR分析心脏发育不同时期Integrinβ1的表达。利用悬滴培养形成拟胚体(embryoid body,EB)的方法体外诱导iPSCs向心肌样细胞分化,诱导过程中分别添加Vc和integrinβ1抑制剂(HMβ1-1)处理,共分为3组:对照组、Vc处理组和Vc+HMβ1-1处理组。诱导分化的第3、5、7天,半定量及实时定量PCR检测Oct4、integrinβ1和心肌特异性因子(α-MHC、MLC2a)。用免疫荧光染色法检测心肌特异性结构蛋白心肌肌钙蛋白I(cTnI)的表达。结果:Inte-grinβ1在心脏胚胎发育时期(E12.5、E14.5、E16.5、P1)的表达递增(P<0.01),成年期表达有所回落(P<0.01)。半定量及实时定量PCR的结果提示,Vc组α-MHC、MLC2a的表达显著高于对照组(P<0.01),加integrinβ1抑制剂HMβ1-1后表达量降低(P<0.01)。跳动EBs计数的结果提示,诱导分化第10、14、18、22、26天,Vc组跳动EBs的百分率显著高于对照组(P<0.01);而Vc+HMβ1-1组跳动EBs的百分率相对于Vc组显著降低(P<0.01)。免疫荧光染色显示,Vc组有较强的cTnI表达,添加integrinβ1抑制后,Vc+HMβ1-1组cTnI的表达明显减弱。结论:Vc可促进iPSCs向心肌细胞分化,其机制可能是通过integrinβ1介导。
- 魏婷曾迪欧东波丁璐李雪郑强荪
- 关键词：诱导性多能干细胞小鼠
- 一种心脏立体电生理标测系统用于低强度迷走神经刺激术对在体大鼠心房颤动模型的研究被引量：1
- 2017年
- 目的发明一种适用于大鼠的心脏立体电生理标测系统(3D-CEMS)用于全面评价自主神经功能对心房颤动(简称房颤)及心房电生理特性的影响。方法取大鼠30只,随机分为正常对照组、ACh-CaCl_2注射组、低强度迷走神经刺激(LL-VNS,能引起窦性心动过缓及房室传导延长的临界电压的10%)组。取大鼠正中线与第四肋间或心尖搏动最明显部位交点水平线开胸,充分暴露心脏视野。使用所发明的3D-CEMS标测三组大鼠高位右房、右房、低位右房、左心耳、左房、左房-左肺静脉交界处等6个部位的有效不应期(ERP)、ERP离散度(dERP)及房颤易感窗口(WOV)、总房颤易感窗口(∑WOV)。结果与正常对照组比较,ACh-CaCl_2组和LL-VNS组可显著减少6个标测部位的ERP、延长WOV、增加dERP和∑WOV。LL-VNS组可较ACh-CaC_l2组显著增加各部位的ERP、缩短WOV、减少dERP和∑WOV,对房颤产生明显的抑制作用。结论 3D-CEMS作为一套实用的心房电生理标测工具,可成功用于评价LL-VNS对大鼠心房电生理特性的影响及对房颤的抑制作用。
- 范博渊吴涛李梦颖张维金葵花倪四峰郑强荪
- 关键词：心房颤动心房电生理特性肺静脉左房
- 红细胞分布宽度与阵发性心房颤动导管射频消融术后复发的关系被引量：4
- 2016年
- 目的探讨红细胞分布宽度（RDW）与阵发性心房颤动（简称房颤）导管射频消融术后复发的关系及其相关机制。 方法连续收集2013年1月~2014年12月在本中心行射频消融治疗的阵发性房颤患者，收集其基线资料并随访其术后复发情况。按照复发与否分为复发组与未复发组，统计分析两组间基线资料、实验室检验指标和超声心动图测定值间的差异， Logistic回归分析差异指标对消融术后复发率的预测价值。结果共105人纳入研究，随访（8±4）个月，共计复发36例。统计数据表明：两组间基线资料无明显差异，实验室检测指标和超声心动图测定值中仅RDW在复发组显著高于未复发组（P〈0.05）。二分类Logistic回归分析显示：RDW是阵发性房颤射频消融术后复发的独立预测因素（OR=2.847，P〈0.05）。将RDW采用中值分组后比较示：Q2组较Q1组复发率明显增高（P〈0.05），具有统计学意义。进一步分析显示：当RDW（%）取最佳截断值13.25%时，对阵发性心房颤动术后复发的预测灵敏度达64%，特异度为67%。结论RDW是阵发性房颤患者射频消融术后复发的一项独立预测因素。
- 赵佩廉诚刘雄涛曾迪燕松王翅遥郑强荪
- 关键词：红细胞分布宽度心房颤动导管射频消融复发
- 葛根素在大鼠心肌缺血再灌注损伤中保护作用及机制研究被引量：6
- 2020年
- 目的探讨葛根素(Pue)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将32只成年雄性SD大鼠分为4组:正常对照组(Control组)、缺血再灌注模型组(IR组)、葛根素处理缺血再灌注组(Pue+IR组)和葛根素联合Sirt1抑制剂EX527处理缺血再灌注组(Pue+EX527+IR组),每组8只。采用大鼠离体心脏灌流方法模拟缺血再灌注损伤。氯化三苯基四氮唑染色观察心肌梗死面积;酶联免疫吸附法检测冠脉流出液中乳酸脱氢酶(LDH)水平;记录左室收缩压(LVSP)、左室舒张压(LVDP),评价心脏功能;蛋白免疫印迹法检测凋亡蛋白细胞色素c(cytochrome c)、凋亡诱导蛋白(Bax)和抗凋亡蛋白(Bcl2)的表达,以及沉默信息调节因子1(Sirt1)与其底物叉形头转录因子1(FOXO1)乙酰化水平。结果与Control组比较,IR组梗死面积和LDH水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与IR组比较,Pue+IR组梗死面积和LDH水平显著减小,差异有统计学意义(P<0.05);与Pue+IR组比较,Pue+EX527+IR组梗死面积和LDH水平显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与Control组比较,IR组LVSP显著降低,LVDP显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);与IR组比较,Pue+IR组LVSP显著升高,LVDP显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与Pue+IR组比较,Pue+EX527+IR组LVSP显著降低,LVDP显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与Control组比较,IR组cytochrome c和Bax表达显著增加,Bcl2表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05);与IR组比较,Pue+IR组cytochrome c和Bax表达显著降低,Bcl2表达显著增加,差异有统计学意义(P<0.05);与Pue+IR组比较,Pue+EX527+IR组cytochrome c和Bax表达显著增加,Bcl2表达显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与Control组比较,IR组Sirt1表达显著降低,FOXO1乙酰化表达增加,差异有统计学意义(P<0.05);与IR组比较,Pue+IR组Sirt1表达增加,FOXO1乙酰化表达降低,差异有统计学意义(P<0.05);与Pue+IR组比较,Pue+EX527+IR组Sirt1表达显著降低,FOXO1�
- 王子宽李菁华李炜杨竞霄
- 关键词：葛根素缺血再灌注细胞凋亡
- 葛根素激活Sirt1抑制炎症和纤维化减轻压力负荷诱导小鼠心肌肥厚的研究被引量：3
- 2020年
- 目的探讨葛根素(Pue)在小鼠压力负荷诱导的心肌肥厚中的作用及机制。方法采用小鼠主动脉弓缩窄术(TAC)制备心肌肥厚模型。将48只C57/bl小鼠随机分为假手术组(Sham组)、TAC组、Pue干预TAC组(Pue+TAC组)和Pue联合EX527干预TAC组(Pue+EX527+TAC组),每组12只。Pue+TAC组术后给予65 mg/kg Pue饮用,Pue+EX527+TAC组给予腹腔注射EX527,持续4周,模型组有2只死亡。小动物超声检测左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS),RT-PCR检测钠尿肽(ANP)、脑钠肽(BNP)和β-肌球蛋白重链(β-MHC)的mRNA水平,ELISA检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白介素-1β(IL-1β)的含量,测量4组心脏质量与体质量比值(HW/BW),HE染色和Masson染色分别观察4组心肌细胞横截面积和纤维化程度,Western blot检测CollagenⅠ、α-SMA、沉默信息转录调节因子1(Sirt1)和Ac-FOXO1蛋白的表达。结果与Sham组比较,术后4周,TAC组LVEF和LVFS值显著降低,ANP、BNP和β-MHC的mRNA水平及血清TNF-α和IL-1β含量增加,心肌细胞横截面积明显增大,纤维化加重,CollagenⅠ和α-SMA蛋白表达增加,Sirt1蛋白水平显著降低,Ac-FOXO1水平增加(P<0.01);与TAC组比较,用Pue处理后,可显著提高心脏LVEF和LVFS,降低ANP、BNP和β-MHC的mRNA水平以及血清中TNF-α和IL-1β含量,减小心肌细胞横截面积和纤维化程度,增高Sirt1蛋白水平,降低Ac-FOXO1水平(P<0.01)。结论Pue可通过抑制心脏炎症反应和纤维化,减轻压力负荷诱导的病理性心肌肥厚。
- 王子宽李菁华李炜杨竞霄
- 关键词：葛根素左心室射血分数
- microRNA-1和microRNA-133参与小鼠诱导多能干细胞向心肌的分化被引量：2
- 2015年
- 目的研究microRNA-1(miRNA-1)和microRNA-133(miRNA-133)对小鼠诱导多能干细胞(mi PSCs)向心肌分化的影响。方法 RT-PCR分析mi PSC分化过程中microRNA-1和microRNA-133的表达变化;microRNA-1和micro-133反义寡核苷酸转染mi PSCs,增强miRNA-1和miRNA-133表达;并按照转染分子的不同,将细胞分为对照组(添加miRNA-U6)、miRNA-1组、miRNA-133组和miRNA-1+miRNA-133组。RT-PCR、q-PCR和免疫荧光化学染色检测miRNA转染并诱导mi PSCs分化后,各组细胞内miRNA-1和miRNA-133的表达变化以及心肌细胞相关特异性基因和蛋白的变化。结果 mi PSCs心肌分化过程中miRNA-1,miRNA-133的表达具有差异性,均在后期有显著增高(P<0.01);在分化过程中单独过表达miRNA-1和miRNA-133对心肌的分化并未有促进作用,但共表达miRNA-1和miRNA-133后,却显著增加心肌细胞的搏动数量和心肌基因的表达,并且促进了心肌细胞成熟。结论 miRNA-1和miRNA-133通过协同作用促进mi PSCs体外分化为心肌细胞,显著提高mi PSC向心肌细胞定向分化效率。
- 丁璐李晓莉曾迪陈焱欧东波魏婷郑强荪
- 关键词：MICRORNA诱导性多能干细胞心肌细胞
