深圳市科技局资助项目(200902100)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：冉云邓欣杨大国吴其恺刘成海更多>>
- 相关机构：湖北中医药大学深圳市第三人民医院上海中医药大学更多>>
- 发文基金：深圳市科技局资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 甲胎蛋白表达缺失的人肝癌HepG2细胞株的构建被引量：2
- 2011年
- 目的:建立甲胎蛋白(AFP)表达缺失的HepG2细胞株。方法:选择AFP的RNA干涉靶序列,体外合成两段互补的寡核苷酸,与线性化的pll 3.7连接,扩增纯化得到所需质粒。鉴定后将质粒用慢病毒包装、纯化得到病毒粗提液,与HepG2细胞共培养,转染后用RT-PCR和Western blot实验检测细胞AFP的表达情况。结果:RT-PCR和Western blot实验显示,干扰后HepG2细胞AFP基因和蛋白的表达显著减少。干扰效率达84%。所得细胞株传代后仍仅能检测到微量AFP表达。结论:成功构建稳定的AFP表达接近缺失的HepG2模型细胞株。
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- 关键词：甲胎蛋白基因干扰肝癌细胞
- 外源性甲胎蛋白对甲胎蛋白表达缺失HepG2细胞系增殖与凋亡的影响
- 2013年
- 目的:观察不同浓度外源性甲胎蛋白(AFP)对AFPsiRNA-HepG2细胞系(AFP表达缺失HepG2细胞系)的增殖与凋亡的影响。方法:体外培养AFPsiRNA-HepG2细胞,将细胞分为对照组,100μg/ml、10μg/ml、1μg/ml、0.1μg/ml、0.01μg/ml AFP 6组,MTT法检测细胞增殖;Annexin V-APC/7-AAD染色、流式细胞术检测细胞凋亡百分比。结果:MTT结果提示,与阴性对照组比较,100μg/ml AFP组显著抑制细胞增殖(P<0.01),低于100μg/mlAFP组促进细胞增殖(P<0.05);流式细胞术结果提示,与阴性对照组比较,100μg/ml AFP组显著诱导细胞凋亡(P<0.01),低于100μg/ml AFP干预组对细胞凋亡无影响(P>0.05)。结论:低于100μg/ml AFP可促进细胞增殖,高于100μg/ml AFP可显著抑制细胞增殖,并诱导其发生凋亡。
- 冉云邓欣杨大国吴其恺陈文林陶艳艳
- 关键词：甲胎蛋白增殖凋亡
- 正肝方药物血清对甲胎蛋白刺激的AFPsiRNA-HepG2细胞系增殖的影响被引量：1
- 2011年
- [目的]观察中药正肝方药物血清对甲胎蛋白(AFP)刺激的AFPsiRNA-HepG2细胞增殖的影响。[方法]正肝方浸膏粉经灌胃给药制备正肝方大鼠血清,体外培养AFPsiRNA-HepG2细胞,将细胞分为5%正常大鼠血清、5%正肝方血清、10%正常大鼠血清、10%正肝方血清、5%正常大鼠血清加AFP刺激、5%正肝方血清加AFP刺激、10%正常大鼠血清加AFP刺激、10%正肝方血清加AFP刺激共8组,MTT法检测细胞增殖。[结果]无AFP刺激时,正肝方血清组与正常大鼠血清组OD值差异无统计学意义(P>0.05);有AFP刺激时,正肝方血清组与正常大鼠血清组OD值差异有统计学意义(P<0.01),正肝方血清组显著抑制AFPsiRNA-HepG2细胞增殖。[结论]正肝方血清通过影响AFP介导的AFPsiRNA-HepG2细胞的增殖抑制肝癌细胞增殖。
- 邓欣冉云杨大国吴其恺刘成海
- 关键词：正肝方甲胎蛋白增殖
