国家自然科学基金(81171222)
- 作品数：11 被引量：60H指数：5
- 相关作者：余年狄晴陈艳张燕芳张亢更多>>
- 相关机构：南京医科大学附属脑科医院南京医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 高迁移率族蛋白B1拮抗剂BoxA对癫痫大鼠的脑保护作用
- 2014年
- 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(high mobility group box 1,HMGB1)拮抗剂BoxA对癫痫大鼠发作与海马损伤的影响。方法:将雄性SD大鼠随机分为假手术组、癫痫模型(EP)组和高、中、低剂量BoxA干预组;海马微量注射海人酸制作癫痫大鼠模型,造模前侧脑室注射不同剂量BoxA对大鼠进行干预,其中假手术组海马及侧脑室分别注射等体积生理盐水。记录各组大鼠达到Ⅲ级发作的潜伏时间(seizure onset time,SOT),作为评价癫痫发作易感性指标;HE染色观察脑组织病理变化,NeuN免疫组化染色评价海马神经元丢失情况,作为评价脑组织损伤指标,磷酸化细胞核因子κB-p65(p-NFκB-p65)免疫组化染色观察其表达情况。结果:高、中、低剂量BoxA干预组大鼠SOT均显著长于EP组(P<0.05);与EP组相比,BoxA干预组海马组织损伤均明显减轻,神经元丢失减少(P<0.05);高剂量BoxA干预组较中低剂量干预组SOT延长、脑组织损伤程度减轻,但差异无统计学意义;高、中剂量BoxA干预组大鼠p-NFκB-p65表达水平较EP组明显降低(P<0.05),而低剂量BoxA干预组与EP组间差异未显示统计学意义。结论:HMGB1拮抗剂BoxA可通过抑制NFκB活化,降低大鼠的癫痫易感性,减轻脑组织损伤,具有一定脑保护作用。
- 郝劲博黄贤径余年张燕芳狄晴
- 关键词：癫痫高迁移率族蛋白B1海马
- 癫痫发作的诱发因素调查被引量：22
- 2017年
- 目的调查癫痫发作常见诱发因素，探讨各诱因间的相关性及其与癫痫临床特点的关系。方法连续收集2015年4月至2016年4月就诊于南京脑科医院癫痫专科门诊的154例癫痫确诊患者，年龄〉16岁，病程≥1年，每年发作≥1次，且最近3个月至少有1次发作。采用封闭式问卷与开放式面谈相结合方式采集病史和诱因，分别询问患者近3个月内和3个月前发作是否存在某种诱因，并探讨癫痫发作诱因之间相关性，及其与癫痫患者年龄、性别、病程、发作类型、发作频率等临床特点的关系。结果125例患者（81.2%）认为至少存在一种诱因，常见诱因依次为情感应激（56.0%）、睡眠紊乱（38.4%）、疲劳（27.2%）、漏服药物（20.0%）。同一患者可有1～6种不等的诱因，其中60.8%认为存在两种及以上诱因；情感应激与睡眠紊乱和疲劳间存在一定关联（χ2＝4.665，8.668；均P〈0.05）。特发性癫痫患者对睡眠紊乱较为敏感；未发现总诱因与年龄、性别、起病年龄、病程、发作类型、发作频率、服药数量等临床特点的关系。结论癫痫发作的诱因广泛存在；情感应激、睡眠紊乱、疲劳和漏服药物是最常见的诱因，其中情感应激与睡眠紊乱和疲劳间存在一定关联；总诱因与患者人口学特征、临床特征无关，但各种诱因在不同人口学和临床特征的患者间分布存在差异。
- 尹延肖余年周龙祥程永菲狄晴
- 关键词：癫痫应激心理学睡眠紊乱
- 核转录因子-κB/低氧诱导因子-1α通路活化对癫痫持续状态大鼠海马神经元损伤的影响被引量：5
- 2015年
- 目的 观察核转录因子-κB p65（NF-κB p65）和低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在癫痫持续状态（status epilepticus,SE）大鼠海马神经元损伤中的作用,探讨NF-κB p65对HIF-1α的调控作用.方法 选择110只成年雄性SD大鼠,随机数字表法分成7组：生理盐水对照组15只、假手术组15只、SE模型组20只、NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）组15只、SE＋ PDTC干预组（SE ＋PDTC）15只、SE＋ HIF-1α siRNA侧脑室注射干预组（SE＋ HIF-1α siRNA）15只、SE＋对照siRNA侧脑室注射假性干预组（SE＋对照siRNA）15只.采用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射法制作SE模型,观察大鼠癫痫发作情况,造模后24 h采用蛋白免疫印迹分析检测海马中NF-κB p65和HIF-1α的表达水平;采用Fluoro-Jade C（FJC）染色法检测海马退行性变神经元.结果 SE后24 h,海马NF-κB p65和HIF-1α核蛋白含量（0.57 ±0.06、0.47 ±0.07）比对照组（0.23 ±0.03、0.20 ±0.03）增高,差异具有统计学意义（P＜0.05）;PDTC干预后,海马核蛋白NF-κB p65和HIF-1α含量（0.23 ±0.03、0.14 ±0.03）比SE组降低,CA1区FJC阳性细胞（28.33±5.03）比SE组（76.67±13.32）也减少,差异均具有统计学意义（P＜0.05）;SE大鼠侧脑室注射HIF-1αsiRNA后,海马HIF-1α全蛋白含量（0.22±0.03）比SE组（0.39±0.06）降低,CA1区FJC阳性细胞（27.34±7.02）比SE组（76.67±13.32）也减少,差异均具有统计学意义（P＜0.05）.结论 癫痫持续发作可导致脑内NF-κB/HIF-1α通路活化,抑制NF-κB/HIF-1α通路的活化能减轻SE所致的海马神经元损伤,具有脑保护作用.
- 张亢余年谢渊陈艳狄晴
- 关键词：癫痫持续状态海马神经元缺氧诱导因子1,Α亚基
- 自身免疫性癫痫研究进展被引量：13
- 2017年
- 癫痫是神经系统常见的致残性疾病,目前的抗癫痫药物（antiepileptic drugs,AEDs）均是针对癫痫发作症状的控制,迄今仍有20％ ～ 40％的癫痫患者对AEDs不敏感,成为耐药性癫痫（drug-resistant epilepsy,DRE）[1].癫痫病因复杂多样,越来越多的研究支持部分癫痫,尤其是DRE可能是一种自身免疫性癫痫（autoimmune epilepsy,AE）[2].
- 余年狄晴
- 关键词：抗癫痫药物自身免疫性DRUGS耐药性癫痫癫痫发作AEDS
- 饮食与癫痫——临床的误区和困惑
- 2016年
- 饮食禁忌是所有癫痫患者及家属、医生关心的话题之一.癫痫患者饮食受癫痫发作频率、服用抗癫痫药物(AEDs)以及当地经济水平和文化习俗影响.为进一步全面了解癫痫患者饮食禁忌,现将对饮食与癫痫相关文献进行综述,为我国临床医生提供参考,以便科学指导癫痫患者及其家属合理膳食,并为在我国开展相关研究提供线索.在作出癫痫患者科学膳食指南之前,需要对癫痫人群营养、膳食情况进行规范系统的流行病学调查,尤其是人口众多、饮食文化背景特殊的中国人群.
- 余年狄晴
- 关键词：癫痫饮食维生素
- 高迁移率族蛋白1对小鼠脑微血管内皮细胞P-糖蛋白表达的影响被引量：6
- 2015年
- 目的癫痫脑内可大量释放高迁移率族蛋白1(high mobility group box protein 1,HMGB1),但针对HMGB1与癫痫脑内血管内皮细胞过表达的耐药蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)关系的研究甚少。文中探讨HMGB1对体外培养的小鼠脑微血管内皮细胞P-gp表达的影响。方法体外培养永生化小鼠脑微血管内皮细胞株b End.3,分为不同浓度HMGB1组(10、100、500、1000 ng/m L HMGB1处理b End.3细胞8 h);不同时间HMGB1处理组(以100 ng/m L HMGB1处理b End.3细胞4、8、16、24、32 h);对照组(给予等量正常培养基)。采用实时定量PCR检测b End.3细胞中P-gp编码基因多药耐药基因1a(mdr1a)mRNA表达水平,免疫印迹法、免疫细胞化学法检测P-gp蛋白表达水平。结果 q PCR结果显示:10、100、500、1000ng/m L HMGB1组mdr1a mRNA表达量分别为1.646±0.176、1.777±0.135、1.617±0.043和1.398±0.182,较对照组(1.030±0.284)明显升高(P<0.05)。HMGB1处理4、8、16、24、32 h组mdr1a mRNA表达量分别为2.655±0.112、2.168±0.212、1.823±0.232、1.418±0.376和1.445±0.123,较对照组(1.010±0.164)明显升高(P<0.05)。免疫印迹法结果显示:与对照组比较,各浓度组P-gp蛋白表达水平均增高(P<0.05),HMGB1处理8、16 h组P-gp蛋白表达增高(P<0.05)。免疫细胞化学染色结果显示:100 ng/m L HMGB1处理16 h后P-gp蛋白表达灰度值(110.843±4.036)较对照组(160.303±2.193)明显减少(P<0.01)。结论 HMGB1能够上调小鼠脑微血管内皮细胞耐药蛋白P-gp和其编码基因mdr1a表达,可能与中枢神经系统疾病尤其是癫痫的耐药相关。
- 陈艳余年解渊张亢狄晴
- 关键词：高迁移率族蛋白1脑微血管内皮细胞P-糖蛋白癫痫
- 下调孕烷X受体表达对谷氨酸诱导的小鼠脑微血管内皮细胞P-糖蛋白表达和功能的影响被引量：1
- 2018年
- 目的探索下调孕烷X受体(PXR)表达对谷氨酸(GLU)模拟癫痫发作环境下小鼠脑微血管内皮细胞(m BMEC) P-糖蛋白(P-gp)表达和功能的影响。方法体外培养小鼠脑微血管内皮b End. 3细胞,分为不同浓度GLU处理组(以0μmol/L、10μmol/L、50μmol/L、100μmol/L GLU处理细胞30 min),GLU不同时间处理组(以100μmol/L GLU处理细胞0 min、15 min、30 min);使用siRNA-PXR特异性抑制PXR表达,分为对照siRNA(NC siRNA)+GLU组、siRNA-PXR+GLU组。Western blotting检测细胞PXR和P-gp蛋白表达,细胞免疫荧光法检测细胞核内PXR蛋白表达,RT-qPCR检测细胞P-gp mRNA表达,罗丹明123(Rh123)细胞蓄积实验检测P-gp外排功能。结果与空白组相比,50μmol/L和100μmol/L GLU组PXR和P-gp蛋白表达均增高(均P <0. 05),尤以100μmol/L组PXR和P-gp蛋白表达最明显。与空白组相比,15 min和30 min组PXR蛋白表达均增加(均P <0. 05),30 min组P-gp蛋白表达增加(P <0. 05)。与空白组相比,100μmol/L GLU组胞核内PXR表达增加(P <0. 05)。与NC siRNA+GLU组相比,siRNA-PXR+GLU组PXR蛋白表达下调了37%[(1. 00±0. 00) vs (0. 63±0. 18); t=3. 41,P=0. 02],P-gp蛋白表达下调了43%[(1. 00±0. 00) vs(0. 57±0. 09); t=7. 94,P=0. 00],P-gp mRNA表达下调了52%[(1. 00±0. 04) vs (0. 48±0. 08); t=10. 98,P=0. 00]。GLU组细胞内Rh123荧光强度(0. 72±0. 01)较空白组降低[(1. 00±0. 03); t=9. 66,P=0. 00];GLU+维拉帕米(P-gp抑制剂)组(1. 07±0. 04)较GLU组增高(t=-11. 93,P=0. 00); siRNA-PXR+GLU组(0. 91±0. 03)较NC siRNA+GLU组增高[(0. 69±0. 05); t=-7. 52,P=0. 00]。结论下调PXR表达能够抑制m BMEC在GLU模拟癫痫发作环境下的P-gp表达及其功能,提示PXR参与调控癫痫发作诱导血-脑屏障P-gp表达及其功能。
- 程永菲余年狄晴
- 关键词：孕烷X受体P-糖蛋白谷氨酸脑微血管内皮细胞耐药性癫痫
- 不同类型重症肌无力患者的神经电生理特点及临床被引量：2
- 2022年
- 目的探讨不同分型重症肌无力(MG)患者的神经电生理特点及相关抗体类型,并分析影响不同类型MG患者预后的相关因素。方法选取南京医科大学附属脑科医院神经内科2018年11月至2020年6月住院期间确诊为MG的患者72例,依据美国重症肌无力基金会临床分型分为单纯眼肌型(OMG)及全身型(GMG),其中OMG患者31例,GMG患者41例。比较两组患者间的临床资料及神经电生理特点。随访1年后记录各时间点主要终点事件(包括恶化、复发及死亡)及次要终点事件(其他感染)的发生情况,采用多因素回归分析,确定影响不同类型MG患者预后的相关因素。结果通过对OMG组与GMG组比较发现,GMG组患者多合并胸腺瘤(P<0.05)、伴发单抗体阳性(P<0.05),且在三角肌处低频重复神经电刺激阳性率最高。且随着病情进展,OMG易向GMG转化,复发风险较高(χ^(2)=4.433,P=0.035)。通过多因素回归分析显示,多种类型抗体阳性、胸腺瘤是MG患者预后不良的独立危险因素。结论相较于OMG患者,GMG患者常合并单抗体阳性,且多合并胸腺瘤,有病情加重风险。多个抗体阳性和胸腺瘤是MG患者预后不良的独立危险因素。
- 刘艳艳陈月秋赵晓丽尹俊雄
- 关键词：重症肌无力重复神经电刺激抗体复合肌肉动作电位
- 高迁移率族蛋白B1对癫痫大鼠海马P-糖蛋白表达的影响被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(high-mobility group box-1,HMGB1)对癫痫大鼠脑P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的调控作用。方法:将60只雄性SD大鼠随机分为假手术组,癫痫组,低、中、高剂量HMGB1干预组,每组12只。采用海马微量注射海人酸(kainic acid,KA)制作癫痫大鼠模型,各HMGB1干预组于注射KA前15 min,通过侧脑室微量注射不同剂量重组HMGB1蛋白进行干预。记录癫痫大鼠自注射KA后至初次达到Ⅲ级发作的时间(seizure onset time,SOT),作为评价癫痫发作易感性指标;造模成功24 h后处死大鼠,分别采用免疫组化法、实时定量荧光PCR和蛋白质免疫印迹法检测并比较各组大鼠海马组织损伤、P-gp多药耐药基因1(multidrug resistance-1,mdr1)mRNA及蛋白表达。结果:与癫痫组比较,中、高剂量HMGB1干预组SOT缩短(P<0.05),海马组织结构紊乱,海马CA3区神经元过度丢失(P<0.05),海马mdr1 mRNA及P-gp表达增加(P<0.05)。而低剂量HMGB1干预组与癫痫组比较,以上各项指标差异则无统计学意义(P>0.05)。结论:HMGB1可增加癫痫鼠发作易感性,加重海马组织损伤,促进海马组织P-gp过表达。
- 黄贤径郝劲博狄晴余年张燕芳闻芳陈艳
- 关键词：癫痫高迁移率族蛋白B1P-糖蛋白海马
- 自身免疫性癫痫被引量：6
- 2013年
- 迄今，临床仍有约1／3的癫痫患者对现有抗癫痫药物（AEDs）不敏感，发展为耐药性癫痫（DRE）[1]。随着对癫痫发病机制的深入研究和免疫学的飞速发展，有学者㈦将一系列自身抗体或免疫细胞（如T淋巴细胞等）介导的癫痫，称之为自身免疫性癫痫（AE）或免疫介导性癫痫。
- 李乐超余年狄晴
- 关键词：抗癫痫药物自身免疫性免疫介导性耐药性癫痫癫痫患者免疫细胞
