公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-8

全选清除导出

排序方式：

猪气喘病实验猪模型的建立被引量：21: 2007年; 目的研究建立猪气喘病人工发病模型。方法将分离得到的一株猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)Js株进行各种试验鉴定,证实其为Mhp强毒株。每头猪肺内接种Js株培养物2ml,15～25d后观察临床症状和病理变化,采集病变组织,经冻干制成攻毒用组织毒。安检合格,批号为20000324。给15头小梅山二元杂交猪分别气管内注射以KM_2培养基作10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)和10^(-5)稀释的强毒,每头猪5ml,对照组注射培养基。攻毒后25d观察试验猪临诊症状,X线透视,记录病理变化。结果10^(-2)、10^(-3)、10^(-4)稀释的强毒试验组猪均出现了典型的猪气喘病临床症状和病理变化。结论人工发病试验测得Mhp Js株组织强毒接种气管内注射最小发病剂量为10^(-4)稀释5ml,正式试验人工发病可用100个最小发病剂量即强毒冻干物1:100稀释气管内注射5ml,可确保攻毒成功。; 邵国青刘茂军孙佩元王继春杜改梅周勇岐刘冬霞; 关键词：猪气喘病猪肺炎支原体

猪肺炎支原体P97单抗的生物学特性鉴定及初步应用被引量：2: 2007年; 对已成功制备的猪肺炎支原体P97原核表达产物单抗进行生物学特性鉴定。鉴定结果为:两株单抗的免疫球蛋白亚类均为IgG1,亲和常数分别为52 mg/L,46 mg/L。单抗腹水中的间接ELISA效价分别为1×106和1×105。两株单抗特异性的识别猪肺炎支原体168株97kD左右的抗原成分。在Dot-ELISA试验中,两株单抗均与猪肺炎支原体反应,而与猪鼻支原体(Mh)、猪絮状支原体(Mf)和鸡毒支原体(Mg)无交叉反应。进一步将该单抗用于单抗阻断ELISA中,检测了36份血清样,其中9份呈阳性,检测结果与IDEXX公司猪肺炎支原体抗体检测试剂盒的结果基本吻合,从而为猪肺炎支原体诊断试剂盒的研制及猪气喘病早期诊断方法的建立奠定了基础。; 苏锐邵国青; 关键词：猪肺炎支原体单克隆抗体生物学特性

检测猪肺炎支原体抗体间接ELISA方法的建立被引量：16: 2007年; 选用猪肺炎支原体Mhp J株培养物制备抗原,建立检测猪肺炎支原体抗体的间接ELISA(酶联免疫吸附)方法。结果显示,ELISA试验的最佳反应条件为:抗原包被浓度为1.5μg/ml,待检血清的最佳稀释浓度1∶100,2%明胶作封闭液,抗原抗体最佳结合时间为90 min,酶标抗体1∶10 000(体积比)稀释,最佳作用时间为60 min。对136份样品检测结果表明,建立的猪肺炎支原体间接ELISA抗体检测方法与美国IDEXX公司生产的猪肺炎支原体抗体检测试剂盒检测的符合率达到83.8%,假阴性率8.8%,假阳性率1.5%。; 刘茂军靳岷杜改梅邵国青张映; 关键词：猪肺炎支原体间接ELISA

猪肺炎支原体黏附因子P97基因抗原区的克隆与表达: 2006年; 根据Genbank中猪肺炎支原体J株模式株(ATCC25934或NCTC10110),设计一对特异性引物,通过聚合酶链式反应(PCR)扩增出猪肺炎支原体168株特异性蛋白P97基因序列的R1R2区序列,经测序确认后,克隆入原核表达载体pET-32a(+)的EcoRI和XhoI位点之间,转化宿主菌BL21,将筛选出的阳性克隆用IPTG诱导,通过SDS_PAGE电泳进行鉴定,结果表明,p97蛋白基因获得了表达,这为猪肺炎支原体免疫检测与诊断以及新型疫苗的研制提供了重要条件。; 李颖平邵国青张映; 关键词：猪肺炎支原体克隆

猪支原体肺炎活疫苗(168株)临床试验被引量：9: 2009年; 本试验用中间试制生产的猪支原体肺炎活疫苗(168株),在河南3个猪场进行了临床试验,先后免疫猪7000多头,观察发病率和生产指标。屠宰场跟踪随机抽样,观察屠宰后肺部病变,结果表明:猪支原体肺炎发病率减少,肺部病变减轻,而生产指标有明显提高,饲料报酬率提高。这表明猪支原体活疫苗对猪安全有效,能有效预防猪喘气病。; 刘茂军苗连叶赵永前苏国东周勇岐王继春孙佩元邵国青; 关键词：猪支原体肺炎疫苗效力肺部病变

猪肺炎支原体P97基因原核表达产物单抗的制备被引量：7: 2005年; 目的　纤毛黏附因子P97是猪肺炎支原体特异性的外膜蛋白 ,该蛋白C端的R1区是其主要的抗原决定簇。本研究以大肠杆菌表达的P97黏附因子R1融合蛋白作为免疫原免疫BALB/c鼠制备单克隆抗体。通过酶联免疫吸附实验(ELISA)平行筛选 ,获得两株单克隆抗体杂交瘤细胞株A9-H7、H11-E7。两株杂交瘤细胞经体外连续传代 1个月并冻存复苏后均能分泌高效价的抗融合蛋白抗体 ,并能在小鼠体内形成肿瘤 ,有效诱导产生高效价的腹水抗体。两株单抗腹水的ELISA效价分别为 1× 10 6和 1× 10 5。且均与天然Mhp16; 苏锐邵国青张映; 关键词：猪肺炎支原体融合蛋白单克隆抗体 ELISA

猪支原体肺炎活疫苗(168株)临床试验研究: 本实验用中间试制生产的猪支原体肺炎活疫苗(168株),在河南三个猪场进行了临床试验,先后免疫猪7千多头,观察发病率和生产指标.屠宰场跟踪随机抽样,观察屠宰后肺部病变,结果表明:猪支原体肺炎发病率减少,肺部病变减轻,而生产...; 刘茂军赵永前苗连叶苏国东周勇岐王继春孙佩元邵国青; 关键词：猪支原体肺炎疫苗效力肺部病变; 文献传递

猪肺炎支原体P97基因抗原决定簇R1区的克隆与表达被引量：14: 2005年; 通过引物定点突变PCR法,扩增了猪肺炎支原体(Mhp)168株黏附因子P97基因抗原决定簇R1区基因片段,并将该基因片段插入表达载体pET-32 a(+)中构建重组质粒,再将该重组质粒转入大肠杆菌BL21(DE3)。DNA序列分析结果表明所构建的重组质粒含有正确的目的基因。经0.1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)37℃诱导4 h,重组质粒表达的目的蛋白量可达到总蛋白的23%。W estern b lotting和ELISA试验结果证明所表达的重组蛋白具有猪肺炎支原体抗原性。; 刘茂军邵国青张映聂向庭; 关键词：猪肺炎支原体克隆

全选清除导出

共1页<1>

江苏省自然科学基金(BK2004169)