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乳酸乳球菌在疫苗递呈载体中的应用被引量：5: 2014年; 乳酸菌是人和动物肠道内的常见细菌,被公认为安全级微生物。近年来,对于乳酸菌作为宿主菌表达外源蛋白或抗原的研究取得了一定进展。乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)是乳酸菌的模式菌种,其基因组测序已经完成,因而方便研究者根据实际需要利用分子生物学工具将其改造为各种表达载体可用的受体菌。目前已经开发了一系列质粒型克隆载体和整合型克隆载体系统及蛋白定位系统,已有多种病原微生物抗原成功在乳酸乳球菌中表达,重组乳酸乳球菌作为粘膜免疫疫苗的递呈载体呈现非常好的应用前景,文章介绍了近年来乳酸乳球菌在疫苗递呈载体中的应用情况,重点阐述了其在抗感染、抗肿瘤、抗自身免疫性方面的研究进展及其在疫苗研制中遇到的困难及需要解决的问题,并对其应用前景进行了展望。; 刘晓锐张晓红吴洁; 关键词：乳酸乳球菌疫苗抗原粘膜免疫

一种带有组氨酸标签的抗糖尿病疫苗的构建、表达、纯化及鉴定被引量：1: 2013年; 利用组氨酸标签系统提高抗糖尿病疫苗HSP65-6P277融合蛋白的产量,简化纯化工艺。通过PCR方法,在融合蛋白HSP65-6P277的N端添加6个组氨酸标签后,定向克隆到pET28a原核表达载体中成功构建了组氨酸标签融合表达载体pET28a-HIS-HSP65-6P277。通过乳糖诱导,融合蛋白HIS-HSP65-6P277在大肠杆菌BL21(DE3)宿主中以可溶形式表达,镍柱亲和层析纯化后,经SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明表达产物是约70 k具有6个组氨酸标签肽的融合蛋白;分离纯化融合蛋白的时间从原来的15～20 d缩短为2～3 d,产量提高到56 mg/L。组氨酸标签系统可以较好的简化抗糖尿病疫苗HSP65-6P277融合蛋白的纯化工艺,提高产量。; 杨雪刘晓锐邢芸徐茂磊金亮刘景晶吴洁; 关键词：疫苗组氨酸标签

重组HSP65-6P277乳酸乳球菌疫苗对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠的降糖作用被引量：2: 2014年; 探讨表达HSP65-6P277蛋白的乳酸乳球菌活载体疫苗对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠的降糖作用及可能的作用机制。采用多次小剂量腹腔注射STZ建立1型糖尿病模型。将诱导型表达菌株Lactococcus lactis NZ9000pCYT∶HSP65-6P277和组成型表达菌株L.lactis NZ9000 pHJ∶HSP65-6P277及无关蛋白对照菌株L.lactis NZ9000 pCYT∶Nuc灌胃1型糖尿病小鼠(2×109CFU,200μL),每天灌胃1次,连续7 d,之后每周灌胃1次,持续16周。每月从小鼠眼眶静脉丛取血1次,血糖检测仪检测STZ造模小鼠血糖水平并称体重。4个月后将小鼠处死,取小鼠脾脏做脾细胞增殖实验,采用ELISA试剂盒分别检测脾细胞上清液中的IL-10和IFN-γ细胞因子水平以及血清IgG抗体水平。结果显示,与对照组相比,pCYT∶HSP65-6P277组和pHJ∶HSP65-6P277组可以一定程度上降低STZ造模小鼠血糖水平(P<0.05),并能维持其正常体重稳定,降低脾细胞针对HSP65和P277的增殖(P<0.05),脾细胞上清液中IFN-γ细胞因子水平明显降低(P<0.05),血清IgG抗体水平无明显差异(P>0.05)。; 吴洁刘晓锐杨雪侯景徐茂磊申丽丽黄东成刘坤锋; 关键词：乳酸乳球菌疫苗黏膜免疫 1型糖尿病

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