山东省自然科学基金(ZR2011HQ030)
- 作品数：4 被引量：10H指数：2
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- 相关机构：山东省医学科学院济南市传染病医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 两株不同毒力EV71全基因组序列测定及分析被引量：4
- 2012年
- 目的了解济南市2008年EV71的流行和变异情况,寻求潜在的EV71毒力决定位点。方法采用分段扩增的RT-PCR方法对EV71JN200803和JN200804株的基因组全长进行扩增、测序。对两株EV71的全基因组核苷酸、氨基酸序列进行比较,对非编码区进行RNA二级结构的预测和分析,并对VP1区和全基因组进行遗传进化分析。结果 EV71JN200803和JN200804株的基因组全长分别为7 405nt和7 404nt,编码区没有核苷酸的插入和缺失,全基因组序列的组成和结构均符合肠道病毒71型的特征。JN200803和JN200804全基因组有106个核苷酸突变,编码区98个,非编码区8个,编码区多数属于同义突变,仅造成16个氨基酸突变。遗传进化分析显示,EV71JN200803和JN200804株与2008年国内其他流行株同属C4亚型的C4a进化分支,与Fuyang/17.08/1株进化关系最近。结论 2008年济南市流行的EV71属于C4a亚型,济南分离株的毒力决定位点不但具有非单一性,而且具有较为独特的济南区域特点。
- 李鹏宋楠楠岳盈盈李志会张颖盖中涛孟红
- 关键词：EV71毒力全基因组
- 不同毒力EV71济南分离株全基因组序列比较分析被引量：2
- 2013年
- 目的研究EV71济南分离株的基因特点,寻找潜在的EV71毒力决定位点。方法将6株EV71济南分离株(JN200803、JN200804、Jinan1002、Jinan1004、Jinan1005和Jinan1006株)分别接种1d龄BALB/c小鼠,确定其对小鼠的致病性程度。对6株EV71全基因组核苷酸、氨基酸序列进行比较,对非编码区进行RNA二级结构的预测和分析,对VP1区进行遗传进化分析。结果通过动物实验可将6株EV71济南分离株分为强、中、弱毒力株。小鼠感染强毒株(JN200804、Jinan1002、Jinan1004、Jinan1005株)的主要症状为后肢麻痹并死亡,感染弱毒株(Jinan1006株)的主要症状为后肢麻痹但能自愈,感染无毒株(JN200803株)未引起明显症状。不同毒力EV71分离株全基因组序列比对发现,共有40个核苷酸位点的差异,导致编码区8个氨基酸突变,其中第937位氨基酸(位于2A片段)在强毒株、弱毒株和无毒株间发生了连续突变(937aa:S→C→G)。非编码区RNA二级结构预测表明,5′UTR第115位核苷酸突变对内部核糖体进入位点(IRES)的结构有较大影响。遗传进化分析显示,与国内2003年以后的流行毒株相同,6株EV71济南分离株均属C4亚型的C4a进化分支。结论全基因组序列比较分析发现不同毒力EV71济南分离株之间存在差异位点,为采用反向遗传学方法鉴定EV71毒力决定位点奠定了基础。
- 李鹏李志会岳盈盈宋楠楠纪璇张颖盖中涛孟红
- 关键词：EV71毒力全基因组
- EV71不同接种途径对BALB／c小鼠的感染特点被引量：2
- 2013年
- 目的研究EV71JN200804株对1日龄BALB／c小鼠的感染特点，建立EV71感染BALB／c小鼠的动物模型，为疫苗和抗病毒药物的研究提供可靠的动物评价工具。方法EV71JN200804株分别采用口服、颅内注射、肌内注射和腹腔注射感染1日龄BALB／e小鼠，出现后肢麻痹后，做后肢电生理检测；安乐动物，采集脑、脊髓、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胸腺、小肠及后肢肌肉，进行动物体内的病毒分离和RT-PCR鉴定，同时对各器官组织进行组织病理学观察。结果接种EV71后，颅内、肌内和腹腔注射组小鼠体重增长缓慢，4～5d出现后肢麻痹，7d左右死亡。RT—PCR和病毒分离表明颅内、肌内和腹腔注射组的肌肉分离到病毒，颅内注射组脊髓也分离到病毒，经RT—PCR鉴定为EV71感染。肌电图显示颅内、肌内和腹腔注射组的时限显著增加，波幅显著降低，判断小鼠后肢麻痹可能既有神经源性损害又有肌源性损害。组织病理学观察发现，颅内、肌内、腹腔注射组小脑浦肯野细胞及颗粒细胞减少，脊髓前角白质区神经纤维肿胀，后肢肌肉组织大片坏死溶解、炎性细胞浸润，肺组织明显充血，局部心肌细胞肿胀，部分肝组织内可见巨噬样细胞及淋巴样细胞浸润，部分肾皮质中肾小球萎缩、数目减少，而口服组无明显病理变化。结论EV71JN200804株通过颅内、肌内和腹腔注射三种途径均能感染并导致1日龄BALB／c小鼠后肢麻痹，此动物模型可用于EV71致病机制和特异性抗病毒药物的研究及疫苗的评价。
- 李鹏岳盈盈宋楠楠李志会孟红
- 关键词：肠道病毒属小鼠近交BALB动物
- EV71临床分离株BALB/c小鼠致病特点分析被引量：3
- 2012年
- 目的将肠道病毒71型(EV71)临床分离株接种小鼠观察其致病特点。方法将6株EV71临床株分别腹腔接种1日龄BALB/c小鼠,观察小鼠表现以及脑、肺脏、骨骼肌组织病理变化;采用免疫组化和RT-PCR方法,检测组织中病毒抗原和基因片段。结果临床分离的6株EV71(C4亚型)接种1日龄小鼠均出现病症,其中JN200804株实验小鼠症状较重,小鼠脑组织和骨骼肌可观察到细胞空泡变性、淋巴细胞浸润等病理变化;JN200804株感染组小鼠脑内检测到EV71抗原和基因片段。结论 6株EV71临床株均可感染小鼠并致病,重者出现松弛型麻痹并死亡,轻者出现震颤、麻痹但可恢复至正常。
- 宋楠楠张颖李鹏岳盈盈李志会盖中涛孟红
- 关键词：逆转录聚合酶链反应
