河南省医学科技攻关计划项目(20050009)
- 作品数：7 被引量：33H指数：3
- 相关作者：刘红涛鲁照明许培荣薛乐勋侯桂琴更多>>
- 相关机构：郑州大学郑州大学第一附属医院河南大学更多>>
- 发文基金：河南省医学科技攻关计划项目国家教育部“211”工程更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人食管鳞癌及正常食管组织中Notch1基因的mRNA及蛋白的表达被引量：14
- 2007年
- 采用RT-PCR方法,分别从人食管鳞癌及正常食管组织中扩增Notch1基因,结果表明Notch1基因在人食管鳞癌及正常食管组织中均有表达.此外,通过免疫组织化学方法检测不同病理特征的35例食管鳞癌、16例原位癌及35例癌周正常食管粘膜上皮组织Notch1蛋白表达的变化,结果显示:Notch1蛋白在正常食管粘膜上皮组织和原位癌中的阳性率分别为82.9%、68.7%,二者无显著性差异(P>0.05),但均显著高于食管鳞癌组织37.1%(P<0.05);食管鳞癌Notch1蛋白的低表达与肿瘤的直径、分期和发生部位无关(P>0.05),但与淋巴结转移有关(P<0.05).这表明在正常食管粘膜上皮组织中Notch1蛋白高表达,而在食管癌鳞中Notch1蛋白呈现低表达或不表达.该研究为进一步探明Notch1基因的表达对食管癌细胞的发生、发展的影响奠定了良好的基础.
- 鲁照明刘红涛高媛许培荣鄢文海薛乐勋
- 关键词：食管鳞癌RT-PCR免疫组织化学NOTCH1表达
- Notch1信号途径在食管鳞癌细胞中的激活及对细胞周期的影响被引量：2
- 2009年
- 目的观察Notch1信号途径在食管鳞癌EC9706细胞中的激活状态及其对细胞周期的影响。方法通过免疫细胞化学检测Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706细胞中的表达,并通过免疫荧光方法研究Notch1基因在EC9706细胞中的激活状态。并且利用CCK-8试剂检测食管癌细胞的增殖状态。此外,采用RT-PCR和Western blot技术检测与细胞周期相关基因的表达,最后通过流式细胞仪进一步探索激活的Notch1信号途径对细胞周期的影响。结果转染pcNICD后的食管鳞癌细胞株中发现Notch1基因的表达。免疫荧光结果显示,转染pcNICD后的食管鳞癌细胞株中Notch1信号途径处于激活状态。与未处理和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的生长速率明显受到抑制(P<0.01)。此外,与未处理的和转染pcD-NA3.1的EC9706细胞相比,稳定表达NICD的EC9706细胞的CDK2,cyclin D1和E基因的mRNA和蛋白的表达明显下调(P<0.05)。转染pcNICD的EC9706细胞在G0/G1期的比率高达74.5%,而未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞在G0/G1期的比率分别为59.1%和59.0%。细胞周期分析显示瞬时表达NICD的EC9706细胞在G0/G1期比率的增加,提示激活的Notch1信号途径能够诱导细胞静止在G0/G1期。结论Notch1信号途径的激活引起食管鳞癌细胞的细胞周期静止,提示Notch1基因有可能成为治疗食管鳞癌的新靶点。
- 许培荣范天黎刘冲鲁照明刘红涛巩天晓薛乐勋
- 关键词：细胞周期EC9706细胞
- 核干细胞因子在宫颈鳞癌中的表达及意义
- 2009年
- 采用免疫组织化学方法,分析了57例宫颈鳞癌组织、39例癌旁不典型增生组织及57例正常宫颈黏膜组织中核干细胞因子(Nucleostemin,NS)蛋白的表达。结果显示:NS蛋白在正常宫颈黏膜组织、癌旁不典型增生组织及宫颈鳞癌组织中表达的阳性率依次升高,分别为15.8%、41.0%及71.9%,组间比较有显著性差异(X^2=39.015,P<0.01),此外,NS蛋白的表达与病人年龄和肿瘤直径无关(P>0.05),而与肿瘤分期、淋巴结转移和肿瘤分化具有明显的相关性(P<0.05),提示NS在宫颈鳞癌中的高表达可能与宫颈鳞癌的发生、发展密切相关,NS蛋白检测有望成为新的诊断和治疗宫颈鳞癌的重要指标。
- 范天黎席宇许培荣鲁照明刘红涛
- 关键词：核干细胞因子宫颈鳞癌免疫组织化学
- Notch 1信号途径的激活及其对宫颈癌细胞凋亡的影响被引量：1
- 2008年
- 目的探讨Notch1信号途径在宫颈癌细胞中的激活,并研究其对宫颈癌细胞凋亡的影响。方法扩增人胎盘组织细胞内的全长NICD,并构建pcDNA3.1-NICD真核表达载体。通过脂质体转染宫颈癌细胞,筛选稳定表达NICD的宫颈癌细胞株。通过RT-PCR及Western blotting检测Notch1和Hes1基因的表达,并通过流式细胞仪观察其对宫颈癌细胞凋亡的影响。结果未处理及转染pcDNA3.1和pcDNA3.1-NICD的Hela细胞中均存在Notch1及Hes1基因的表达,表明该信号通路在Hela细胞中处于激活状态。然而,转染NICD的宫颈癌细胞株Notch1及Hes1的表达明显升高,提示该通路可能在外源NICD的影响下处于过度激活状态。流式细胞仪检测结果显示,在未处理和转染pcDNA3.1的Hela细胞中,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);但与未处理的和转染pcDNA3.1的Hela细胞相比,稳定表达NICD的Hela细胞的细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论外源的NICD通过Notch1信号途径能引起宫颈癌细胞的凋亡,提示Notch1可能成为治疗宫颈癌的分子靶点。
- 王丹宋建伟赵利萍刘红涛许燕鲁照明鄢文海
- 关键词：宫颈癌细胞细胞凋亡
- Notch1信号途径在食管鳞癌细胞株EC9706的作用研究被引量：11
- 2007年
- 目的:研究Notch1基因在食管癌细胞株中的表达及其对食管鳞癌细胞EC9706凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。通过RT-PCR扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1,转染EC9706细胞,利用Western blotting检测转染pcDNA3.1-Notch1载体12h,24h,48h,72h的食管癌细胞株与转染空载体食管癌细胞株中Notch1的表达,并观察每一时期食管癌细胞株的凋亡情况。结果:在食管癌细胞株中Notch1基因低表达,此外,转染Notch1后的细胞株Notch1表达量与转染空载体相比有明显差异(F=80.442,P<0.05)。经组间两两比较,实验组食管癌细胞株的Notch1的表达量在12h时比对照组食管癌细胞株的表达量显著增高(P<0.01),前者约为后者的4.6倍。但48h至72h时Notch1表达量实验组与对照组食管癌细胞株无显著性差异(P>0.05)。进一步通过倒置显微镜发现48h至72h细胞出现大量凋亡的现象。上述结果说明12hNotch1表达量的增加,使食管癌细胞EC9706中的Notch1信号途径得以激活,该途径激活后导致48h到72h时的细胞大量凋亡。结论:Notch1在食管癌细胞中的激活引起细胞大量凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管癌的新靶点。
- 鲁照明刘红涛许培荣侯桂琴薛乐勋
- 关键词：NOTCH1EC9706免疫细胞化学WESTERNBLOTTING
- 锌指转录因子Snail及E-钙黏附素在食管鳞癌中的表达及意义被引量：3
- 2010年
- 目的检测锌指转录因子Snail及E-钙黏附素(E-cadherin)蛋白在食管鳞癌中的表达,分析其与食管鳞癌侵袭、转移的关系。方法采用免疫组织化学方法检测Snail及E-cadherin在62例食管鳞癌组织、31例癌旁不典型增生组织及62例正常食管黏膜组织中的表达,并分析其与临床病理参数的关系。结果食管鳞癌组织中Snail及E-cadherin蛋白表达均与癌的组织学分级、浸润深度及淋巴结转移密切相关(P<0.05);在食管鳞癌癌变过程中Snail蛋白表达在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次降低,分别为79.0%(49/62)、48.4%(15/31)、17.7%(11/62),组间比较差异有统计学意义(χ2=50.129,P<0.01);而E-cadherin蛋白在癌组织、癌旁不典型增生组织及正常黏膜组织中的表达率依次升高,分别为40.3%(25/62)、71.0%(22/31)、95.2%(59/62),组间比较差异有统计学意义(χ2=48.426,P<0.01)。进一步相关性分析表明:Snail和E-cadherin蛋白在食管鳞癌组织中的表达呈负相关。结论 Snail及E-cadherin蛋白的异常表达可能与食管鳞癌的发生、发展密切相关,二者的联合检测有可能作为食管鳞癌侵袭、转移的重要生物学标志。
- 范天黎侯桂琴席宇王艳鸽李晟磊刘红涛
- 关键词：E-钙黏附素食管鳞癌免疫组织化学
- Notch1基因在食管鳞癌细胞株EC9706中的表达及其对细胞凋亡的影响被引量：8
- 2007年
- 背景与目的:早期的研究显示,Notch1信号途径与肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、增殖、分化和凋亡中起着十分重要的作用。本研究旨在研究Notch1基因在食管鳞癌EC9706细胞中的表达及其对EC9706细胞凋亡的影响。方法:通过免疫细胞化学方法检测Notch1基因在EC9706细胞中的表达。采用RT-PCR技术扩增Notch1基因,构建真核表达载体pcDNA3.1-Notch1(命名为pcNICD),转染EC9706细胞,利用RT-PCR及Western blot检测稳定转染pcNICD载体、转染pcDNA3.1空载体及未处理的EC9706细胞中Notch1的表达,另通过流式细胞仪检测未处理、转染pcDNA3.1和转染pcNICD的EC9706细胞的凋亡。结果:EC9706细胞中发现Notch1基因的表达。与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞中Notch1基因的mRNA和蛋白表达水平均明显增加,大约增加3倍(P<0.05);但未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中Notch1的表达差异无统计学意义(P>0.05)。流式细胞检测结果显示,在未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞中,细胞凋亡率差异无统计学意义(P>0.05);但与与未处理的和转染pcDNA3.1的EC9706细胞相比,转染pcNICD的EC9706细胞转染后24h、48h和72h时细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。结论:Notch信号途径的激活引起食管鳞癌EC9706细胞的凋亡,提示Notch1基因有可能成为治疗食管鳞癌的新靶点。
- 鲁照明刘红涛许培荣侯桂琴薛乐勋
- 关键词：NOTCH1基因食管肿瘤细胞凋亡
