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国家自然科学基金(81302244): 作品数：17 被引量：29H指数：3; 相关作者：王森姚运红胡新荣朱伟陈章权更多>>; 相关机构：广东医学院广东医科大学东莞市人民医院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金广东省卫生厅资助课题更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

组胺上调THP-1细胞IL-37的表达被引量：1: 2018年; 目的探讨组胺对单核细胞THP-1的白介素-37(IL-37)表达的影响。方法分别用1、10、100μmol/L等不同浓度的组胺作用THP-1细胞1 h,用实时荧光定量PCR检测THP-1细胞中IL-37 m RNA表达水平的变化,然后分别用10和100μmol/L组胺作用THP-1细胞20 h,用Western blot检测THP-1细胞中IL-37蛋白表达水平的变化。结果实时荧光定量PCR检测显示THP-1细胞分别经1、10和100μmol/L等不同浓度组胺刺激后,与对照组比较,THP-1细胞IL-37 m RNA表达水平分别升高约2.7倍、5.8倍、18.6倍,差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blot检测显示THP-1细胞分别经10和100μmol/L组胺作用后,其IL-37蛋白表达水平均明显上升。结论组胺诱导THP-1细胞IL-37的上调表达。; 任姣姣管小丹朱建冬何素辉吴坤王森陈章权; 关键词：THP-1细胞组胺

真核翻译起始因子5A2(eIF5A2)表达载体的构建与鉴定: 2014年; 目的:构建真核翻译起始因子5A2(eIF5A2)真核表达载体。方法:PCR扩增eIF5A2片段,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pIRES2-eGFP的多克隆位点,菌落PCR、质粒PCR及DNA测序对质粒进行鉴定。结果:菌落PCR、质粒PCR及DNA测序鉴定结果均表明载体构建正确。结论:成功构建了真核表达载体,并且命名为pIRES2-5A2,为下一步eIF5A2基因在人类肿瘤中作用的研究奠定了基础。; 陈泓臻陈荏槐王森姚运红胡新荣朱伟; 关键词：结肠癌真核表达载体

EBV融合基因Z2A腺病毒的制备及其在诱导EBV阳性细胞凋亡的应用: 2014年; 目的:构建EB病毒基因LMP2A及BZLF1的融合基因(Z2A)重组腺病毒表达载体,探讨Z2A融合蛋白对EBV+细胞凋亡的作用。方法:利用AdEasy系统构建重组腺病毒载体pAd-Z2A,而后将之转染293细胞(人胚肾细胞)产生重组腺病毒rAd-Z2A。后者用于感染EBV阳性及阴性细胞,RT-PCR、Western-blotting检测Z2A的mRNA和蛋白表达,以及流式细胞术检测其对EBV阳性细胞凋亡的调控。结果:序列测定和酶切实验均证实,Z2A融合基因正确插入穿梭质粒,并成功获得重组腺病毒表达载体pAd-Z2A及重组腺病毒rAd-Z2A。感染rAd-Z2A的NEC靶细胞检测到Z2A的表达。流式细胞术检测发现,与EBV-细胞组及EBV+空白质粒转染组相比,接种rAd-Z2A的EBV+细胞组48h(P<0.05)凋亡细胞显著增多,72h时细胞近乎全部凋亡(P<0.01)。结论:重组腺病毒rAd-Z2A可有效感染EBV+及EBV-细胞,从而显著促进EBV+细胞凋亡而不影响EBV-细胞,为进一步特异性靶向EBV+肿瘤的基因治疗奠定基础。; 王森赵毅康海仙丁伟斌姚运红胡新荣王云罗兵朱伟; 关键词：LMP2A 融合基因腺病毒载体 EBV

白细胞介素37对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感性的增强作用被引量：5: 2017年; 目的:通过将白细胞介素37(IL-37)基因转染到宫颈癌HeLa细胞中,探讨IL-37对宫颈癌细胞的杀伤作用及其对宫颈癌细胞化疗敏感性的增强作用。方法:将重组pIRES2-EGFP/IL-37质粒(IL-37组)和pIRES2-EGFP质粒(NC组)分别转染到HeLa细胞。Q-PCR和Western blotting法检测IL-37基因和蛋白表达水平;CCK8法检测NC组、IL-37组、顺铂(DDP)组及IL-37+DDP组细胞活性,计算细胞抑制率;RT-PCR法检测信号转导和转录激活因子3(STAT3)及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)mRNA表达水平。结果:与NC组比较,IL-37组IL-37mRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。给药后24~72h,5~15mg·L-1 DDP组HeLa细胞活性受到明显抑制(P<0.01);与DDP组比较,IL-37+DDP组HeLa细胞抑制率在处理后48h内明显升高(P<0.05);与IL-37组比较,IL-37+DDP组HeLa细胞抑制率在处理后96h内均有升高(P<0.05)。与NC组比较,IL-37组STAT3和Cyclin D1mRNA表达水平明显下降(P<0.01)。结论:IL-37高表达可抑制宫颈癌细胞的增殖,并能增强DDP对宫颈癌细胞的放疗效果,这种效应的发挥可能与IL-37使STAT3和Cyclin D1表达下调有关。; 邓子亮王森黎鹏解奎龙李淑贤周世雄贺晓舟陈东郭洪胜; 关键词：宫颈肿瘤顺铂化疗敏感性

IL-37融合EGFP真核表达载体的构建及其在293T细胞中的表达被引量：3: 2015年; 目的:构建白介素-37(interleukin-37,IL-37)与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)融合基因真核表达载体,并检测其在293T细胞中的表达。方法 :通过PCR分别扩增出IL-37和EGFP基因,经酶切和测序鉴定正确后,克隆入真核表达载体pc DNA3.1,用Linker(G4S)3连接2个目的基因片段,构建IL-37-GFP融合基因真核表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP,将其转染到293T细胞中,观察荧光产生情况,用实时荧光定量RT-PCR和Western blot检测IL-37的表达情况。结果:经酶切和测序鉴定,由linker连接的IL-37-GFP融合基因正确克隆入表达载体pc DNA3.1,重组表达质粒pc DNA3.1/IL-37-EGFP转染293T细胞后,用荧光显微镜检测显示荧光蛋白在细胞中表达,RT-PCR与Western blot均检测到高水平IL-37 m RNA和IL-37蛋白的表达。结论:成功构建了IL-37-融合报告基因EGFP的真核表达载体,并在293T细胞中得到了有效表达,为进一步研究IL-37的功能和表达调控奠定了实验基础。; 刘倩梁庄严何素辉王森陈章权; 关键词：绿色荧光蛋白 293T细胞

RNA干扰信号转导与转录因子3基因对宫颈癌Hela细胞增殖的影响: 2014年; 目的:利用RNA干扰技术沉默信号转导与转录因子STAT3的基因表达,检测其对Hela细胞的增殖的影响。方法:本次实验将其分组为Normal Control组(NC组)及siSTAT3组两组。采用脂质体法转染siSTAT3,用Real time PCR检测STAT3的mRNA表达,用Westernblot检测蛋白表达,用CCK-8法检测Hela细胞的增殖。结果:将两组的各项数据进行对比。对转录结果进行对比发现,siSTAT3组中的STAT3 mRNA表达较NC组中的STAT3 mRNA表达下降显著,其下降水平约为70%;对蛋白表达结果进行对比发现,siSTAT3组中的STAT3蛋白表达较NC组中的STAT3蛋白表达下降显著,其下降水平约为53%,上述数据显示,利用RNA干扰技术可成功地干扰了STAT3的基因表达。而siSTAT3组在对Hela细胞增殖的影响方面与NC组相比,其在24h,48h,72h,Hela细胞增殖的抑制率约分别为15.5%,29.4%,30.4%。结论:利用RNA干扰技术沉默信号转导与转录因子STAT3的基因表达可抑制Hela细胞的增殖。; 王森陈荏槐郑晓璇朱伟姚运红胡新荣; 关键词：STAT3 HELA RNA干扰

新型抗炎因子IL-37对肺癌A549细胞增殖及E-cadherin转录表达的影响被引量：4: 2014年; 目的:探讨IL-37对肺癌A549细胞增殖及E-cadherin(E-cad)转录表达的影响。方法:将IL-37过表达载体转染肺癌A549细胞,采用Real time PCR检测IL-37及E-cadherin的mRNA表达,Western blot检测蛋白表达,CCK-8法检测A549细胞增殖。结果:在转录水平,IL-37组mRNA表达较NC组升高约200倍;在蛋白水平,NC组A549细胞中几乎未见IL-37蛋白表达,IL-37组则检测到明显的IL-37蛋白,显示IL-37重组质粒成功转染A549细胞。IL-37组与NC组相比,E-cad的mRNA水平升高约20%。在对A549细胞的增殖影响方面,与NC组相比,在24h,48h,72h,IL-37组细胞增殖抑制率约为15.6%,29.2%,28.1%。结论:新型抗炎因子IL-37可抑制A549细胞增殖并上调E-cad表达。; 王森郑晓璇陈章权; 关键词：A549

IL-37b基因克隆及其真核的表达载体构建被引量：2: 2013年; 目的克隆IL-37b编码区基因,并构建其真核表达载体。方法通过RT-PCR扩增IL-37b编码区基因,DNA测序鉴定后,将阳性克隆提取质粒,通过酶切连接将目的片段定向克隆至真核表达载体pcDNA 3.1,通过菌落PCR和DNA测序等进行鉴定。结果凝胶电泳显示RT-PCR扩增出1条大小约650 bp特异条带,DNA测序结果显示获取了大小为654 bp的IL-37b编码区基因。PCR和DNA测序对所构建的真核表达载体鉴定结果表明IL-37b编码区基因正确插入真核表达载体pcDNA3.1。结论成功克隆了IL-37b编码区基因,并成功构建其真核表达载体,为下一步IL-37b生物学作用的深入研究奠定了基础。; 何玲鸽赵付前林妙芬祝惠钦王森陈章权; 关键词：基因克隆真核表达载体

利用RNA干扰技术探讨STAT3对宫颈癌C33a细胞增殖的影响被引量：1: 2014年; 目的为了探讨信号转导与转录活化因子3(STAT3)对宫颈癌细胞的作用,我们利用RNAi干扰其表达,检测其对C33a细胞增殖的影响。方法实验分组为对照组(即正常C33a细胞组)及干扰组(即RNA干扰STAT3组)。利用新型阳离子脂质体转染试剂Hilymax导入STAT3 RNA干扰序列,而后检测STAT3的表达,并利用CCK-8法检测C33a的细胞增殖水平改变。结果与对照组相比,干扰组STAT3 mRNA下降约75%,显示成功干扰STAT3的基因表达。与对照组相比,在1、2、3 d,干扰组细胞增殖水平较对照组抑制了约19.1%,31.2%,32.0%。结论本研究成功干扰C33a细胞STAT3的表达,且STAT3沉默可进一步抑制C33a细胞增殖。; 王森陈荏槐康海鲜姚运红胡新荣朱伟; 关键词：STAT3 RNA干扰

新型抗炎因子IL-37的研究进展被引量：2: 2015年; 白细胞介素-37(IL-37)是2010年底最新命名的新型抗炎因子,属于IL-1家族。IL-37对多种炎症及免疫相关性疾病具有显著的调控作用,成为近年来免疫学领域研究的热点,亦有初步迹象证实其与肿瘤、肥胖等其他疾病有一定的关系。本文对IL-37的结构、基本功能、分子机制及其与疾病的关系的研究进展进行综述。; 安位芳陈荏槐姚运红王森; 关键词：炎症自身免疫性疾病

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