国家自然科学基金(20875024B0509)
- 作品数：9 被引量：10H指数：2
- 相关作者：谢卫红方桂杰李雨亭刘立坚高琴更多>>
- 相关机构：湖北工业大学中国科学院瑞典隆德大学更多>>
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- 相关领域：理学生物学更多>>
- 包埋法蛋白质分子印迹的材料和洗脱方式被引量：2
- 2011年
- 本文总结了蛋白质分子印迹技术中包埋法常用印迹材料的特点,及各种洗脱方式在分子印迹技术中的应用情况。引用文献63篇。
- 李雨亭郑晶晶方桂杰谢卫红
- 关键词：洗脱
- 带锚链的甲基对硫磷水解酶的基因构建及表达纯化被引量：2
- 2011年
- 用PCR方法获得甲基对硫磷水解酶（MPH）编码基因,构建了重组表达质粒pET28a-mph-lc,将其转化至大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达。当OD600达到0.5~0.6时,用终浓度0.4 mmol·L-1的IPTG在30℃下诱导表达5 h,破碎离心后,利用Ni-NTA亲和层析纯化得到具有活性的融合蛋白MPH-L,即在甲基对硫磷水解酶的C端连上了一段末端为半胱氨酸的锚链。
- 刘立坚冷艳李雨亭谢卫红
- 关键词：甲基对硫磷水解酶基因修饰蛋白表达纯化
- 血红蛋白分子印迹膜吸附性能的QCM评价被引量：3
- 2011年
- 以牛血红蛋白作为模板蛋白分子,在紫外光照射的条件下以偶氮二异丁腈(AIBN)作为光引发剂在石英晶体微天平(QCM)上分别制备了甲基丙烯酸甲酯(MMA)-三乙二醇二甲基丙烯酸酯(TEGDMA)、三乙二醇二甲基丙烯酸酯聚合膜,利用石英微天平表征了不同分子印迹膜对模板蛋白的响应信号,并对两种不同聚合膜材料表面对牛血红蛋白的吸附能力做了比较。结果表明,基于分子印迹技术构建的石英晶体微天平生物传感器具有良好的识别血红蛋白的特性。
- 曾弢方桂杰刘立坚谢卫红
- 关键词：石英晶体微天平传感器
- 茜素红褪色法检测分子印迹膜上血红蛋白
- 2014年
- 基于血红蛋白作为辣根过氧化物模拟酶能够在碱性介质中催化过氧化氢产生羟基自由基加速茜素红褪色的原理,建立了分子印迹膜上血红蛋白的检测方法。优化的反应体系中茜素红浓度为1.5×10-4 mol·L-1、过氧化氢浓度为0.01mol·L-1、反应时间为35min。以丙烯酰胺凝胶包埋血红蛋白制备分子印迹聚合物,并运用优化后的体系对分子印迹膜上结合血红蛋白的浓度进行了测定。结果表明,重结合蛋白浓度与茜素红吸光度差值呈正相关。
- 李慕梓李雨亭徐青青谢卫红
- 关键词：丙烯酰胺分子印迹聚合物茜素红血红蛋白
- 聚集诱导发光分子TPE-2SO_3Na^+与九种蛋白相互作用初探
- 2014年
- 四苯基乙烯(TPE)衍生物TPE-2SO3Na+是一种水溶性的聚集诱导发光分子。研究了pH值对TPE-2SO3Na+荧光强度的影响、TPE-2SO3Na+对不同蛋白的荧光响应、MP/PNP对TPE-2SO3Na+荧光的猝灭效应以及MP存在下TPE-2SO3Na+对不同类型蛋白的荧光响应。结果表明,TPE-2SO3Na+的荧光强度随着pH值的增大而减弱;在pH值8.0下,TPE-2SO3Na+对不同类型蛋白的荧光响应不同,MPH、BSA、Pap使TPE-2SO3Na+荧光强度增强,增强顺序为:BSA>MPH>Pap,且蛋白浓度越大,TPE-2SO3Na+荧光增强效果越明显;MP和PNP都会对TPE-2SO3Na+产生荧光猝灭,并且PNP的猝灭效率是MP的6倍。用MP猝灭TPE-2SO3Na+检测蛋白后发现BSA、Pap、Hb有荧光响应,通过加入MP能够使TPE-2SO3Na+特异性识别BSA,为今后进一步的荧光探针筛选鉴别蛋白方法的建立奠定了基础。
- 赵格宁李振谢卫红
- 关键词：聚集诱导发光蛋白
- 甲基对硫磷水解酶纯化与保存
- 2012年
- 对带有重组表达质粒E.coli菌种进行了扩大培养,在IPTG的诱导下大量表达,获得了C-末端含有6个寡聚组氨酸的甲基对硫磷水解酶。经Ni-NTA亲和层析获得了具有较高生物活性的甲基对硫磷水解酶。本文对该酶纯化的梯度洗脱条件和酶动力学进行了考察,并通过环境对酶活性的影响检测,确定了将酶制备成冻干粉,更利于保存。
- 张俊卓谢卫红
- 关键词：甲基对硫磷水解酶
- 甲基对硫磷水解酶分离条件的量热学优化
- 2012年
- 运用酶热分析方法,以甲基对硫磷水解酶(MPH)作为目标蛋白,牛血红蛋白(BHb)、肌红蛋白(Mb)和牛血清白蛋白(BSA)作为杂蛋白,通过溶液pH以及流动相中NaCl浓度的考察,确定了甲基对硫磷水解酶的最佳分离条件。实验结果表明,在pH为8.0,NaCl浓度为0.8 mol/L时,甲基对硫磷水解酶的分离效果最佳。
- 高琴张俊卓谢斌谢卫红
- 关键词：热分析甲基对硫磷水解酶
- 蛋白印迹膜洗脱方式的考察
- 2012年
- 选用丙烯酰胺作为功能单体,N,N’-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,制备牛血红蛋白的分子印迹聚合物。通过不同方法洗脱印迹膜,比较洗脱后印迹膜的洗脱率、吸附量以及选择性吸附效果。结果表明,酶洗脱的印迹膜具有较高的洗脱率,而通过醋酸和十二烷基硫酸钠洗脱的印迹膜对模板的吸附量和选择性却明显高于其它洗脱方法。
- 郑晶晶赵格宁李慕梓谢卫红
- 关键词：蛋白质印迹
- 含酯血红蛋白分子印迹膜的制备被引量：3
- 2010年
- 以丙烯酰胺和甲基丙烯酸甲酯为功能单体、N,N′-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂、牛血红蛋白为模板分子,采用溶液聚合法,合成了具有选择识别性的牛血红蛋白分子印迹膜。结果表明,引入疏水性功能单体甲基丙烯酸甲酯,通过氢键和疏水作用的协同作用,蛋白质印迹膜的专一选择性得到显著提高。
- 丁安子方桂杰高琴谢卫红
- 关键词：牛血红蛋白
