艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项(2008ZX10004-011)
- 作品数：7 被引量：35H指数：3
- 相关作者：周晓农蔡玉春陈家旭田利光郭俭更多>>
- 相关机构：中国疾病预防控制中心安徽省阜阳市疾病预防控制中心安徽省血吸虫病防治研究所更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 应用FTA／PCR检测粪便中隐孢子虫的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的建立用FTA／PCR检测粪便中隐孢子虫的技术，并与常用的商业化的粪便DNA抽提试剂盒进行比较。方法选择经病原学检测已经确诊的隐孢子虫阳性和阴性粪便，分别采用FTA卡和商业化DNA抽提试剂盒抽提粪便样本中DNA，进行巢式PCR扩增，对PCR阳性产物进行测序并利用BLAST在NCBI上与GenBank数据库进行比对，做同源性分析，确定虫种。结果应用商业化DNA抽提试剂盒抽提DNA，无论是否反复冻融破壁，2个阳性对照样本扩增出目的片段，另3个阳性样本未扩增出特异性条带。样本纯化后应用FTA卡抽提DNA进行PCR检测，所有阳性粪样均扩增出830bp左右的目的片段，通过测序和比对，其中2个为贝氏隐孢子虫，1个为火鸡隐孢子虫。结论应用FTA进行粪便样本中隐孢子虫DNA的抽提方法具有简单有效、快速灵敏、准确可靠等特点，可以应用于粪便中隐孢子虫的检测。
- 田利光张小萍陈韶红刘琴郭俭蔡玉春陈家旭周晓农
- 关键词：隐孢子虫巢式PCR
- 检测动物棘球蚴的3种PCR方法的比较被引量：1
- 2011年
- 目的比较多重PCR（multiplex PCR）、PCR一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）、半巢式PCR等3种检测棘球蚴的PCR方法，优化可区分多房棘球绦虫、细粒棘球绦虫羊株（G1型）和骆驼株（G6型）、石渠棘球绦虫和带科绦虫的方法。方法根据细粒棘球绦虫、多房棘球绦虫、石渠棘球绦虫、带科绦虫线粒体基因序列，用DNAStar软件设计半巢式PCR通用引物，建立半巢式PCR法，并与文献报道的多重PCR法、PCR—RFLP平行扩增3份巨颈绦虫囊尾蚴、48份多房棘球蚴、8份细粒棘球蚴样本DNA，比较3种检测方法的特异性和灵敏度，并以细粒棘球蚴组织DNA为模板测定3种方法的灵敏度。结果半巢式PCR法灵敏度最高，59份样本全部扩增出561bp条带，但需要测序才能确定虫种；多重PCR法能扩增出3份巨颈绦虫囊尾蚴（带绦虫）样本（3／3，100％），5份（5／8，62．5％）细粒棘球蚴样本，23份（23／48，47．9％）多房棘球蚴样本，其余28份样本为假阴性；PCR—RFLP扩增细粒棘球蚴、多房棘球蚴和巨颈绦虫囊尾蚴（带科绦虫）的阳性率与多重PCR相同，且PCR—RFLP不能区分细粒棘球绦虫G1型和带科绦虫。统计学分析显示半巢式PCR法的棘球蚴检出率高于PCR—RFLP法和多重PCR法。半巢式PCR法灵敏度分别是PCR—RFLP法和多重PCR法的1000倍和100倍，最低检出细粒棘球蚴DNA浓度为253pg／ul。结论根据不同研究目的，可组合选用多重PCR法、PCR—RFLP法、半巢式PCR法区分细粒棘球绦虫G1型、G6型，多房棘球绦虫，石渠棘球绦虫和带绦虫。
- 周正斌朱淮民
- 关键词：棘球蚴聚合酶链反应
- 安徽阜阳HIV阳性者合并人芽囊原虫感染及其影响因素分析被引量：13
- 2012年
- 目的了解安徽省阜阳市HIV阳性者合并人芽囊原虫感染情况及其影响因素。方法采用横断面调查的方法对安徽省阜阳市开发区309名HIV阳性者进行问卷调查,并采集其粪便和血液样本用于人芽囊原虫、CD4+T淋巴细胞和细胞因子检测。采用单因素分析和Logistic回归分析对影响HIV和人芽囊原虫合并感染的因素进行分析。结果在309名参与调查的HIV阳性者中,302人参与粪样检测,286人参与问卷调查,同时参与2项检测者263人。调查发现,HIV阳性者合并人芽囊原虫感染率为17.11%,其中女性感染率为21.90%,明显高于男性(11.90%)(P<0.05)。在HIV合并人芽囊原虫感染影响因素Logistic回归模型分析中,仅营养状况良好(OR=0.263,95%CI:0.073,0.945)有统计学意义。结论HIV阳性者合并人芽囊原虫感染率较高,营养状况好坏可能是影响合并感染的原因之一。
- 田利光陈家旭程国金汪峰峰郭俭尹晓梅蔡玉春周莉童小妹王珍丽汪天平周晓农
- 关键词：HIV人芽囊原虫影响因素
- 环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫的研究被引量：12
- 2009年
- 目的用环介导等温扩增技术检测牛源隐孢子虫。方法提取牛粪中隐孢子虫卵囊DNA。根据隐孢子虫18S rRNA序列及环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP）技术的原理，设计4条隐孢子虫特异引物，利用LAMP检测牛粪中隐孢子虫卵囊DNA和蓝氏贾第鞭毛虫DNA，以正常牛粪DNA为阴性对照。LAMP产物经SYBR Green I显色及电泳后观察结果，绿色判为阳性，棕色判为阴性，对LAMP产物进行电泳分析，观察其特征条带的情况。结果隐孢子虫卵囊DNA检测管经显色后呈绿色，阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA呈棕色。隐孢子虫LAMP产物经电泳后呈LAMP特征性梯状条带，阴性对照及蓝氏贾第鞭毛虫DNA无扩增产物。结论LAMP方法敏感、特异、简便，可用于检测牛粪中的隐孢子虫。
- 袁忠英沈玉娟曹建平周何军卢潍媛陈勤倪奕昌汤林华
- 关键词：RRNA
- 湖北钉螺空间遗传信息管理系统的设计与构建
- 2009年
- 目的探讨基于空间分析基础上的湖北钉螺群体遗传变异,构建湖北钉螺空间分布和遗传信息数据库及其管理系统,为相关研究、信息管理和开发利用提供先进的方法和手段。方法采集现场钉螺样本,以逸蚴法鉴定阴性钉螺。利用Microsoft SQL2000建立采集点空间分布数据库、样本数据库和遗传信息数据库,用Visual Basic 6.0建立相应管理系统。结果完成现场钉螺收集,初步建立了10个省73个采集点的数据库,676个记录的样本数据库和部分遗传信息数据库,管理系统实现添加、查询、删除、统计和数据导出导入等功能,界面清晰,操作简便。结论建立的湖北钉螺空间遗传信息管理系统对湖北钉螺空间分布和群体遗传研究具有一定的应用价值,但还需进一步补充和完善相关数据。
- 李石柱马琳王艺秀王强胡缨张仪周晓农
- 关键词：湖北钉螺数据库
- 旋毛虫T668基因真核表达载体的构建及其在BHK细胞中的表达被引量：1
- 2010年
- 利用RT-PCR技术从中国河南猪旋毛虫(国际标准虫种编号为ISS534)新生幼虫得到T668基因,并克隆入pEGFP-N1真核表达载体中构建重组质粒,该重组质粒在脂质体介导下转染BHK细胞。EGFP标签证明质粒DNA成功转染到细胞中并得以表达,Western blotting鉴定,细胞裂解液样品中有1条约77 000的条带,可被绿色荧光抗体及猪感染旋毛虫阳性血清所识别,与预计大小一致,表明成功构建T668-pEGFP-N1真核表达质粒,并在BHK细胞融合表达,表达产物具有抗原性。
- 白雪吴秀萍王学林王鑫蕊于建立唐斌刘国兴冯爽陈根元刘明远
- 关键词：旋毛虫真核表达免疫荧光
- 全球被忽视热带病的防治策略与行动被引量：6
- 2011年
- 被忽视的热带病（Neglected tropical diseases,NTD）是指在热带气候地区、常流行于发展中国家贫困区域的一类疾病.世界卫生组织（WHO）总干事陈冯富珍曾指出,NTD是＂古老的、安静的、被隐藏起来的和被忽视的疾病＂.这类疾病的提出一是由于过去的10多年中发达国家只关注＂三大疾病＂-艾滋病（HIV/AIDS）、结核和疟疾,对慢性致残性、致死性＂穷病＂.热带病严重忽视;二是由于NTD造成的疾病负担在所有传染病中仅次于HIV/AIDS,其每年造成的经济损失高达数十亿美元,且可供开发的药物和疫苗极为有限.
- 周晓农
- 关键词：热带病
