山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2008BS07005)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李宏梅郭慧君刘海港井维芳刘法孝更多>>
- 相关机构：山东农业大学南京农业大学更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金山东省博士后创新项目山东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 荧光定量RT-PCR检测性成熟前与性成熟山羊卵巢α/β-ER mRNA表达的比较
- 2013年
- 为分析性成熟前与性成熟波尔山羊和沂蒙黑山羊卵巢内α、β雌激素受体(α/β-ER)表达的差异规律,根据已发表波尔山羊α/β-ER基因序列,设计不同引物,对PCR反应条件进行优化,建立稳定检测2种山羊卵巢雌激素受体mRNA含量的荧光定量RT-PCR方法;并对性成熟前后2种山羊卵巢组织中α/β-ER mRNA进行了检测比较。结果显示,性成熟前2种山羊卵巢α-ER和β-ER mRNA表达含量较性成熟山羊低;而且这2种山羊无论性成熟前还是性成熟后,α雌激素受体表达均显著低于β雌激素受体。
- 王洪进李宏梅胡洪杰刘海港窦文文井维芳郭慧君
- 关键词：山羊
- 山羊β雌激素受体多克隆抗体的制备及免疫组化方法的建立被引量：3
- 2013年
- 本研究旨在克隆济宁青山羊雌激素受体β(ERβ)基因,进行原核表达,制备多克隆抗体,建立免疫组化分析方法,检测济宁青山羊卵巢和子宫内ERβ分布。根据GenBank发布的绵羊ERβ基因序列设计一对引物,应用RT-PCR方法从济宁青山羊卵巢组织中扩增ERβ部分基因。经双酶切和测序分析后,连接到原核表达载体pET32a(+),构建重组表达载体pET32a(+)-ERβ,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blotting分析鉴定;经Ni-NTA纯化融合蛋白后免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,并检测抗体效价及特异性;使用该抗体检测济宁青山羊卵巢和子宫组织细胞中的ERβ分布。结果表明,成功扩增出ERβ部分基因,并构建原核表达质粒,转化至大肠杆菌中表达出相对分子质量约为53ku的融合蛋白;Western blotting证明该融合蛋白能与兔抗人的ERβ多克隆抗体特异性反应。制备的多克隆抗体经ELISA检测效价达到1∶213,以此抗体代替购置的标准兔抗人ERβ抗体,进行Western blotting反应,特异性良好;使用该抗体建立免疫组化方法检测结果表明济宁青山羊卵巢颗粒细胞和子宫内膜上皮细胞、平滑肌细胞存在ERβ的分布。本研究获得特异性兔抗山羊ERβ多克隆抗体,使用该抗体建立免疫组化方法首次报道了济宁青山羊卵巢和子宫ERβ的分布表达,为进一步研究β雌激素受体的生物学功能奠定了方法学和形态学基础。
- 刘海港李宏梅王树迎成子强刘法孝窦文文井维芳郭慧君
- 关键词：山羊雌激素受体Β多克隆抗体免疫组化
- Ipriflavone对雄性大鼠生长及血液睾酮水平的影响
- 2009年
- 目的:观察伊普异黄酮(IP)对雄性动物生长、骨骼肌肉发育以及相关内分泌的影响。方法:24只1月龄雄性大鼠分为IP组和对照组,IP组于基础日粮中添加伊普异黄酮3 mg.kg-1,实验持续30 d。结果:与对照组相比,IP组大鼠日增重和采食量分别提高12.4%(P<0.01)和17.8(P<0.01);胴体重增高10.70%(P<0.05),骨骼肌重有所增加,而腰胁部脂肪重则显著降低;股骨重和骨密度均有增加;血液睾酮含量IP组大鼠超过对照组约42%,而雌二醇含量略有降低。结论:伊普异黄酮能促进雄性大鼠生长,内源睾酮在参与这一生理过程中起重要作用。
- 郭慧君李宏梅王春阳刘法孝王国杰韩正康
- 关键词：睾酮
