NSFC-广东联合基金(u0731004)
- 作品数：5 被引量：18H指数：2
- 相关作者：左建军冯定远邹仕庚职爱民黄志毅更多>>
- 相关机构：华南农业大学河南省农业科学院更多>>
- 发文基金：NSFC-广东联合基金国家重点基础研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪小肠粘膜上皮细胞的分离及体外原代培养模型的建立被引量：2
- 2010年
- 用机械刮取小肠粘膜加胶原酶Ⅱ消化的方法，采用新生未吮乳仔猪小肠组织，成功地分离了猪小肠粘膜上皮细胞（Intestinal epithelial cells，IEC）且在体外培养传代，并采用碱性磷酸酶和角蛋白免疫学试验鉴定，结果表明：体外培养的猪IEC在DMEM—F12培养基中，细胞在1～2d贴壁，5～6d形成细胞克隆，9～11d融合成片；碱性磷酸酶和生物素标记的细胞角蛋白抗体鉴定结果显示90％培养的细胞为阳性，分别从生化的角度证明和细胞生物学角度鉴定了所培养的细胞为IEC。
- 职爱民左建军黄志毅邹仕庚冯定远
- 关键词：原代培养
- 苦味酸法检测猪骨骼肌肌酸和肌酐的含量被引量：2
- 2010年
- 为测定猪骨骼肌中肌酸和肌酐含量,采用碱性苦味酸法并进行适当改良建立了一个适宜的反应体系。结果:采用pH值12.0磷酸缓冲溶液配制的碱性苦味酸反应液测定肌酐含量所获得标准曲线的线性关系最好,y=0.0218x+0.0228(x:肌酐浓度;y:OD490nm),相关系数R2为0.9978。以此法测定了肌酐和肌酸平均回收率,分别为99.33%和93.38%。蓝塘猪、大花白猪和长白猪背最长肌(n=8)中肌酐含量变异系数为46.4%,6.8%和20.7%,肌酸含量变异系数分别为13.57%,12.70%和19.47%。蓝塘猪背最长肌肌酸含量显著高于大花白和长白猪(P<0.05),肌酐含量分别比大花白和长白猪高18.92%(P<0.05)和12.82%(P>0.05),肌酐和肌酸含量比值显著高于长白猪和大花白猪(P<0.05)。由此表明,苦味酸法可用于猪骨骼肌肌酐和肌酸含量测定,蓝塘猪骨骼肌肌酸代谢与大花白猪和长白猪可能存在较大差异。
- 代发文黄升科左建军冯定远叶慧曹庆云钟锐钦陆映升
- 关键词：碱性苦味酸肌酸肌酐骨骼肌
- 丁酸钠对体外培养猪肠黏膜上皮细胞寡肽转运载体及钠氢交换载体mRNA表达的影响被引量：5
- 2010年
- 为探讨丁酸钠对肠道寡肽转运载体(PepT1)及钠氢交换载体(NHE2、NHE3)mRNA表达丰度的调控,取刚出生未吮乳的仔猪小肠黏膜组织,建立猪小肠上皮细胞(IEC)分离及原代培养方法。分别用0,2,4,8 mmol/L的丁酸钠处理体外培养的猪小肠黏膜上皮细胞96 h后,提取细胞总RNA,以18S rRNA为内标基因,用实时荧光定量RT-PCR法(SYBR GreenⅠ试剂盒)检测PepT1、NHE2及NHE3 mRNA在不同浓度丁酸钠处理细胞中的表达丰度。结果表明,体外培养的猪小肠黏膜上皮细胞用丁酸钠处理96 h后,PepT1和NHE2 mRNA的表达丰度均显著增加(P<0.05),且呈现剂量依赖效应;NHE3 mRNA表达丰度的剂量效应不明显,只有在高浓度丁酸钠(8 mmol/L)组时才显著高于对照组(P<0.05)。
- 邹仕庚冯定远陈峰谭会泽黄志毅左建军职爱民叶慧
- 关键词：肠黏膜上皮细胞丁酸钠
- 不同浓度赖氨酸对猪肠黏膜上皮细胞碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响被引量：7
- 2010年
- 研究通过建立猪肠黏膜上皮细胞(Intestinal epithelial cells,IEC)原代培养的方法,研究了赖氨酸对体外培养的猪小肠黏膜上皮细胞碱性氨基酸转运载体mRNA表达的影响。用机械刮取初生仔猪小肠黏膜加胶原酶Ⅱ消化的方法,成功地在体外培养了新生仔猪IEC;分别用浓度为0、2、8mmol/L赖氨酸处理细胞96h,提取细胞总RNA,采用实时荧光定量PCR方法,检测了碱性氨基酸转运载体在不同处理细胞中的表达丰度。结果表明:高浓度的赖氨酸对CAT-1 mRNA的表达有上调作用,差异极显著(P<0.01),并且呈剂量依赖效应;不同浓度的赖氨酸对CAT-2 mRNA的表达影响不大,8mmol/L和2mmol/L赖氨酸组CAT-2 mRNA的表达丰度均有低于0mmol/L的趋势,但二者之间差异不显著(P>0.05);不同浓度的赖氨酸对y+LAT1 mRNA表达影响差异不显著(P>0.05);高浓度的赖氨酸可提高4F2hc mRNA的表达;0mmol/L和2mmol/L赖氨酸组4F2hc mRNA的表达丰度均低于8mmol/L,且差异显著(P<0.05);0mmol/L和2mmol/L赖氨酸组之间差异不显著(P>0.05)。
- 职爱民左建军周响艳邹仕庚黄志毅王小兰叶慧代发文冯定远
- 关键词：碱性氨基酸转运载体MRNA表达赖氨酸
- 一水肌酸在畜禽生产中的应用被引量：2
- 2010年
- 一水肌酸是肌酸的一水化合物形式,具有增加骨骼肌中肌酸含量、调控磷酸肌酸能量代谢、调控糖代谢途径,降低乳酸产生、改善骨骼肌肌纤维发育、增加骨骼肌糖原含量和抗氧化特性等作用。文章将就一水肌酸对畜禽生产性能、肉品质和胴体性状的影响及其作用机制进行综述。
- 代发文左建军冯定远
- 关键词：肉品质胴体性状
