国家自然科学基金(81101647)
- 作品数：10 被引量：64H指数：6
- 相关作者：马玲娣卢绪章蒋丽佳周民朱志超更多>>
- 相关机构：南京医科大学常州市第二人民医院江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金常州市卫生局科技项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 苦参对急性白血病患者sICAM-1和sVCAM-1水平的影响被引量：8
- 2016年
- 目的探讨苦参对急性白血病患者可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)水平的影响。方法选取2013年3月至2015年3月该院收治的急性白血病患者60例,按照治疗方式的不同将患者分为常规化疗组和苦参治疗组,每组各30例。常规化疗组患者给予常规化疗方案实施治疗,苦参治疗组患者在常规化疗基础上加用苦参治疗。另选取同期该院健康体检者60例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析急性白血病患者治疗前后和健康体检者血清sICAM-1、sVCAM-1水平。结果急性白血病患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平在治疗前及治疗后均明显高于健康对照组,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。常规化疗组及苦参治疗组,治疗后患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平均有下降,苦参治疗组sICAM-1、sVCAM-1的水平下降程度较常规化疗组更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。苦参治疗组治疗有效率为90.00%,高于常规化疗组的67.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦参可明显降低急性白血病患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平,改善常规化疗药物疗效,促进患者康复。
- 马玲娣唐跃华董艳芬朱志超蒋丽佳何晓清刘娟
- 关键词：苦参急性白血病可溶性细胞间黏附分子-1可溶性血管细胞黏附分子-1
- 扩增脐血来源NK细胞增强其抗血液肿瘤细胞作用的研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨利用转染膜型IL-15和4-1BB配体K562（K562-mbl5-41BBL）细胞作为滋养细胞体外扩增脐血来源自然杀伤（CB．NK）细胞，对血液肿瘤细胞杀伤能力的作用研究。方法用K562-mbl5—41BBL细胞作为滋养细胞体外增强培养CB—NK细胞，培养21d后用流式细胞仪检测扩增的CB—NK细胞表面受体的表达，用51Cr释放试验检测扩增的CB—NK细胞对血液肿瘤细胞的杀伤作用以及其免疫球蛋白样受体的配体特异性。结果培养前、后的CB—NK细胞表面抑制型受体CDl58a[（14．37±11．12）％对[16．77±11．65）％]、CDl58b[（40．92±19．02）％对（42．48±18．11）％]、NKG2A[（70．20±18．43）％对（78．90±13．69）％]的表达水平差异均无统计学意义（P值均〉O．05），活化型受体NI[p30[（4．14±2．05）％对（54．10±13．27）％]、NKp44[（0．52±1．16）％对（72．10±17．30）％]、NKp46[（44．19±6．19）％对（80．63±-14．01）％]和NKG2D[（72．25±14．35）％对（97．50±2．55）％]表达明增高，差异均有统计学意义（P值均〈0．05）。扩增的CB—NK细胞对K562细胞[（55．3±4．2）％对（74．3±3．6）％]、Raji细胞[（12．0±3．6）％对（60．64-5．O）％]的杀伤作用明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。CDl58a—CDl58b—CB．NK细胞对表达不同HLAI类分子配体的靶细胞均有较高的杀伤性，CDl58a＋CDl58bCB—NK细胞对221-Cw4以及221-Cw3Cw4的杀伤性相对低，而CDl58a—CDl58b＋CB—NK细胞对221一Cw3以及221一Cw3Cw4相对低，CDl58a＋CDl58b＋CB．NK细胞仅对721—221保持较高的杀伤性。结论扩增的CB—NK细胞活化型受体的表达明显增强，而抑制型受体的表达无明显变化，其杀伤血液肿瘤细胞的能力明显增强，同时保持了NK细胞特有的免疫球蛋白受体分子的配体特异性，可为临床血液肿瘤的细胞治疗提供帮助。
- 周峰韩文敏贾祝霞杨建和肖溶马玲娣卢绪章
- 关键词：胎血自然杀伤细胞血液肿瘤
- 三阴性乳腺癌中COX-2、NF-κB及VEGF表达的临床研究被引量：2
- 2016年
- 目的研究环氧酶(COX-2)、核因子-κB(NF-κB)及血管内皮生长因子(VEGF)在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义。方法选取2010年1月至2014年12月于该院进行乳腺癌治疗的100例患者为研究对象,其中三阴性乳腺癌50例,非三阴性乳腺癌50例,采用免疫组织化学法检测100例患者乳腺癌组织中COX-2、NF-κB及VEGF的表达,并应用D2-40标记检测淋巴管浸润和淋巴管密度,对相关的临床病理资料进行统计分析。结果 COX-2在三阴性与非三阴性乳腺癌中的表达分别为76%、70%,差异无统计学意义(P>0.05),VEGF在三阴性乳腺癌病变和非三阴性乳腺癌病变中阳性表达率分别为60%和36%,差异有统计意义(P<0.05)。NF-κB在三阴性乳腺癌病变和非三阴性乳腺癌病变中阳性表达率分别为66%和32%,差异有统计意义(P<0.05)。三阴性乳腺癌组织中乳腺癌中NF-κB与VEGF,COX-2与VEGF表达呈正相关。结论放化疗是三阴性乳腺癌术后治疗的主要手段,而抑制NF-κB、VEGF和COX-2的表达有望成为治疗三阴性乳腺癌的新靶点,值得研究探索。
- 马玲娣董燕芬刘乾范静蒋丽佳陈亚红
- 关键词：三阴性乳腺癌环氧酶血管内皮生长因子
- NKG2D在细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)抗血液肿瘤细胞的作用被引量：20
- 2013年
- 本研究探讨细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)通过NKG2D受体和配体相互作用杀伤血液肿瘤细胞的机制。用含有rhIL-2,抗CD3抗体,IFN-γ的培养液培养健康人的外周血单个核细胞(PBMNC)2周后,用流式细胞仪分析CIK细胞的细胞亚群以及细胞表面NK细胞受体,同时检测血液肿瘤细胞株表面NKG2D配体的表达水平。CAM标记靶细胞,用流式细胞仪检测CIK细胞对血液肿瘤细胞的杀伤作用。结果表明,大部分CIK细胞为CD3+细胞(97.85±1.95%),CD3+CD8+细胞和CD3+CD56+细胞的比率较培养前明显升高(P<0.001;P=0.033);约86%的CIK细胞表达NKG2D受体,几乎不表达CD158a,CD158b和NCR受体;血液肿瘤细胞株U266、K562和Daudi均表达一定水平的NKG2D配体,CIK细胞对这3种血液肿瘤细胞株均具有较高的杀伤作用,这种杀伤作用可以被抗NKG2D抗体部分抑制(U266 52.67±4.63%vs 32.67±4.81%,P=0.008;K562 71.67±4.91%vs 50.33±4.91%,P=0.007;Daudi 68.67±5.04 vs 52.67±2.60%,P=0.024)。结论:大多数的CIK细胞表达NKG2D受体,NKG2D受体和配体的相互作用可能是CIK细胞杀伤血液肿瘤细胞的作用机制之一。
- 何金媛贾祝霞蔡晓辉韩文敏肖溶马玲娣卢绪章周民陈宝安
- 关键词：NKG2D受体NKG2D配体CIK细胞
- 苦参碱对人原代白血病细胞的体外作用研究被引量：10
- 2015年
- 目的研究苦参碱对原代人白血病细胞的体外作用及可能的分子机制。方法取临床初诊的髓系白血病患者外周血,分离得到原代白血病细胞体外培养。不同浓度苦参碱作用后,观察细胞的形态学改变、CCK8法检测细胞增殖、Annexin V-FITC/PI分析细胞凋亡及流式检测细胞周期。结果苦参碱作用24 h,细胞增殖明显受抑,0.5、0.8 mg/m L组的生长抑制率分别为54.98%和72.96%,与对照组相比差异显著(P<0.01),抑制效应有明显剂量相关性。苦参碱作用24 h的IC50为0.5 mg/m L。苦参碱作用24 h,0.2、0.5、0.8 mg/m L组细胞早期凋亡率分别为11.8%、37.6%、54.7%,明显高于对照组自发凋亡率(7.50%)(P<0.05)。苦参碱作用48 h后,细胞周期阻滞于G0/G1→S期。结论苦参碱可显著抑制体外培养的人原代白血病细胞增殖,其机制与诱导细胞早期凋亡,促进细胞周期G1→S期阻滞有关。
- 白煜朱志超蒋丽佳夏蕾范静孙晓卢绪章周民马玲娣
- 关键词：苦参碱增殖凋亡细胞周期
- 苦参碱对白血病细胞NKG2D配体表达的作用研究被引量：6
- 2013年
- 本研究旨在探讨人白血病细胞表面NK细胞活化性受体NKG2D配体分子的表达水平及中药苦参碱对白血病细胞NKG2D配体表达的作用。流式细胞术检测白血病细胞表面MICA/B和ULBP1、2、3四种NKG2D配体的表达。苦参碱处理白血病细胞株K562、OUN-1、U937和K562/AO2及原代培养的人白血病细胞,流式细胞术分析药物处理后细胞表面NKG2D配体的表达改变。结果表明,几株常见人白血病细胞及原代人白血病细胞表面均有NKG2D配体分子的表达,多数有ULBP分子的高表达或ULBP表达明显高于MICA/B,但不同细胞表面NKG2D配体的表达模式明显不同。苦参碱处理可上调白血病细胞表面部分NKG2D配体的表达水平,提示苦参碱对不同白血病细胞NKG2D配体分子的表达调节不同。K562细胞表面NKG2D配体ULBP2和ULBP3分子的高表达可能是介导NK细胞对其高杀伤性的重要原因。结论:人白血病细胞及原代人白血病细胞表面均有NKG2D配体的表达,但不同细胞NKG2D配体的表达模式不同。苦参碱可上调白血病细胞表面部分NKG2D配体分子的表达。
- 马玲娣卢绪章朱志超蒋丽佳周民钱思轩李建勇
- 关键词：苦参碱白血病NKG2D配体NK细胞
- 苦参碱通过bcr-abl介导的MEK-ERK通路抑制人慢性粒细胞白血病K562细胞增殖被引量：7
- 2015年
- 目的：探讨MEK-ERK通路在苦参碱抑制人慢性粒细胞白血病K562细胞增殖中的分子机制。方法采用Western blot法检测K562细胞内MEK-ERK通路关键分子MEK1、ERK1／2及其上游接头分子Shc、SHP2的总蛋白和磷酸化蛋白的表达；采用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测bcr-abl及有丝分裂原激活的蛋白激酶（MAPK）下游靶蛋白bcl-xL、Cyclin D1、c-myc及p27在转录及蛋白水平的表达。结果苦参碱可明显抑制K562细胞内MEK1、ERK1／2及Shc、SHP2的磷酸化表达，并可在转录及蛋白水平抑制bcr-abl分子表达。同时，RT-PCR和Western blot实验证实，苦参碱处理后，K562细胞内bcl-xL、Cyclin D1、c-myc表达均明显抑制，细胞周期负调控蛋白p27的表达增加。结论苦参碱对K562细胞的抑制效应与bcr-abl介导的MEK-ERK信号通路活性抑制有关，对信号通路中磷酸化蛋白或激酶分子活性的调控可能是其调控MEK-ERK通路活性的重要分子机制。
- 何流漾周海俊孙晓朱志超白煜蒋丽佳卢绪章周民钱思轩李建勇马玲娣
- 关键词：苦参碱
- IL-6/JAK/STAT3介导苦参碱对K562细胞的增殖抑制作用被引量：7
- 2015年
- 目的 探讨JAK/STAT3介导的信号途径在苦参碱对K562细胞增殖抑制作用中的分子机制.方法 以不同浓度苦参碱处理K562细胞,Western blot法分析JAK/STAT3通路分子JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达的改变;荧光实时定量RT-PCR及Western blot法分析STAT3下游调控基因Bcl-xL、Cyclin D1、c-Myc的表达;荧光实时定量RT-PCR及ELISA法检测K562细胞IL-6表达的改变.以IL-6预处理K562细胞,Western blot法分析苦参碱对细胞内JAK2、STAT3及其磷酸化蛋白表达的作用.结果 0.5 mg/ml苦参碱处理48 h,K562细胞内STAT3及JAK2总蛋白表达无明显变化,磷酸化STAT3（p-Tyr705 STAT3、p-Ser727 STAT3）和磷酸化JAK2 （p-JAK2）表达水平分别由处理前的0.690±0.119、1.150±0.263和0.670±0.137下降至0.370±0.024、0.700±0.172和0.049±0.057.苦参碱对STAT3下游调控基因Bcl-xL、Cyclin D1及c-Myc的转录及蛋白表达均有抑制作用,并可显著抑制IL-6的表达和分泌,0.5和0.8 mg/ml苦参碱处理后细胞培养上清中IL-6浓度分别为（10.74±1.83）pg/ml和（8.66±1.24） pg/ml,较处理前[（35.1±1.93） pg/ml]显著降低（P＜0.05）.IL-6预处理K562细胞后,STAT3、JAK2、p-STAT3及p-JAK2表达均有增加,苦参碱可抑制IL-6对上述分子表达的上调.结论 苦参碱抑制K562细胞增殖与JAK/STAT3介导的信号通路抑制有关,IL-6表达抑制可能是苦参碱调控JAK/STAT3通路活性的始动机制.
- 马玲娣朱志超孙晓蒋丽佳白煜卢绪章周民钱思轩李建勇
- 关键词：苦参碱K562细胞白细胞介素6
- 苦参碱对K562细胞NKG2D配体表达的影响及其机制研究被引量：7
- 2014年
- 目的 探讨苦参碱对白血病细胞表面NK细胞活化性受体凝集素样同型二聚体（NKG2D）配体表达的影响及可能的分子机制.方法 用流式细胞术检测苦参碱处理前后慢性髓性白血病细胞系K562细胞表面NKG2D四种配体分子MICA/B、ULBP1、2、3表达的改变,观察不同浓度苦参碱作用后K562细胞对人NK细胞杀伤的敏感性.Western blot分析苦参碱处理前后K562细胞信号转导与转录活化因子3（STAT3）表达的改变.结果 与未处理组相比,苦参碱处理可显著诱导K562细胞表面ULBP1和ULBP2分子的表达,尤以ULBP2增高最为显著.0.8 mg/ml苦参碱处理后,K562细胞ULBP1和ULBP2表达平均荧光强度（MFI）由处理前的220和615分别增加至429和1 614,MICA/B和ULBP3表达则无明显改变.苦参碱（浓度分别为0.2、0.5和0.8 mg/ml）处理可增强NK细胞对K562细胞的杀伤作用.效靶比5：1时,NK细胞对K562细胞杀伤百分率由处理前的29.2％分别增加至32.8％、38.1％和40.5％.苦参碱对K562细胞STAT3总蛋白表达没有明显影响,但可显著抑制磷酸化STAT3水平.结论 苦参碱可诱导K562细胞NKG2D的配体表达上调,增强K562细胞对NK细胞杀伤敏感性,其分子机制与细胞内STAT3的活性抑制相关.
- 马玲娣朱志超卢绪章蒋丽佳周民钱思轩李建勇
- 关键词：苦参碱K562细胞NKG2D配体STAT3转录因子
- 苦参碱诱导自然杀伤细胞对白血病K562细胞杀伤的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的 探讨中药苦参碱对人自然杀伤（NK）细胞体外杀伤白血病细胞的作用及可能的分子机制.方法 以人慢性粒细胞白血病K562细胞为靶细胞,采用CFSE/PI双染色法流式细胞术检测不同质量浓度（02、0.5、0.8 mg/ml）苦参碱处理后,人NK细胞在不同效靶比下对K562细胞的体外杀伤活性.流式细胞术分析不同浓度苦参碱处理24 h对NK细胞主要活化性受体NKG2D和抑制性受体CD158a、CD158b表达的影响及K562细胞膜上NKG2D配体MICA/B、ULBP1、ULBP 2、ULBP 3表达的改变.结果 效靶比为5∶1时,NK细胞对0.2、0.5和0.8 mg/ml苦参碱处理后的K562细胞杀伤率分别为32.8％、38.1％和40.5％,较处理前均有不同程度增高（29.2％）;但进一步增加效靶比（10：1）后,NK细胞杀伤活性改变差异无统计学意义（P＞0.05）.苦参碱处理24 h,NK细胞抑制性受体CD158a、CD158b的表达均较处理前降低,而活化受体NKG2D的表达则增高.K562细胞表面NKG2D配体ULBP1和ULBP2分子的表达也较处理前增高（平均荧光强度分别为174.33±39.93比275.67±32.88,517.6±47.97比1368.6±49.43,P＜0.05）.结论 苦参碱可增强NK细胞对白血病K562细胞的体外杀伤活性,其机制可能与NK细胞受体及配体表达调节作用有关.
- 马玲娣朱志超蒋丽佳卢绪章贾祝霞周民钱思轩李建勇
- 关键词：苦参碱自然杀伤细胞NKG2D配体白血病细胞
