国家自然科学基金(39770664)
- 作品数：9 被引量：39H指数：6
- 相关作者：杨守京刘彦仿孙玉静叶苓赵君更多>>
- 相关机构：第四军医大学第四军医大学西京医院更多>>
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- 汉坦病毒诱导非洲绿猴肾上皮细胞热休克蛋白70的表达规律及意义被引量：8
- 2004年
- 目的 :旨在研究汉坦病毒 (Hantavirus,HTV)感染非洲绿猴肾上皮 (Vero E6 )细胞后应激反应的规律及意义。 方法 :采用免疫细胞化学染色法、免疫荧光激光共聚焦及RT PCR方法观察热体克蛋白 (HSP) 70的表达规律。 结果 :HTV感染Vero E6细胞后 ,免疫细胞化学染色法可检出HSP 70阳性信号。感染后不同时间点 ,免疫荧光激光共聚焦显微镜及RT PCR观察结果表明 ,HSP 70及HSP 70mRNA的水平在感染后迅速升高 ,并持续高表达 (P <0 .0 5 )。 结论 :HTV可诱导Vero E6细胞HSP 70高表达 ;HSP
- 余璐马恒朱军杨守京
- 关键词：汉坦病毒热休克蛋白70应激反应
- 汉坦病毒感染体外诱导VeroE6细胞热休克蛋白的表达被引量：8
- 2000年
- 目的 研究汉坦病毒 (HTV)感染后对细胞应激基因表达的影响 .方法 用 HTV感染其敏感细胞株 Vero E6细胞 ,用 Western印迹杂交、RNA斑点杂交及原位杂交分别分析热休克蛋白 (HSP)的表达及编码 HSP的 m RNA水平的变化 .结果 病毒感染后细胞内 HSP70及热休克蛋白 m RNA水平均有增高 ,而 HSP6 5及 HSP2 7的表达则无明显改变 .结论 HTV感染可以直接诱导 HSP70的高表达 。
- 叶苓廖文俊刘彦仿杨守京
- 关键词：热休克蛋白汉坦病毒
- 汉滩病毒诱导乳鼠组织热休克蛋白表达及其与病毒抗原蛋白的相关性被引量：7
- 2002年
- 目的 探讨汉滩病毒 (HV)感染诱导乳鼠组织热休克蛋白 (HSPs)表达及热休克蛋白与病毒蛋白的相互关系。方法 出生后 2～ 3d的昆明乳鼠 ,每只脑内接种 10 0个半数致死量的HV0 .0 3ml,8d后乳鼠发病死亡 ,取其脑组织一部分固定 ,石蜡包埋切片 ,用免疫组织化学法结合共聚焦显微镜检测组织中病毒抗原及HSP70的表达 ,一部分组织制匀浆液 ,用ELISA、免疫共沉淀方法分析病毒抗原和HSP70的表达及关系。结果 HV感染诱导了乳鼠脑组织神经细胞高表达热休克蛋白(HSP) 70 ,细胞内病毒抗原与HSP70有共定位关系 ;免疫共沉淀结果显示用HSP70mAb可以共沉淀感染乳鼠脑组织匀浆中的汉滩病毒核心抗原 (HV NP) ,用HV NPmAb 1A8可沉淀感染乳鼠脑组织匀浆中的HSP70 ,对照实验阴性 ,所用两种蛋白抗体间无交叉反应 ,因而HSP70与HV NP结合形成复合物 ,结果是特异的。结论 HV感染诱导HSP70的表达 ,后者与HV NP结合形成HSP70 病毒抗原肽复合物 ,该复合物可能在病毒感染和复制过程中发挥作用。
- 孙玉静杨守京赵君刘彦仿
- 关键词：汉坦病毒热休克蛋白类沉淀素试验
- 人原发性肝细胞癌中热休克蛋白70mRNA的表达被引量：7
- 2001年
- 目的 检测热休克蛋白 70mRNA在人原发性肝癌中的表达情况 ,探讨热休克蛋白 70在原发性肝癌演变过程中的意义。方法 采用原位杂交技术 ,用地高辛标记的热休克蛋白 70cDNA探针检测 4 1例人原发性肝癌组织及2 0例肝硬变组织。结果 原位杂交结果显示 4 1例人原发性肝癌组织中 2 1例热休克蛋白 70mRNA阳性 ( 5 1 2 % ) ,2 0例肝硬变组织有 11例阳性 ( 5 5 0 % ) ,两组之间无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 热休克蛋白 70mRNA在人原发性肝癌组织中及肝硬变组织中有较高水平的表达 ,提示热休克蛋白 70参与了原发性肝癌的发生及发展过程 ,对其生物学特性作进一步研究 ,可能为肝癌发病机制提供一定的理论依据。
- 胡沛臻杨守京马福成刘彦仿
- 关键词：肝肿瘤热休克蛋白70原位杂交MRNA
- 汉滩病毒感染诱导热休克蛋白70表达被引量：7
- 2000年
- 为了解汉滩病毒感染后细胞的应激反应及HSP70的表达与病毒复制的关系 ,在汉滩病毒A9株感染Vero E6细胞后 ,用免疫组织化学及核酸分子原位杂交法 ,对细胞HSP70基因的表达进行了检测。结果表明 ,汉滩病毒感染细胞 4h后即可诱导Vero E6细胞表达HSP70 ,表达可持续至感染后 5d ,且HSP70在细胞内的分布也有改变。
- 叶苓杨守京刘彦仿
- 关键词：热休克蛋白汉滩病毒VERO-E6细胞应激反应
- 汉坦病毒感染乳鼠脑组织中HSP70与病毒抗原关系被引量：1
- 2002年
- 目的 :探讨汉坦病毒 (HTNV)感染诱导乳鼠脑组织热休克蛋白 (HSPs)表达及热休克蛋白与病毒蛋白的相互关系。方法 :采用免疫荧光法检测实验性乳鼠感染脑组织中病毒抗原及HSP70的表达 ,用ELISA、免疫印迹、免疫共沉淀方法分析病毒抗原和HSP70的表达。结果 :HTNV感染诱导了乳鼠脑组织神经细胞高表达HSP70 ,组织中HTNV NP与HSP70关系密切 ,免疫共沉淀结果显示HSP70与HTNV NP结合形成复合物。结论 :HTNV实验性乳鼠感染脑组织中高表达的HSP70与病毒核心抗原 (HTNV NP)形成非共价复合物 ,该复合物可能在病毒感染复制及宿主免疫反应中发挥作用。
- 孙玉静杨守京刘彦仿
- 关键词：汉坦病毒感染乳鼠脑组织HSP70
- 汉坦病毒体外感染Vero-E6细胞诱导多种热休克蛋白的表达被引量：5
- 2007年
- 目的:观察汉坦病毒(HV)体外感染非洲绿猴肾上皮细胞(Vero-E6细胞)诱导热休克蛋白(HSP)的表达并探讨其与病毒结构蛋白的相互关系。方法:采用HV76-118株体外实验性感染Vero-E6细胞,随机分为对照组和病毒感染组,运用免疫细胞化学染色、Western blot及双特异性抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA),观察HV感染后HSP27、HSP70、葡萄糖调节蛋白(Grp94)3种HSP的表达情况,并分析上述HSP与病毒核衣壳蛋白(NP)之间的相互关系。结果:HV76-118株感染Vero-E6细胞24 h后,免疫细胞化学染色法可检出HV-NP阳性信号。Westernblot结果表明,与对照组相比较,HSP27、HSP70、Grp94的表达水平在感染后24 h显著升高(P<0.05,n=5)。更为重要的是,ELISA检测发现HV-NP同时与HSP27、HSP70、Grp94呈复合物形式存在。结论:HV体外感染可诱导Vero-E6细胞高表达多种HSP,且能与病毒结构蛋白形成复合物,上述过程可能参与了HV-宿主细胞的相互作用。
- 余璐马恒段春光杨守京
- 关键词：汉坦病毒热休克蛋白
- 汉坦病毒感染诱导乳鼠脑神经细胞表达热休克蛋白70被引量：6
- 2001年
- 生后 2～ 3天的昆明乳鼠 ,每只腹腔接种 0 .0 5mL 10 0个半数致死量的陈株汉坦病毒 ,于接种后不同时间点处死动物 ,取其脑组织常规固定 ,石蜡包埋制备 5 μm连续组织切片 ,用免疫组化法检测组织中的病毒抗原及热休克蛋白 70的表达 ,用共聚焦显微镜观察二者之间的关系。结果发现 ,感染了病毒的组织能够稳定地检测到热休克蛋白 70的表达 ,而病毒阴性的组织则检测不到热休克蛋白 70的表达 ,且二者有共定位关系 ,其分布与组织病变一致。这与在病毒感染的VeroE6细胞及EHF病人尸检组织中得到的结果一致 ,说明病毒感染可诱导热休克蛋白 70的表达 。
- 赵君杨守京刘彦仿
- 关键词：热休克蛋白汉坦病毒
- 汉滩病毒体外感染血管内皮细胞诱导多种热休克蛋白表达
- 目的观察汉滩病毒（HTNV）体外感染人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）诱导热休克蛋白（Heat shock proteins,HSPs）的表达并探讨其与病毒结构蛋白的相互关系。方法采用 HTV 76-118株体外实验性感...
- 余璐段春光杨守京
- 关键词：汉滩病毒热休克蛋白
- 文献传递
- 汉滩病毒核蛋白与热休克蛋白GRP94、HSP27的相互作用被引量：5
- 2003年
- 为研究汉滩病毒(Hantaan virus, HTNV)感染诱导乳鼠脑组织热休克蛋白GRP94、HSP27与病毒蛋白的相互关系,选出生2～3d的昆明乳鼠实验性感染汉滩病毒,取8d后发病乳鼠脑组织部分制石蜡切片,用免疫组化结合共聚焦显微镜检测组织中病毒抗原及GRP94、HSP27的表达,部分制匀浆液,用ELISA、免疫共沉淀方法分析病毒抗原和GRP94、HSP27的关系。结果示汉滩病毒感染诱导乳鼠脑组织神经细胞高表达GRP94且与细胞内病毒抗原有共定位关系,但未见HSP27诱导高表达;免疫共沉淀显示汉滩病毒核心抗原(HINV-NP)与GRP94、HSP27呈非共价复合物形式存在。该结果为进一步探讨HSPs在病毒感染复制中的作用以及抗病毒感染方面提供了有意义的实验资料。
- 高娟杨守京孙玉静刘彦仿
- 关键词：汉滩病毒热休克蛋白非共价复合物
