国家科技重大专项(2008ZX08006-004)
- 作品数：6 被引量：3H指数：1
- 相关作者：李莉张守全束刚张志岐江青艳更多>>
- 相关机构：华南农业大学中国地质大学长城学院河北农业大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪IGF2R基因多态性及其遗传印记被引量：1
- 2010年
- 【目的】在猪IGF2R基因的外显子内寻找SNP,以SNP为遗传标记研究IGF2R基因的印记表达特征。【方法】选取3个品种243头瘦肉型商品猪为试验材料,以IGF2R基因为候选基因,通过PCR-SSCP对IGF2R基因多态性进行检测;选取IGF2R基因外显子48的SNP杂合子仔猪3头和成年猪1头,对脑、心脏、肝脏、脾、肾、肺、胃、胰、胸腺、膀胱、肌肉、舌、胎盘的组织器官mRNA产物分别进行RT-PCR-RFLP电泳和RT-PCR-SSCP电泳。【结果】IGF2R基因外显子48中有一个单核苷酸多态性位点,384位碱基由G突变为A,该位点为NspⅠ酶切位点;IGF2R的外显子48在3头仔猪和1头成年猪的主要组织器官仅表达母亲来源的等位基因。【结论】猪IGF2R基因呈母方表达、父方印记的遗传特征。
- 李莉陈预明白银山吴同山张守全
- 关键词：遗传印记
- 转基因克隆牛外源基因整合位点的研究被引量：1
- 2012年
- 整合位点的侧翼序列是外源基因表型研究和功能探讨的前提条件,对目的基因的正常转录和表达有着重要影响。本试验利用热不对称交措式PCR(Thermal Asymmetric Interlaced PCR,TAIL-PCR)的方法克隆了目的基因。结果表明:外源基因整合到牛的12号染色体基因组克隆(NW_003104315.1)中。分析了整合位点的纯合性发现转基因牛为整合位点杂合子。TAIL-PCR法能够有效、快速的鉴定外源基因在基因组中的整合位置,具有良好的应用前景。
- 谭贝贝苏红胡嘉祺吴茜红徐大庆巩校东李世杰
- 关键词：TAIL-PCR转基因牛整合位点
- 猪SDHD和DCN基因多态性及遗传印记
- 2011年
- 为揭示猪SDHD和DCN基因印记表达特征,该研究以长白、大白、蓝塘3个品种的166头纯种猪为试验材料,在猪的SDHD和DCN基因的外显子内寻找SNP,通过PCR-SSCP方法对SDHD和DCN基因多态性进行检测;分别选取SDHD基因外显子4和DCN基因外显子2的SNP为杂合子的仔猪3头,以其主要的组织器官mRNA的产物分别进行RT-PCR-RFLP电泳和RT-PCR-SSCP电泳.结果表明:SDHD基因外显子4中有1个单核苷酸多态性位点,即131位碱基由G突变为T,且该位点为MboI酶切位点;DCN基因外显子2中有1个单核苷酸多态性位点,即编码区30位碱基由T突变为A;SDHD基因外显子4和DCN基因外显子2在上述3头仔猪的胃、胸腺、胰、脾、肺、肌肉、肝、舌、肾、脑、膀胱、心脏等主要组织器官和胎盘同时表达父母双方来源的等位基因.可见,SDHD和DCN基因在猪呈父母双方表达的遗传特征.
- 李莉贾同吴同山张豪张守全
- 关键词：SNP遗传印记
- 硫化物-醌氧化还原酶(SQR)基因真核表达载体的构建及表达
- 2011年
- 探讨SQR基因真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc的构建及其在真核细胞中的表达。根据已知荚膜红杆菌SQR基因序列设计5'端和3'端引物,采用PCR方法获得SQR基因,通过pMD-18T载体构建得到中间质粒pMD-18T-SQR-Myc;采用限制性内切酶XhoⅠ和KpnⅠ双酶切该中间质粒,将SQR基因插入真核表达载体pcD-NA3.1(-)相应酶切位点,获得重组质粒pcDNA3.1(-)-SQR-Myc;采用脂质体法瞬时转染HEK293细胞并进行West-ern blot蛋白鉴定。结果显示:该研究已成功构建了真核表达载体pcDNA3.1(-)-SQR-Myc,质粒测序及酶切结果完全正确,并且SQR能够在HEK293细胞系中正常表达。
- 于峰祥于建宁王公金潘伟芹徐小波徐志伟花卫华刘泉
- 关键词：重组质粒真核表达
- 肠道特异性基因表达调控元件研究进展被引量：1
- 2010年
- 外源性基因在特定靶组织的高效、稳定表达是转基因动物研究和基因治疗的重要前提。外源基因在非靶组织中的异位表达一直是制约基因治疗技术的发展,影响转基因动物的安全性的重要因素。目前,一系列肠道特异性基因表达调控序列相继被克隆并鉴定。就上述调控序列的结构、功能和转录活性以及组织特异性作简要综述,为构建稳定、高效、特异性的嵌合型肠道转录调控元件提供理论依据,对环境友好型转基因动物的生产以及肠道性疾病有效的基因治疗研究具有重要参考价值。
- 翟亚峰束刚张志岐王松波江青艳
- 关键词：肠道特异性基因治疗转基因动物
