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国家自然科学基金(J1210053): 作品数：17 被引量：39H指数：4; 相关作者：赵敏孙凤阳赵越由香玲马静更多>>; 相关机构：东北林业大学黑龙江省农业科学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>; 相关领域：农业科学环境科学与工程医药卫生生物学更多>>

利用细胞和基因工程技术提高植物三萜皂苷合成策略的研究进展被引量：1: 2013年; 三萜皂苷是一类很重要的植物次生代谢产物,是很多药用植物的主要活性成分,其在抗癌、抗炎、抗过敏、防治心脑血管疾病等方面有很好的功效。由于三萜皂苷自然产量低,限制了其商业应用。从植物细胞工程和基因工程技术角度,分析了影响三萜皂苷合成的主要因素:组织材料的筛选、培养条件的优化、规模化生产以及与三萜皂苷合成相关酶基因的诱导和过表达等,概述了提高三萜皂苷合成的相关研究成果。; 孙凤阳胡盈赵越由香玲; 关键词：三萜皂苷关键酶基因细胞工程技术基因工程技术诱导子

白桦BpLHY、BpTOC1与BpGI节律基因生物信息学及表达分析: 2016年; [目的]探究白桦生物钟基因运行机制及在生长发育、胁迫应答中的作用。[方法]运用生物信息学方法对白桦BpLHY、BpTOC1、BpGI节律基因进行分析,预测其编码蛋白的结构功能。利用RT-PCR方法检测白桦BpLHY、BpTOC1、BpGI基因昼夜表达模式,在非生物胁迫重金属Cd、低温(4℃)、与盐(Na Cl)及信号诱导SA(水杨酸)、SNP(硝普钠)下的表达情况。[结果]白桦BpLHY、BpTOC1、BpGI节律基因编码的均为疏水性非分泌型,具有跨膜能力的mixed蛋白。白桦BpTOC1、BpLHY基因表达量均呈现白天低夜晚高的昼夜变化模式,而BpGI表达量则表现出白天高夜晚低的模式。在重金属Cd、低温(4℃)、与盐(Na Cl)非生物胁迫下,BpLHY、BpTOC1与BpGI均上调表达。SA、SNP诱导白桦BpLHY与BpTOC1表达下调,而诱导BpGI表达上调。[结论]白桦BpLHY、BpTOC1、BpGI节律基因昼夜表达模式及非生物胁迫、信号诱导下的表达特征为进一步研究白桦生物钟基因作用机制及其在植物生长发育和胁迫应答中的作用奠定了基础。; 孙丰坤周姗李蕾蕾詹亚光曾凡锁; 关键词：白桦节律基因生物信息学非生物胁迫

芜菁花青素合成关键酶DFR基因启动子的克隆及功能分析被引量：2: 2014年; 在已经克隆的‘津田’芜菁和‘赤丸’芜菁二氢黄酮醇4–还原酶(DFR)基因的基础上,通过染色体步移法从两种芜菁基因组中克隆了BrDFR1和BrDFR2基因上游1 296和1 297 bp的启动子序列。生物信息学分析表明,启动子片段中包含TATA box、CAAT box、光调控元件、ABA应答元件、伤害应答元件、低温应答元件、防御与胁迫应答元件、MeJA应答元件等多个顺式作用元件。启动子BrDFR1P和BrDFR2P仅在15个核苷酸位点存在差异。将BrDFR1P和BrDFR2P分别连接到pCAMBIA1301植物表达载体上,构建Promoter::GUS载体,通过农杆菌介导遗传转化烟草。GUS组织化学染色检测表明,BrDFR1P和BrDFR2P均能驱动GUS基因表达。构建BrDFR1P和BrDFR2P的一系列缺失体,融合GUS基因后遗传转化烟草。染色结果表明,BrDFR1P和BrDFR2P缺失片段均具有相应的起始下游基因转录的活性特征。; 许志茹马静崔国新李玉花; 关键词：芜菁启动子

生物固定化技术及其在染料废水脱色中的应用被引量：4: 2016年; 在染料废水的生物处理法中,固定化技术得到了广泛的应用。根据造价及其稳定性,不同的固定化技术适用于不同的染料降解反应中。较游离态而言,生物固定化技术具有高稳定性、高生物活性和重复利用性。最近,关于固定化技术的报道已经有很多。然而,大多数研究均针对于特定的固定化技术的应用。综述了菌体与酶固定化的主要方法,比较了不同固定化技术的优缺点及不同载体材料特性,简述了固定化技术在处理染料废水中的应用。; 张淼崔岱宗张昊何如宝赵敏; 关键词：染料废水脱色

白桦BpGT14基因启动子克隆及表达活性分析被引量：3: 2016年; 本文利用Site Finding-PCR方法克隆了白桦BpGT14基因起始密码子ATG上游2 169 bp序列,并通过PLACE启动子预测工具对其进行元件分析。结果表明,该启动子片段含有启动子核心元件及多种逆境及激素响应元件,同时具有植物苯丙烷及木质素生物合成的MYB类转录因子的重要结合基序。研究选取了其中含有启动子核心元件的1 156 bp片段构建了pBpGT14∷GUS植物表达载体,利用农杆菌侵染的方法将pBpGT14∷GUS报告基因瞬时转化烟草植株,鉴定该启动子在烟草中的表达活性及对非生物胁迫和激素的响应模式。对转基因烟草植株进行GUS染色,结果表明该启动子具有启动活性,且在茎段处活性较高;进一步分析非生物胁迫对烟草中GUS酶活性的影响,表明该启动子对ABA、NaCl、PEG及高温处理均有明显响应,且对于NaCl及PEG处理响应迅速。为了更好的鉴定白桦BpGT14基因启动子在白桦细胞中的启动活性及响应模式,本文构建了pBpGT14∷GFP载体并瞬时转化白桦茎段悬浮细胞,进行研究。GFP转录水平分析结果与GUS酶活性结果基本一致,但其中部分时间点仍存在差异。选取PEG处理3、6、12及24 h的转GFP基因白桦茎段悬浮细胞,在显微镜下观察其绿色荧光蛋白,以此揭示该启动子对干旱的响应模式。结果表明,该启动子在白桦茎段悬浮细胞中启动了GFP的表达,在处理初期(3 h),荧光效果明显;随着处理时间的增加,细胞脱水明显,且在细胞壁表现高亮度荧光。; 李蕾蕾孙丰坤李天宇寇萍詹亚光曾凡锁; 关键词：启动子克隆报告基因非生物胁迫

Complex regulatory network of Betula BplSPL8 in planta: 2017年; SQUAMOSA-promoter binding protein-like(SPL) proteins are plant-specific transcription factors and participate in different pathways,including the vegetative to reproductive transition,male sterility,biosynthesis of gibberellic acid(GA),plant morphogenesis and response to environmental stress.In this study,we generated transgenic Arabidopsis that overexpressed Betula Bpl SPL8 and confirmed that Bpl SPL8 is a transcription factor with transcriptional activation activity and is located in the nucleus.Functional analysis of Bpl SPL8 showed that it is involved in regulating different development processes:(1) Bpl SPL8 can delay flowering by reducing sensitivity to GA under short days;(2) Bpl SPL8 controls the number and morphogenesis of leaves,including up-rolling leaves under long days and folded leaves mediated by GA under short days;(3) Bpl SPL8 can promote root elongation during late development of roots and inhibit lateral root formation;(4)Bpl SPL8 may be involved in regulating carotenoid biosynthesis and secretion metabolism.These results show that there is a complex regulatory network for the SPL family genes that is mediated by other components and may provide a new insights for the functional research of SPL genes.; Chuang LiuMinxiao GuanXiaoqing HuJing TianXuemei Liu; 关键词：BIRCH TRANSGENIC CAROTENOID

耐铜菌株4bs的鉴定及其对染料脱色的效果被引量：3: 2016年; 从土壤中筛选出1株具有较高漆酶活性的菌株,经分子生物学方法鉴定,该菌株为芽孢杆菌属细菌,将其命名为Bacillus sp.4bs。菌株4bs的最适生长温度和pH分别为37℃和7.0,其在6%(w/v)Na Cl溶液中能够正常生长,在含有2.0 mmol/L Cu^(2+)的培养基中仍生长旺盛。以丁香醛连氮为底物,菌株4bs的芽孢漆酶活性为35.66U/g(干重),其芽孢漆酶最适反应温度为80℃,最适反应pH值为6.8;0.1 mmol/L的半胱氨酸、二硫苏糖醇和叠氮化钠抑制其活性,10 mmol/L的Na^+, K^+, Cu^(2+)和Li^+能够增强其活性。在pH 6.8的体系中,菌株4bs芽孢漆酶对结晶紫和茜素红在6 h内的脱色率分别为83.57%和77.16%;加入乙酰丁香酮(Ace)作介体时,对靛红的脱色率由52.73%提高到94.98%,对活性黑5的脱色率由19.01%提高到90.10%。; 孙海琼汪春蕾; 关键词：芽孢杆菌染料脱色

1株聚磷菌株的鉴定及其积累聚–β–羟基丁酸酯的条件被引量：1: 2014年; 从SBR活性污泥中筛选、分离出1株有聚–β–羟基丁酸酯(PHB)积累能力的聚磷细菌(将其命名为"LB4"),通过形态、生理生化及16S rDNA方法分析,鉴定该聚磷细菌为鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)。采用厌氧、好氧交替培养方法,研究影响其积累聚–β–羟基丁酸酯(PHB)的因素。结果表明:在厌氧初始阶段,当pH为8.0,COD为2 000 mg/L,培养温度为35℃时,通过批式补料方式短期限制磷元素对其进行培养,最有利于该菌株积累PHB,PHB的最高积累量可达菌体干重的32.6%。; 赵美金子靖李博刘哲君赵敏孙艺萍; 关键词：鲍曼不动杆菌

芜菁二氢黄酮醇4–还原酶基因的克隆与功能鉴定被引量：9: 2014年; 二氢黄酮醇4–还原酶(dihydroflavonol 4-reductase,DFR)是花青素生物合成晚期阶段的关键酶,属于NAD/NADP依赖型还原酶家族,催化从二氢黄酮醇转变成无色花色素苷的反应。利用UV-A处理‘津田’芜菁(‘Tsuda’turnip)和‘赤丸’芜菁(‘Yurugi Akamaru’turnip)块根24 h后提取总RNA,通过RT-PCR方法分别克隆了‘津田’芜菁BrDFR1和‘赤丸’芜菁BrDFR2基因。BrDFR1和BrDFR2的开放读码框分别为1 158 bp和999 bp,分别编码385和332个氨基酸。氨基酸序列分析显示,BrDFR1和BrDFR2与大白菜DFR具有高度同源性,从第8到第302位氨基酸的肽段具有FR_SDR_e结构域。BrDFR1和BrDFR2基因组全长序列均含有5个位置与序列完全相同的内含子。Southern杂交结果显示,‘津田’芜菁BrDFR1和‘赤丸’芜菁BrDFR2基因均为单一拷贝。UV-A可以诱导BrDFR1基因表达,对BrDFR2基因表达的诱导效果不明显。BrDFR1和BrDFR2基因在大肠杆菌细胞中可以表达并纯化出分子量约为42.8 kD的BrDFR1蛋白和37.5 kD的BrDFR2蛋白。过量表达BrDFR1和BrDFR2基因的烟草花色加深。芜菁DFR基因的RNAi载体遗传转化烟草后,转基因植株的花色变浅。这些工作将为阐明依光型和非依光型花青素生物合成机理奠定研究基础。; 许志茹刘通崔国新李春雷马静李玉花; 关键词：芜菁基因克隆

荧光银纳米团簇的生物合成及其在痕量六价铬检测中的应用被引量：5: 2021年; 【目的】利用季也蒙毕赤酵母ZJC-1合成银纳米团簇并用于痕量Cr(Ⅵ)的检测。【方法】使用经耐银驯化的季也蒙毕赤酵母ZJC-1生物合成荧光银纳米团簇,并对其结构和荧光性能进行了表征,探究Cr(Ⅵ)对银纳米团簇荧光的选择性猝灭作用,建立了银纳米团簇荧光强度与Cr(Ⅵ)浓度的线性关系。同时还考察了体系p H和其他金属离子对Cr(Ⅵ)检测的影响。【结果】Cr(Ⅵ)浓度在一定的范围内(1–80μmol/L)与银纳米团簇荧光强度(F_0–F)/F_0有着良好的线性关系(R~2=0.9821),线性方程为(F_0–F)/F_0=0.0054×C_(cr(Ⅵ))+0.1876,检测限为184 nmol/L(信噪比为3)。利用该方法检测实际水样(松花江、马家沟河)中的Cr(Ⅵ),回收率介于97.73%–102.88%之间。【结论】以季也蒙毕赤酵母ZJC-1为还原剂和稳定剂,制备了具有较好荧光性能的水溶性银纳米团簇,基于Cr(Ⅵ)对银纳米团簇荧光的选择性猝灭作用,建立了一种快速且灵敏检测痕量Cr(Ⅵ)的新方法,并成功地应用于松花江、马家沟河水样中Cr(Ⅵ)的测定,在分析检测领域中具有良好的应用前景。; 田野娄虎姬彦飞董欣欣赵熙明张杰; 关键词：生物合成荧光猝灭

国家自然科学基金(J1210053)

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