教育部留学回国人员科研启动基金(无)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因(OMP-1)的克隆、表达及其ELISA方法的建立被引量：2
- 2009年
- 猪传染性胸膜肺炎由猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起,是猪最重要的呼吸道传染病之一。通过筛选APP 3～8 kb随机基因组文库,获得1株阳性克隆。测序拯救质粒得到其DNA序列,通过BLAST分析确定此片段为APP外膜蛋白基因,预计成熟蛋白质的分子量为48.766 kD。根据序列设计特异性引物,用PCR扩增该基因,分子克隆表达该外膜蛋白。Western blot结果表明,该蛋白与APP康复期血清发生反应。纯化该重组蛋白,并将其作为抗原包被ELISA酶标板,对已知阳性血清、阴性血清和临床送检血清样品进行ELISA检测,为最终建立APP ELISA检测方法奠定了基础。
- 杨建德刘燕霏李本强徐军
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌外膜蛋白基因酶联免疫吸附试验
- 猪胸膜肺炎放线杆菌基因组文库的构建被引量：7
- 2008年
- 由猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起的猪传染性胸膜肺炎是猪最重要的呼吸道传染病之一。为研究该细菌表面蛋白的结构与功能,选取APP代表菌株,提取其基因组DNA,用TSP5091随机消化成3～8 kb的片段并回收,连接到预先消化的λZAPII载体上,经过包装、扩增和滴定后,成功地构建了APP基因组文库。
- 杨建德刘燕霏徐军
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌基因组文库
- 猪胸膜肺炎放线杆菌Ⅱ型分泌蛋白结构与功能的研究
- 2010年
- 猪胸膜肺炎放线杆菌(APP)引起猪传染性胸膜肺炎,是猪的最重要呼吸道传染病之一。通过筛选APP 3～8 kb随机基因组文库,获得1株阳性克隆。测序拯救质粒得到序列,通过BLAST分析确定此片段为APP Ⅱ型分泌蛋白基因,预计成熟蛋白分子量为45.716 KD。根据序列设计特异性引物PCR扩增该基因,分子克隆表达该Ⅱ型分泌蛋白。Western blot结果表明,该蛋白与APP康复期血清发生反应;研究还发现,纯化的Ⅱ型分泌蛋白能结合C3。
- 杨建德刘燕霏李本强徐军马吉飞
- 关键词：猪胸膜肺炎放线杆菌
