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江苏省中医药管理局科技项目(LZ11117)
江苏省中医药管理局科技项目(LZ11117)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：樊宏伟吴梦莹张雄刘长青魏凯峰更多>>
- 相关机构：南京医科大学南京中医药大学更多>>
- 发文基金：江苏省中医药管理局科技项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 九味通窍汤对人脑胶质瘤的体外药效学研究及组方分析被引量：1
- 2017年
- 目的:对九味通窍汤进行组方拆分,并对各组进行体外抗脑胶质瘤药效学分析,对其体外药效学可能的作用机制进行探索,为探究全方起效的物质基础提供实验依据。方法:根据君臣佐使组合原理将九味通窍汤拆分成7个组方,选用人源脑神经胶质瘤U251细胞进行体外药效筛选,采用噻唑蓝(MTT)法测定各个组方对细胞活力的影响;采用流式细胞术比较所得体外药效最佳组方Ⅳ与全方(10,4,1 g·L^(-1))作用U251细胞24 h对细胞的凋亡影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测全方及组方Ⅳ对凋亡蛋白p53和抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)表达影响;组方Ⅳ的醇提物用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯及水饱和正丁醇梯度萃取,采用MTT法测定各萃取部位对U251细胞增殖的抑制作用。结果:组方Ⅳ对细胞的抑制作用最为明显,且具有浓度依赖性;细胞经10,4,1 g·L^(-1)组方Ⅳ,全方处理24 h后凋亡率显著高于空白组(P<0.01);细胞经4 g·L^(-1)组方Ⅳ,全方处理后Bcl-2蛋白表达水平较空白组显著降低(P<0.01),p53蛋白表达较空白组显著提高(P<0.01);组方Ⅳ梯度萃取后部位Ⅲ对细胞活力的抑制作用最为明显,且具有浓度依赖性。结论:组方Ⅳ细胞活力抑制作用明显,诱导细胞凋亡明显,并可以降低Bcl-2,并提高p53蛋白的表达;部位Ⅲ抑制脑胶质瘤细胞活力明显。
- 刘长青张雄樊宏伟
- 关键词：脑胶质瘤组方分析体外药效学
- 九味通窍汤及其不同萃取部位的体外药效学考察被引量：1
- 2015年
- 目的：研究九味通窍汤醇提物经有机溶剂梯度萃取后不同萃取部位的化学成分变化,通过体外药效学筛选有效萃取部位,探索抗脑胶质瘤细胞增殖作用的最有效部位,为阐明该复方作用机制提供实验依据。方法：九味通窍汤经乙醇回流提取浓缩,采用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和水饱和正丁醇进行梯度萃取,得石油醚萃取物（部位Ⅰ）、三氯甲烷萃取物（部位Ⅱ）、乙酸乙酯萃取物（部位Ⅲ）、水饱和正丁醇萃取物（部位Ⅳ）、残留水层液（部位Ⅴ）,选择毛蕊异黄酮葡萄糖苷（毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷）、芒柄花苷（芒柄花素-7-O-β-D葡萄糖苷）、毛蕊异黄酮和芒柄花素指标成分,采用HPLC确定各萃取物中4种成分的含量,流动相（乙腈＋0.05%甲酸）（A）-（水＋0.05%甲酸）（B）梯度洗脱（0-50 min,5%-55%A;50-70 min,55%-60%A;70-90 min,60%-85%A;90-100 min,85%-100%A）,检测波长254 nm。选用人源脑神经胶质瘤U251细胞活性进行跟踪筛选,应用MTT比色法测定各萃取部位对细胞生存的影响。结果：部位Ⅲ中毛蕊异黄酮葡萄糖苷-芒柄花苷-毛蕊异黄酮的含量比1.0∶10.8∶8.2,部位Ⅲ的半抑制率（IC50）46.89 g·L^-1,与其他部位比较,含各指标性成分较多且含量较高,对U251细胞增殖抑制作用较为明显,且呈一定的浓度依赖性。结论：部位Ⅲ为九味通窍汤抗脑胶质瘤U251细胞增殖作用的最有效部位。
- 臧元帅吴梦莹余黎魏凯峰樊宏伟
- 关键词：U251细胞毛蕊异黄酮葡萄糖苷毛蕊异黄酮芒柄花素
- 九味通窍汤的体外抗脑胶质瘤作用及化学成分分析被引量：2
- 2014年
- 目的研究九味通窍汤对人神经胶质瘤细胞的增殖抑制作用,并分析其化学成分。方法采用MTT法检测九味通窍汤醇提取物对人神经胶质瘤U251细胞体外增殖活性的抑制,HPLC-MS法检测其指纹图谱,并利用现有的对照品对主要成分进行结构确证。结果九味通窍汤醇提取物对U251细胞的增殖具有明显抑制作用,MTT法的剂量反应曲线为Y=0.123X+0.034 5,24h的半数抑制浓度IC50为3.78g生药/L,安全浓度IC10为0.53g生药/L。九味通窍汤的指纹图谱有28个色谱峰,含有槲皮素、毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮葡萄糖苷(毛蕊异黄酮-7-O-β-D葡萄糖苷)、芒柄花素、芒柄花苷(芒柄花素-7-O-β-D葡萄糖苷)。结论九味通窍汤醇提取物在体外实验中具有抗脑胶质瘤作用,应用HPLC-MS法可快速、简便、准确地测定九味通窍汤的指纹图谱,与君药的指纹图谱具有良好的相关性,并利用对照品确定了主要成分的结构,为今后研究九味通窍汤的药效成分奠定了基础。
- 吴梦莹臧元帅樊宏伟
- 关键词：化学成分
