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抗冻蛋白及其在食品领域中的应用被引量：7: 2010年; 抗冻蛋白是具有热滞活性,能改变冰晶的形态和抑制冰重结晶的一类蛋白质。本文介绍了各种抗冻蛋白的结构、功能、活性及作用机制,并对其在冷冻食品领域中的应用进行了系统的综述。; 闫清华杨理邵强; 关键词：抗冻蛋白食品

植物抗冻蛋白研究新进展被引量：7: 2005年; 低温寒害是限制农作物产量和分布的一种全球性的自然灾害,提高植物的抗寒性具有重要的现实意义。植物抗冻蛋白自1992发现以来,逐渐成为研究的热点。文中就近年来植物抗冻蛋白的生化特性,生理功能,抗冻机制,结构模型,抗冻蛋白基因工程及其应用前景等作了较为系统的综述。; 邵强闫清华徐存拴; 关键词：植物抗冻蛋白生化特性基因工程

Tenebrio molitor抗冻蛋白基因afp84b cDNA的克隆及表达载体构建: 2010年; 为了研究黄粉甲(Tenebrio molitor)抗冻蛋白类系基因和蛋白的特征,试验采用RT-PCR方法扩增抗冻蛋白cDNA序列,将该序列克隆到质粒pUCm-T中,经双酶切、PCR和测序等鉴定后,与GenBank中已公布的该类系基因进行多重序列比对;并构建表达重组质粒pMAL-c2X-afp84b。结果表明:克隆出的长度为252 bp、编码84个氨基酸的黄粉甲抗冻蛋白基因afp84b(GenBank注册号DQ234056)与已公布的该类系基因的同源性高达95.92%。; 闫清华杨理邵强; 关键词：黄粉甲抗冻蛋白克隆

孕鼠子宫内5-HT免疫反应阳性肥大细胞的研究被引量：2: 2005年; 以正常孕鼠和自然抗着床鼠的子宫为实验材料,采用组织化学和免疫组织化学技术,研究了小鼠子宫肥大细胞(mast cell, MC)在胚泡着床前后(孕3～7 d)表达5-羟色胺(5-hydroxytryptamine ,5-HT)的状况.结果表明:(1)绝大多数子宫MC为5-HT免疫反应阳性,阳性率在77.3%～93.6%之间;(2)自然抗着床鼠的5-HT阳性率显著高于正常孕鼠 (P<0.05).实验结果提示:(1)子宫MC是孕鼠子宫内5-HT的重要来源,5-HT在着床过程中可能具有免疫调节作用;(2)子宫内MC 表达5-HT量的异常与抗着床现象的发生有一定的关系.; 张文学朱涛; 关键词：肥大细胞 5-羟色胺着床

黄粉甲抗冻蛋白AFP84a原核表达条件的优化和纯化被引量：1: 2011年; 为纯化黄粉甲抗冻蛋白AFP84a,对已构建的重组大肠埃希菌TBI诱导表达,对诱导温度、初始菌浓度I、PTG浓度及诱导时间等表达条件进行优化后,纯化该重组蛋白。通过分析比较,建立了目的蛋白表达的最优条件:温度25℃,初始菌OD600=0.6;IPTG终浓度0.5 mmol/L,时间8 h。SDS-PAGE及Bandscan4.3软件分析表明,融合蛋白含量超过总可溶蛋白的40%。融合蛋白经Amylose柱亲和纯化,Factor Xa酶切,电泳显示获得的目的蛋白呈单一条带。本研究结果为进一步对抗冻蛋白的性质和应用研究提供了有用的实验材料。; 闫清华康静杨理邵强; 关键词：抗冻蛋白

黄粉虫抗冻蛋白基因TmAFP84的克隆和序列分析: 2006年; 对黄粉虫抗冻蛋白(AFPs)基因进行RT-PCR扩增后,构建克隆重组质粒pUCm-T-TmAFP84,经双酶切、PCR和测序鉴定,克隆出了与GenBank中公布的编码84个氨基酸基因(注册号AF159114)基本相一致的抗冻蛋白基因TmAFP84,其同源性高达98.81%.与其他编码84个氨基酸的抗冻蛋白基因的同源性为95.92%.进而构建了表达重组质粒pMAL-p2X-TmAFP84.; 邵强闫清华张文学王兰徐存拴; 关键词：黄粉虫抗冻蛋白 RT-PCR 克隆

黄粉甲抗冻蛋白AFP84a在大肠杆菌中的高效表达及活性检测被引量：3: 2010年; 为表达和纯化黄粉甲Tenebrio molitor抗冻蛋白,采用RT-PCR方法扩增得到黄粉甲抗冻蛋白基因afp84acDNA,将其连接到pMAL-p2X质粒上,构建分泌型融合表达载体pMAL-p2X-afp84a,并在大肠杆菌Escherichia coli TBI中表达;进一步利用Amylose柱亲和纯化出该重组蛋白,后利用细菌抗寒性检测重组蛋白的生物活性。。结果显示:融合蛋白含量占总可溶蛋白的40%。SDS-PAGE分析表明,用MgSO4处理法与超声波细胞破碎法均可使融合蛋白从细胞中释放;融合蛋白经Amylose柱亲和纯化,FactorXa因子酶切,电泳显示获得的目的蛋白呈单一条带。细菌抗寒性检测表明该重组蛋白具有较高的抗冻活性。黄粉甲抗冻蛋白基因afp84acDNA的克隆、原核表达为进一步研究抗冻蛋白的性质和应用提供了有用的实验材料。; 闫清华杨理邵强; 关键词：黄粉甲大肠杆菌抗冻蛋白抗冻活性

昆虫抗冻蛋白:规则结构适应功能被引量：8: 2006年; 抗冻蛋白在环境温度低于体液熔点时能够结合到生物体内的冰核表面,通过限制冰核生长和抑制冰晶重结晶而保护有机体免受结冰引起的伤害。与其他生物抗冻蛋白比较,昆虫抗冻蛋白有很强的活性,结构上具有显著特征,如一级结构规律重复,超二级结构为β-螺旋,可与冰晶发生相互作用,具有TXT基序等。该文综述了近年来关于昆虫抗冻蛋白的结构以及分子生物学等方面研究的新进展,讨论了其结构与功能的关系。; 邵强李海峰徐存拴; 关键词：昆虫抗冻蛋白

黄粉甲抗冻蛋白基因afp72 cDNA的克隆和序列分析: 2008年; [目的]为抗冻蛋白基因afp72的体外表达和生物学功能研究奠定基础。[方法]从黄粉甲脂肪体中提取总RNA,通过RT-PCR克隆抗冻蛋白基因afp72,并构建克隆重组质粒pUCm-T-afp72。经双酶切后,将其与表达载体pMAL-p2X连接并转化到大肠杆菌TBI,构建表达重组质粒pMAL-p2X-afp72。[结果]afp72 cDNA长度为216 bpa;fp72的测序序列与GenBank中编码84个氨基酸的黄粉甲afps序列的同源性为89.48%a;fp72基因可能来自其他黄粉甲抗冻蛋白基因的突变或缺失;从蛋白水平上证实AFP72是一个抗冻蛋白,afp72是一个抗冻蛋白基因;表达重组质粒pMAL-p2X-afp72的构建是成功的。[结论]该研究为利用基因工程方法构建抗冻蛋白转基因植物提供了材料。; 闫清华邵强李延兰丰慧根; 关键词：黄粉甲抗冻蛋白克隆

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