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放射抗拒性食管癌细胞系的建立及基因表达差异分析被引量：8: 2006年; 目的观察食管癌细胞经射线反复照射后放射敏感性的变化，应用基因芯片技术分析放射抗拒性食管癌细胞基因表达变化。方法食管鳞状细胞癌细胞株TE13经反复γ射线照射（累积剂量120Cy），逐步筛选出具有放射抗拒性的细胞TE13R120。相差显微镜下观察TE13及TE13R120的形态学差异；应用细胞克隆形成实验，验证TE13及TE13R120两种细胞的不同放射敏感性，用流式细胞术检测它们的细胞周期分布特征；基因芯片分析两种细胞基因表达差异。结果TE13R120的细胞群体倍增时间为39．93h，长于亲代TE13（33．94h）。TE13及TE13R120的放射敏感性明显不同（仇值分别为1．63和2．85Gy，SF2值分别为0．55和0．64，Dq值分别为1．38和1．15Gy，n值分别为2．33和1．49）。两种细胞经4Gy放射线照射后，出现不同的细胞周期分布改变，12～48h TE13R120细胞周期变化不明显，而其亲代细胞TE13发生明显G1期阻滞。应用DNA芯片对2159个基因进行了筛选，TE13R120与TE13相比，上调基因96个，下调基因80个。结论新的食管癌细胞系TE13R120比其亲本对射线更加抗拒，并且在基因水平上发生明显变化。4Gy照射后12～48hTE13R120细胞周期变化不明显，而其亲代细胞TE13发生明显G1期阻滞。; 张萍周志国高献书卢付河乔学英宋永辉; 关键词：食管癌细胞放射抗拒性细胞周期基因芯片流式细胞术

今又生联合h-R3对不同放射敏感性食管癌细胞的作用研究: 2007年; 目的探讨重组腺病毒-p53抗癌注射液（今又生）、重组人源化表皮生长因子受体单克隆抗体（h-R3）单独及联合应用对不同放射敏感性食管癌细胞的作用。方法用MTT法测定h—R3、今又生及两药联合对TE13及放射抗拒性细胞TE13R120的生长情况的影响；采用流式细胞术检测两种药物单独及联合作用对TE13、TE13R120细胞周期分布的影响及对Bax、Bcl-2蛋白表达的影响。结果h-R3、今又生及联合用药组均对两种细胞增殖产生抑制作用，联合用药组对两种细胞的抑制作用高于h-R3单药组和今又生单药组，但差异均无统计学意义（P〉0.05）。h-R3与今又生同时作用后12h，对TE13细胞产生明显的G1期阻滞（P〈0.05），而对TE13R120可产生轻度的G1期阻滞。两药同时作用后12h，对凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达的影响不明显。结论h—R3与今又生联合应用对不同放射敏感性的食管癌细胞产生了增殖抑制作用，这种增殖抑制作用的发生可能与G1期阻滞有关，其具体机制有待于进一步研究。; 张萍周志国高献书卢付河宋永辉; 关键词：食管癌细胞表皮生长因子受体凋亡

食管癌细胞系TE13R120放射抗性与HDAC3、NF-kB和NRAGE关系的研究被引量：2: 2005年; 目的　探讨HDAC3、NF kB和NRAGE基因与食管癌细胞放射抗性的关系。方法　以人食管癌细胞系TE13和由TE13经γ射线反复照射建立的放射抗性细胞系TE13R12 0为研究对象 ,用Westernblotting技术检测这两种细胞于不同时间、剂量点照射后基因HDAC3、NF kB和NRAGE的蛋白表达 ;用流式细胞术检测相同时间、剂量点两种细胞的凋亡和细胞周期分布情况。结果Westernblotting显示 ,与TE13相比 ,TE13R12 0细胞照射前后HDAC3的核表达均增高 ,NF kB的表达也明显增强 ,NRAGE在两种细胞胞浆中的表达无差异。与TE13相比 ,TE13R12 0中S期细胞明显增多 ,照射后G2 期阻滞明显 ,凋亡水平较低。结论　基因HDAC3和NF kB可能在食管癌细胞放射抗性形成中发挥作用并可能有协同作用 ;NRAGE与食管癌辐射抗性的关系有待进一步研究。; 薛晓英高献书周志国张萍卢付河段惠军; 关键词：照射食管癌细胞系 NF-KB 辐射抗性

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国家自然科学基金(30240057)

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