国家自然科学基金(81171365)
- 作品数：20 被引量：64H指数：5
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- 两性霉素B通过调节HIF-1α活性抑制缺氧环境下食管癌Eca109细胞的侵袭迁移能力被引量：5
- 2014年
- 目的研究在缺氧环境下,两性霉素B(AmB)对食管癌Eca109细胞侵袭迁移能力的影响及其可能的机制。方法取常规培养(37℃,5%CO2,95%空气)对数生长期Eca109细胞,分别加入0、1.25、2.5、5μg/ml的AmB,放入三气培养箱(37℃,3%O2,5%CO2,92%N2)中缺氧培养24 h;采用细胞划痕实验、Transwell侵袭实验检测各组细胞迁移及侵袭能力;采用Real-time PCR和Western Blot检测各组细胞HIF-1α、MMP-2和E-cadherin mRNA及蛋白水平的表达。结果与对照组(0μg/ml)比较,各AmB处理组Eca109细胞体外迁移能力均显著降低(P<0.05),Eca109细胞体外穿过Matrigel胶的细胞数量均显著减少(P<0.05);与对照组(0μg/ml)比较,各AmB处理组Eca109细胞MMP-2 mRNA及蛋白表达水平均显著下调(P<0.05),E-cadherin mRNA及蛋白表达水平均上调(P<0.05),HIF-1α蛋白水平均下调(P<0.05),HIF-1αmRNA水平无明显变化(P>0.05)。结论 AmB能抑制缺氧条件下食管癌细胞Eca-109细胞的侵袭迁移能力,其机制可能为通过调控HIF-1α及其下游MMP-2、E-cadherin的表达。
- 康强强唐敏侯妍利段丽群陈兴月舒锦吴府容王颖李少林
- 关键词：两性霉素B食管癌HIF-1Α缺氧
- 转铁蛋白与RGD共修饰PLGA纳米粒的制备及其对黑色素瘤的靶向性研究被引量：2
- 2014年
- 目的构建转铁蛋白(transferrin,TF)与RGD(精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸,Arg-Gly-Asp)共修饰PLGA(聚乳酸羟基乙酸,poly(lactic-co-dycolic acid)纳米粒(TF/RGD-NPs),研究其黑色素瘤靶向性。方法采用乳化法制备TF和RGD共修饰纳米粒(TF/RGD-NPs),考察其形态、粒径、电位等理化性质。通过细胞摄取实验和黑色素瘤肿瘤球穿透实验考察TF/RGD-NPs与黑色素瘤B16细胞的亲和力和肿瘤组织穿透能力。结果制备的TF/RGD-NPs粒径为(113.4±12.5)nm,电位为(4.53±2.15)mV。体外细胞摄取实验表明B16细胞对TF/RGD-NPs的摄取效率分别是TF-NPs和RGD-NPs的2.7倍和2.9倍,差异均具有统计学意义(P<0.01)。细胞摄取实验和肿瘤球摄取实验结果表明TF/RGD-NPs具有良好的黑色素瘤细胞亲和力。结论转铁蛋白与RGD共修饰纳米粒具有良好的黑色素瘤靶向性,是一种潜在的黑色素瘤靶向给药系统。
- 李宗祥孙平
- 关键词：转铁蛋白RGDPLGA纳米粒黑色素瘤药物靶向
- 沉默CD133基因对CD133^+肝癌干细胞放射敏感性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究沉默CD133基因对人肝癌CD133+-HepG2干细胞放射敏感性的影响。方法免疫磁珠分选HepG2细胞;流式细胞术检测分选前后CD133表达率;NOD/SCID小鼠成瘤实验验证其干性;靶向沉默CD133基因并分组(空白组、阴性感染组、阳性感染组);RT-PCR和Western blot检测各组CD133基因mRNA和蛋白表达;克隆形成实验检测各组细胞经不同剂量照射后的克隆形成率及存活率,绘制存活曲线并计算各组细胞放射生物学参数D0、Dq、N及放射增敏比(SER);流式细胞术检测各组细胞周期及凋亡情况。结果流式细胞术检测结果显示,分选前后CD133表达率分别为(1.36±0.20)%和(87.62±1.92)%。CD133+细胞在细胞数为1×103/ml时即可形成皮下移植瘤。RT-PCR和Westernblot检测结果显示,阳性感染组CD133 mRNA和蛋白表达均受到明显抑制。流式细胞术检测结果显示:阳性感染组G1、S期减少G2期增加,细胞凋亡率明显增加。克隆形成实验显示阳性感染组D0、Dq、N值与SF2均减小,放射敏感性明显增强,其SER为(1.37±0.02),差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 CD133作为肝癌干细胞的表面标志物之一,可能成为肝癌干细胞放射治疗增敏的靶点。
- 王勇唐川兰曦冉雪琪邹冬玲曹姝李芳李少林
- 关键词：CD133肝癌干细胞RNA干扰
- X射线增强CD133^-鼻咽癌细胞干样能力的研究被引量：2
- 2016年
- 目的探讨CD133^-鼻咽癌细胞经X射线处理后,其干样相关潜能是否得到增强。方法采用免疫磁珠法分选人鼻咽癌CNE-1细胞株,采用流式细胞仪检测分选后细胞CD133的表达率,并通过侵袭能力分析及体内成瘤实验鉴定其干性。采用4 Gy的X射线照射非肿瘤干细胞的CD133^-鼻咽癌细胞,通过侵袭能力分析及体内成瘤实验观察照射前后其干性特征变化,采用RT-PCR检测其CD133、SOX2及OCT4 mRNA表达变化。结果流式细胞仪检测结果提示CD133^+细胞及CD133^-细胞亚群,其CD133表达分别为97.72%±0.82%和1.63%±0.66%。CD133^+细胞亚群其侵袭能力及体内成瘤能力明显强于CD133^-细胞亚群。经电离辐射后,CD133^-细胞亚群其侵袭能力及体内成瘤能力明显增加。RT-PCR结果显示,照射后CD133、SOX2及OCT4 mRNA的表达水平明显上调。结论在体外,X射线可通过上调干样相关基因表达,从而增强CD133^-鼻咽癌细胞的干样相关潜能。
- 刘双唐敏甘生敏何燕琼李少林刘旭杰彭志平
- 关键词：X射线肿瘤干细胞鼻咽癌CD133
- mdr1反义寡核苷酸增强多药耐药肝癌细胞HepG2/ADM化疗敏感性的实验研究被引量：1
- 2014年
- 目的探讨在体外实验条件下mdr1反义寡核苷酸对多药耐药肝癌细胞株化疗敏感性的影响。方法以肝癌细胞Hep G2/ADM为研究对象,设立mdr1反义寡核苷酸组和空白试剂组作对照,利用脂质体包载肿瘤耐药基因mdr1的反义寡核苷酸进行细胞转染,通过反转录聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫印迹实验(Western blotting)分别检测mdr1基因m RNA和P-gp蛋白表达,通过MTT实验检测细胞转染前后对阿霉素(ADM)、顺铂(DDP)和5-氟尿嘧啶(5-FU)的化疗敏感性。结果 Hep G2/AMD肝癌细胞经反义寡核苷酸处理后,mdr1m RNA、P-gp蛋白表达水平均明显降低,对ADM、DDP和5-FU的化疗敏感性明显增强。结论反义寡核苷酸能在体外有效增加肝癌细胞Hep G2/ADM对化疗药物的敏感性。
- 廖奎刘双何燕琼蒋明东李少林彭志平
- 关键词：药物耐受性
- 蒽贝素联合阿霉素对乳腺癌细胞MCF-7增殖和荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响被引量：2
- 2014年
- 目的探讨阿霉素(doxorubicin,DOX)联合X连锁凋亡抑制蛋白小分子抑制剂蒽贝素(embelin,EB)对乳腺癌细胞MCF-7增殖及荷瘤裸鼠肿瘤生长的影响。方法根据加入药物的不同将MCF-7细胞分为生理盐水组、阿霉素干预组、蒽贝素干预组和联合干预组(蒽贝素+阿霉素)。MTT法检测各组对乳腺癌MCF-7细胞增殖的影响。流式细胞术检测各组肿瘤细胞凋亡情况。构建乳腺癌MCF-7细胞肿瘤球模型,探讨阿霉素联合蒽贝素对肿瘤球的生长抑制作用。建立乳腺癌裸鼠移植瘤模型,探讨阿霉素联合蒽贝素对乳腺癌异位瘤的生长抑制作用。结果乳腺癌MCF-7细胞在给药后48h,联合干预组对肿瘤细胞的增殖抑制率显著大于其他给药组,差异具有统计学意义(P<0.01);细胞凋亡实验和肿瘤球生长抑制实验都表明联合干预组的肿瘤细胞抑制能力显著强于其他组,差异具有统计学意义(P<0.01);荷瘤小鼠实验结果显示,联合干预组的肿瘤生长抑制作用显著强于其他组,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论阿霉素与蒽贝素均具有抑制乳腺癌增殖的作用,2者联合应用能够发挥协同作用,增强抗肿瘤能力。
- 李宗祥孙平
- 关键词：阿霉素乳腺癌
- 稳心颗粒治疗高血压性心脏病心律失常的疗效分析被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨稳心颗粒治疗高血压心脏病合并心律失常中的效果,为患者提供更好的治疗方案。方法:将110例高血压性心脏病合并心律失常患者随机分成对照组和治疗组,每组各55例。两组均进行常规的降压治疗,其中治疗组在常规治疗的基础上服用稳心颗粒,1袋/次,3次/d,6周为一个疗程。对比两组治疗效果。结果:治疗后,治疗组总有效率为89.1%(49/55)显著高于对照组的72.7%(40/55),差异具有统计学意义(P<0.05);治疗组患者阵发性和永久性心房颤动占比分别5.5%(3/55)、0,低于对照组的12.7%(7/55),1.8%(1/55),其中阵发性心房颤动比较差异有统计学意义(P<0.05);两组患者均未出现较明显的不良反应。结论:稳心颗粒治疗高血压心脏病合并心律失常中疗效确切,不良反应少。
- 李婷婷蒋宜唐渝平史若飞裴文楠
- 关键词：稳心颗粒心律失常高血压疗效
- 紫杉醇联合金雀异黄素用于肺癌细胞的抑制效果评估被引量：1
- 2014年
- 目的探讨紫杉醇(paclitaxel,PTX)联合金雀异黄素对肺癌细胞的抑制作用。方法将肺癌A549细胞随机分为生理盐水组、紫杉醇干预组、金雀异黄素干预组和联合干预组。MTT法研究紫杉醇联合金雀异黄素对肺癌A549细胞的增殖抑制情况。流式细胞术检测给药后肿瘤细胞凋亡情况。建立A549肺癌裸鼠移植瘤模型,计算抑瘤率。结果肺癌A549细胞给药48h后,紫杉醇干预组、金雀异黄素干预组和联合干预组对肿瘤细胞的抑制率分别为(57.0±4.5)%、(34.0±4.6)%和(77.0±4.4)%,差异具有统计学意义(P<0.01);紫杉醇干预组、金雀异黄素干预组和联合干预组凋亡率分别为63.4%、41.2%和84.5%,而生理盐水组凋亡率为7.6%,差异具有统计学意义(P<0.01);荷瘤小鼠实验结果显示,相比于生理盐水组,金雀异黄素组、紫杉醇组和联合干预组对肿瘤生长的抑制率分别为(18.2±3.4)%、(32.1±4.2)%和(63.4±5.1)%,联合干预组与其他单独给药组间差异具有统计学意义(P<0.01)。结论紫杉醇与金雀异黄素均具有抑制肺癌细胞增殖的作用,2者联用能够发挥协同作用,增强抗肿瘤能力。
- 孙平侯东彬
- 关键词：紫杉醇金雀异黄素肺癌细胞
- 蒽贝素联合紫杉醇抑制肺癌A549细胞的增殖和荷瘤裸鼠肿瘤的生长研究被引量：3
- 2014年
- 目的研究蒽贝素联合紫杉醇对A549细胞的增殖抑制作用和对肺癌异位瘤的生长抑制作用。方法采用MTT法研究蒽贝素联合紫杉醇对A549细胞的增值抑制作用。流式细胞术检测蒽贝素联合紫杉醇诱导A549细胞的凋亡率。构建裸鼠A549肺癌异位瘤模型,研究蒽贝素联合紫杉醇对肺癌异位瘤的生长抑制作用。结果蒽贝素联合紫杉醇对A549细胞的增殖抑制作用显著强于蒽贝素组和紫杉醇组,差异具有统计学意义(P<0.01)。细胞凋亡实验结果显示,蒽贝素联合紫杉醇诱导A549细胞凋亡率分别是蒽贝素组和紫杉醇组的4.8倍和2.4倍,差异具有统计学意义(P<0.01)。荷瘤裸鼠治疗实验结果显示,蒽贝素联合紫杉醇对肺癌的生长抑制作用显著强于其他组(P<0.01)。结论蒽贝素能够联合紫杉醇有效抑制A549细胞的增殖及荷瘤裸鼠肿瘤的生长,是一种潜在的肺癌治疗方法。
- 张春辉孙平
- 关键词：紫杉醇肺癌
- 人鼻咽癌干细胞微球体培养并鉴定其生物特性被引量：4
- 2014年
- 目的目前分离和鉴定鼻咽癌干细胞的方法仍不成熟。探索鼻咽癌细胞系干细胞微球体培养方法,并对CNE-2细胞微球体是否具有肿瘤干细胞生物特性(干性)进行鉴定。方法人鼻咽癌细胞CNE2、C666-1细胞在含生长因子的无血清培养基(serum-free medium,SFM)中悬浮培养。流式细胞术、Transwell小室实验、裸鼠成瘤实验、分别检测CNE2贴壁细胞(CNE2 monolayer,CNE2-MN)及CNE2微球体细胞(CNE2 sphere cells,CNE2-SC)CD133+标记细胞比例,体外侵袭能力、体内成瘤能力;CNE2-SC在含血清培养基中贴壁培养观察其分化能力;实时荧光定量PCR分析CNE2-MN及CNE2-SC相关干性基因Bmi-1、Oct4、Twist1RNA的表达。结果 2种细胞系均能在特殊配制的SFM中形成可以稳定传代的微球体,SFM新鲜配制、用细胞分离剂Accutase替代胰酶传代以及保持细胞的悬浮状态均有利于微球体的形成和增殖;在含血清培养基中培养能贴壁分化成CNE2-MN而无明显差异;CNE2-SC中CD133+细胞比例(98.79%)显著高于CNE2-MN(0.98%),差异有统计学意义(P<0.01);与CNE2-MN相比,CNE2-SC高表达干细胞相关基因Bmi-1、Oct4、Twist1及EMT标志物N-cadherin、Vimentin。Transwell小室实验示CNE2-SC与CNE2-MN的穿膜细胞数分别为(122±6)个/视野及(36±7)个/视野(P<0.05);裸鼠成瘤实验示1×104个CNE2-SC 3周内即能成瘤,成瘤率33.3%,而CNE2-MN不能成瘤,1×105个CNE2-SC与CNE2-MN成瘤体积比为(1.750±0.613)cm3vs(0.457±0.291)cm3(P<0.05),而1×106个以上2种细胞成瘤体积比为(2.332±0.549)cm3vs(0.669±0.278)cm3(P<0.01)。结论利用特制SFM悬浮培养法可得到鼻咽癌CNE2-SC,这种微球体富集了肿瘤干细胞,将为后续鼻咽癌干细胞研究打下基础。
- 李亚军郭颖吴顺龙甘生敏陆松梅李少林
- 关键词：鼻咽癌肿瘤干细胞微球体无血清培养基
