国家自然科学基金(81171366) 作品数:19 被引量:41 H指数:4 相关作者: 文明 吴晓凤 邓小林 葛晓东 李易 更多>> 相关机构: 重庆医科大学附属第一医院 第三军医大学 重庆医科大学附属第二医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家临床重点专科建设项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
葡聚糖修饰的超顺磁性氧化铁纳米颗粒最佳工艺条件确定及质量评价 被引量:1 2015年 目的 确定葡聚糖修饰的SPIO纳米颗粒最佳工艺条件并对其质量进行评价.方法 利用影响SPIO纳米颗粒粒径的4因素(溶液pH值、葡聚糖浓度、反应温度、搅拌速度)3水平正交实验设计,得出SPIO纳米颗粒的最佳制备工艺条件,并在该条件下制备SPIO纳米颗粒样品,分别用透射电镜、粒度分析仪对其进行形貌观察及粒径检测,用原子吸收光谱仪测定其铁含量,红外光谱仪分析表征,X射线粉末衍射法进行成分鉴定,振动样品磁强计测定磁学参数,并用其标记SKOV3卵巢癌细胞,验证其磁学性质.结果 制备葡聚糖修饰SPIO纳米颗粒的最佳工艺条件为:葡聚糖浓度10mg/ml,反应溶液pH值10,反应温度80℃,搅拌速度600 r/min.制备的SPIO纳米颗粒呈球形,分布较均匀,大小较一致,平均粒径7.0 nm,铁含量(12.36±0.08) g/L;红外光谱分析示样品外成功包裹葡聚糖,样品成分为Fe3O4,有超顺磁性;可进入待标记细胞,并使细胞带有磁性.结论 最佳工艺条件下制备的葡聚糖修饰SPIO纳米颗粒性质稳定、粒径较小、分散性较好,能顺利进入待标记细胞并使细胞具有一定磁性,为后续研究奠定了良好基础. 李易 孙红武 文曦琳 欧阳羽 文明 李少林关键词:超顺磁性氧化铁 右旋糖酐类 DTI直方图在预测较低级别胶质瘤ATRX基因突变中的价值 被引量:2 2023年 目的:探讨磁共振扩散张量成像(DTI)直方图分析在预测较低级别胶质瘤ATRX基因突变中的价值。方法:收集2017年1月—2022年2月在我院经手术病理证实的99例较低级别胶质瘤(WHOⅡ/Ⅲ级胶质瘤)患者的病理及影像资科,将其分为ATRX基因未突变(ATRX+)组和突变(ATRX-)组,其中ATRX+组53例,ATRX-组46例。回顾术前DTI图像,以DICOM格式进行预处理,描绘覆盖肿瘤全体及瘤周水肿的感兴趣区(ROI),自动提取平均弥散系数(ADC)、各向异性分数(FA)的多个直方图参数,比较两组参数的差异。基于二元Logistic回归建立LG模型,并采用受试者工作特征(ROC)曲线进一步评价各个参数及LG模型对ATRX基因状态的诊断价值。结果:ATRX-组较低级别胶质瘤的ADC-Min、ADC-5th、ADC-10th小于ATRX+组,而FA-Max、FA-Stdev、FA-Variance、FA-Skewness、FA-90th、FA-95th均大于ATRX+组,差异有统计学意义(P<0.05),余参数的差异均无统计学意义(P>0.05)。其中FA-Max的曲线下面积(AUC)最大(0.792),诊断效能最高,当阈值为2.948时,其预测ATRX基因突变的敏感度为93.50%,特异性为58.50%。ROC曲线显示联合参数构建的LG模型比其他单一参数具有更好的预测价值,其AUC为0.875,敏感度为89.1%,特异性为81.1%。结论:基于肿瘤全域的DTI直方图可以为临床无创性预测较低级别胶质瘤ATRX基因突变提供有价值的信息。 李欣益 张新宇 高珏妮 郑韵琳 文明关键词:神经胶质瘤 CT在外突性子宫肌瘤与卵巢性索间质肿瘤的鉴别诊断价值 被引量:4 2020年 目的:探讨CT对外突性子宫肌瘤与卵巢性索间质肿瘤的鉴别诊断价值。方法:回顾性分析2015年1月~2019年2月重庆医科大学附属第一医院收治的外突性子宫肌瘤(n=43)和卵巢性索间质肿瘤(n=36)患者资料。分析CT平扫及增强图像,将数据传输至ADW4.5工作站完成多平面重建、最大密度投影和容积再重建等CT后处理重建。观察并记录肿瘤与输尿管位置、肿瘤供血动脉、卵巢静脉与肿瘤关系、肿瘤强化程度及方式、有无腹水。以病理结果为金标准,计算CT诊断准确率。结果:外突性子宫肌瘤位于输尿管前或内前方,主要由子宫动脉供血,分支多且于瘤体内呈较均匀分布,肌瘤实性部分呈漩涡样中度或明显强化改变,追踪卵巢静脉可见正常卵巢组织,不易合并腹水;卵巢性索间质肿瘤位于输尿管前或内前方,主要由卵巢动脉供血,分支少且于肿瘤实质内呈较均匀分布,静脉期见卵巢血管蒂征,肿瘤实性部分呈无或轻度强化改变,追踪卵巢静脉不能显示正常卵巢组织,常合并腹水,可见卵巢血管蒂征。以病理结果为金标准,术前CT诊断外突性子宫肌瘤准确率为93.03%,术前CT诊断卵巢性索间质肿瘤准确率为80.56%。结论:根据CT特点并结合临床表现可较好地对外突性子宫肌瘤与卵巢性索间质肿瘤做出鉴别诊断,值得临床推广应用。 何重阳 文明关键词:卵巢性索间质肿瘤 电子计算机断层扫描 卵巢癌特异性MR分子探针的制备 被引量:3 2014年 目的制备针对卵巢癌的特异性磁共振(magnetic resonance,MR)分子探针,并评价其体外转染SKOV3细胞的可行性。方法琼脂糖凝胶阻滞实验确定探针中的多聚赖氨酸修饰的超顺磁性氧化铁(SPIO-PLL)及质粒p Genesil1-shRNA的最佳质量比,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达以检测探针是否进入细胞;透射电子显微镜观察探针中铁在细胞中的部位;CCK-8法检测探针的细胞毒性;MR扫描检测探针转染后细胞的T2*信号强度改变。结果当SPIO-PLL和质粒的质量比达6∶1时,二者有效结合;探针体外转染细胞后,可观察到绿色荧光蛋白表达,检测到铁颗粒存在于胞质内;在探针浓度低于50 mg/L的范围内,细胞存活率高于80%;探针转染后细胞的T2*信号强度明显降低(P<0.01)。结论成功制备卵巢癌特异分子探针,在体外成功转染卵巢癌SKOV3细胞,对细胞毒性小,可被MR扫描敏感检测。 文曦琳 李易 葛晓东 李妹玲 文明 李少林关键词:卵巢癌 超顺磁性氧化铁 分子探针 表观扩散系数直方图鉴别弥漫性较低级别脑胶质瘤分子亚型的价值 被引量:6 2020年 目的研究基于肿瘤全域的表观扩散系数(ADC)信号灰度直方图鉴别弥漫性较低级别胶质瘤分子亚型的价值。方法回顾经手术及病理证实为WHOⅡ、Ⅲ级胶质瘤,术前接受过头颅磁共振成像平扫、增强及扩散加权成像检查的55例患者的病理及影像学资料。先将其分为异柠檬酸脱氢酶(IDH)突变(IDHmut)组和IDH野生(IDHwt)组,再将IDHmut组分为IDH突变伴1p19q联合缺失(IDHmut1p19qdel)组和IDH突变不伴1p19q联合缺失(IDH^mut1p19q^int)组。其中IDHwt组14例、IDH^mut1p19q^int组19例、IDHmut1p19qdel组22例。记录不同分子亚型组的ADC直方图参数,包括平均值、最小值、ADC5%、ADC10%、ADC25%、ADC50%、ADC75%、ADC90%、ADC95%、最大值、众数、峰度、偏度、标准差、不均一性、极差、熵值,并采用独立样本t检验(正态分布)或Mann-Whitney U检验(偏态分布)比较。采用受试者工作特征曲线(ROC)评价ADC直方图参数鉴别诊断WHOⅡ、Ⅲ级胶质瘤不同分子亚型的效能。结果IDHmut组的ADC75%(P=0.021)、ADC90%(P=0.015)、ADC95%(P=0.014)、最大值(P=0.035)、标准差(P=0.001)、不均一性(P=0.001)和极差(P=0.009)均低于IDHwt组,而最小值(P=0.031)和峰度(P=0.020)则高于IDHwt组,差异有统计学意义。IDHmut1p19qdel组的平均值(P=0.010)、ADC5%(P=0.016)、ADC10%(P=0.012)、ADC25%(P=0.007)、ADC50%(P=0.005)、ADC75%(P=0.015)及众数(P=0.002)均低于IDH^mut1p19q^int组。不均一性鉴别IDHwt组和IDHmut组的效能优于其他参数,ROC曲线下面积为0.811,以0.229为截断值鉴别二者的敏感度和特异度分别为85.7%和73.2%;众数鉴别IDHmut1p19qdel组和IDH^mut1p19q^int组的效能高于其他参数,ROC曲线下面积为0.744,以1448.75×10-6 mm2/s为截断值鉴别二者的灵敏度和特异度分别为57.9%和90.9%。结论基于肿瘤全域感兴趣区的ADC信号强度直方图可以为弥漫性较低级别胶质瘤分子亚型的鉴别提供更多信息。 刘丹 徐婧梅 廖鸿帆 文明关键词:胶质瘤 扩散加权成像 直方图 SPIO-shRNA双功能分子探针药动学及活体MR成像研究 被引量:5 2015年 本研究探讨SPIO-sh RNA双功能分子探针在活体内的药代动力学特征及磁共振(magnetic resonance,MR)成像无创评估其主要脏器分布。将18只新西兰大白兔随机分为3组,分别注射不同剂量的分子探针,于注射前30 min及注射后不同时间点采血,测量铁含量以分析探针药代动力学。24只昆明(KM)小鼠随机分为4组,以每只小鼠尾静脉注射200μL生理盐水为对照组,另3组分别注射不同剂量的分子探针,于注射后24 h行MRI扫描,扫描结束后立即取肝、脾、肾、脑及肌肉,制作切片行普鲁士蓝染色,观察探针在体内主要脏器组织的分布情况。结果显示,本探针的药代动力学符合二室模型,半衰期超过3 h;MRI显示探针在正常小鼠体内主要分布于肝脏与脾脏,肝脾MRI信号随着探针剂量的增加而降低(均P<0.05),组织切片普鲁士蓝染色证实了MRI检查结果,同时显示探针绝大部分能够逃避单核吞噬细胞系统的吞噬。本研究明确了SPIO-sh RNA分子探针在动物体内的药代动力学及主要脏器分布,为进一步的肿瘤活体成像时间及剂量的选择提供了重要参考价值。 邓小林 葛晓东 吴晓凤 李妹玲 廖蕤堃 曾丹妮 文明关键词:分子探针 超顺磁性氧化铁 SPIO-PLL-pshRNA分子探针转染卵巢癌SKOV3细胞及MR成像研究 被引量:9 2014年 目的:利用多聚赖氨酸修饰的超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide modified with Poly-L-lysine,SPIO-PLL)及质粒pGenesil1-shRNA构建SPIO-PLL-pshRNA分子探针,并初步评价其体外转染卵巢癌细胞SKOV3及MR成像的可行性。方法:利用静电吸附法连接SPIO-PLL和质粒pGenesil1-shRNA,微量分光光度计检测复合物离心后上清液中质粒DNA浓度,评测SPIO-PLL与质粒的结合能力;凝胶阻滞实验及zeta电位测定验证两者结合;通过普鲁士蓝染色法观察铁的入胞情况及荧光显微镜观察绿色荧光蛋白在细胞中的表达来检测复合物的细胞转染能力;MR扫描观察细胞转染后信号改变。结果:DNA结合实验、凝胶阻滞实验结果显示当SPIO-PLL和质粒质量比达6∶1时,二者可有效结合;激光粒度仪测定SPIO、SPIO-PLL、SPIOPLL-pshRNA 3组样品的zeta电位分别为(-14.8±0.35)、(15.2±0.55)、(3.6±0.35)mV,3组结果差异有统计学意义(F=6323.782,P=0.000;LSD-t:均P=0.000);所制备的SPIO-PLL-pshRNA分子探针体外转染细胞后,用普鲁士蓝染色法可检测到细胞内有铁颗粒分布,荧光显微镜观察到绿色荧光蛋白表达,MR扫描结果示无探针转染组及10、20、40μg/ml 3种浓度探针转染组的T2*信号强度值分别为(558±19)、(427±16)、(283±19)、(191±8),琼脂糖组及蒸馏水组分别为(600±36)、(670±16),随着探针浓度升高,信号强度降低,各组结果差异有统计学意义(F=279.667,P=0.000;SNK-q:均P<0.05)。结论:SPIO-PLL纳米粒可有效结合质粒pGenesil1-shRNA,制得SPIO-PLL-pshRNA分子探针,该探针于体外成功转染卵巢癌SKOV3细胞,并于MR扫描下T2*WI信号强度降低。 文曦琳 李易 葛晓东 李妹玲 邓小林 吴晓凤 文明关键词:超顺磁性氧化铁 多聚赖氨酸 分子探针 外加磁场对SPIO-shRNA分子探针用于活体荷瘤裸鼠卵巢癌肿瘤MR成像的影响 被引量:2 2018年 目的:探讨外加磁场对SPIO-sh RNA分子探针用于活体荷瘤裸鼠卵巢癌肿瘤MR成像的影响。方法:设定探针注射浓度为含铁18 mg/kg,扫描时间为探针注射后27 h;将30只BALB/c荷瘤裸鼠随机分为3组,即磁转染组(实验组),探针转染组(阴性对照组),荷瘤裸鼠组(空白对照组),每组样本量分别为10只荷瘤裸鼠,并在扫描前对磁转染组行外加磁场处理。采用磁共振MR扫描检测裸鼠体内肿瘤组织及邻近肌肉组织信号强度变化;每次检查完成后立即处死裸鼠,取出肿瘤组织及肌肉组织行HE、普鲁士蓝染色,并在光学显微镜下观察。结果:T1WI序列各组间肿瘤组织信号强度差异不具有统计学意义(F=2.623,P=0.091),各组间肌肉组织信号强度差异不具有统计学意义(F=0.434,P=0.652);T2WI及T2*序列磁转染组及探针转染组肿瘤组织信号强度较荷瘤裸鼠组减低,差异具有统计学意义(P=0.000),且磁转染组较探针转染组差异更显著,差异具有统计学意义(P=0.000);而T2*序列磁转染组肌肉组织信号强度较其余组信号减低,差异具有统计学意义(P=0.000);HE染色显示各组肿瘤组织结构紊乱,细胞核异型性增多;普鲁士蓝染色表明在磁转染组和探针转染组中均存在蓝染铁颗粒,且磁转染组蓝染颗粒更为丰富。结论:外加磁场能够诱导SPIO-sh RNA分子探针靶向作用于卵巢癌肿瘤组织并提高肿瘤组织摄取的有效浓度。 廖蕤堃 曾丹妮 Sagar Thapa 文明关键词:超顺磁性氧化铁 分子探针 MR成像 外加磁场 MR成像活体示踪SPIO-shRNA分子探针的生物分布 被引量:1 2016年 目的探讨磁共振成像(MR成像)能否示踪超顺磁性氧化铁(superparamagnetic iron oxide,SPIO)-shRNA分子探针在活体动物主要脏器的生物分布。方法 6只新西兰大白兔,注射SPIO-shRNA分子探针(含铁量为9.6mg/kg),原子吸收光谱法(atomic absorption spectrometry,AAS)测量注射前30 min及注射后1 min、3min、5min、10min、15min、30min、1h、2h、3h、6h、12h、24h的血浆铁质量浓度以分析其药代动力学。6只昆明(KM)小鼠于尾静脉注射含铁量为4.8mg/kg的SPIO-shRNA分子探针,MR成像活体示踪探针在小鼠体内主要脏器的生物分布。96只KM小鼠于未给药及给药后1d、3d、5d、7d、9d、11d、14d,取肝、脾、肾、脑及肌肉组织,AAS测定各脏器组织探针铁含量,同时行普鲁士蓝染色并与MR结果对照分析。结果本探针的药代动力学符合二室模型,半衰期为(3.692±0.196)h。MR显示探针在正常小鼠体内主要分布于肝脏与脾脏,代谢缓慢,于2周左右完全从肝、脾代谢清除;AAS对脏器探针铁含量的测定与普鲁士蓝染色证实了MR成像结果。结论本研究明确了MR成像可用于活体示踪SPIO-shRNA分子探针在动物体内主要脏器的生物分布,为进一步利用MR无创监测探针在动物体内的治疗作用提供了依据。 邓小林 吴晓凤 廖蕤堃 曾丹妮 文明 李少林关键词:分子探针 超顺磁性氧化铁 生物分布 外加磁场对SPIO-shRNA分子探针转染卵巢癌SKOV3细胞的影响 被引量:2 2015年 目的探讨外加磁场对SPIO-shRNA分子探针转染人卵巢癌SKOV3细胞的影响。方法设定质量浓度为45 mg/L的SPIO-shRNA分子探针转染人卵巢癌SKOV3细胞,并将SKOV3细胞分为3组:未转染的细胞组(空白对照组),SPIO-shRNA分子探针转染的细胞组(阴性对照组),培养皿底部外加磁场的SPIO-shRNA分子探针转染的细胞组(实验组)。采用流式细胞术检测细胞转染率,CCK-8法检测细胞增殖及活性,Western blot法检测细胞表皮生长因子受体(EGFR)蛋白水平,荧光定量PCR检测EGFR mRNA水平,磁共振(MR)扫描检测细胞内信号强度变化。结果与阴性对照组比较,实验组的细胞转染率[(79.20±3.31)%]显著增加(P=0.001);实验组的细胞活性(P=0.011)、EGFR蛋白及mRNA表达量均明显降低(P均<0.05);实验组的MR图像信号强度明显降低(P=0.0004)。结论外加磁场可以诱导SPIO-shRNA分子探针进入卵巢癌SKOV3细胞,从而提高细胞的转染率。 葛晓东 李妹玲 邓小林 吴晓凤 曾丹妮 廖蕤堃 文明 李少林关键词:分子探针 SKOV3细胞 转染