广东省自然科学基金(06301387)
- 作品数：6 被引量：52H指数：4
- 相关作者：刘爱军杜标炎靳俊峰黄锦桃李海标更多>>
- 相关机构：广州中医药大学中山大学遵义医学院更多>>
- 发文基金：广东省自然科学基金广东省中医药管理局基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- MSCs构建的类真皮对ES细胞源性表皮干细胞分化潜势的影响
- 2007年
- 目的探讨以MSCs构建类真皮对ES细胞源性表皮干细胞分化潜能的影响。方法大鼠骨髓MSCs与复合凝胶-明胶海绵组成类真皮,Hoechst33342标记E14-ES细胞,经羊膜诱导4 d后,形成表皮干细胞克隆,将二者构成皮肤类似物,埋植于129小鼠皮下。术后2、4、6和8周取材,做HE染色,β1整合素、CK15、CK19、CEA、CK18免疫荧光双标和免疫组化观察。结果术后2和4周,植块中以形成单层立方或柱状上皮构成的管状和泡状结构为主,6和8周后,可见角化复层上皮、毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构,皮脂腺样结构多见。免疫双标结果显示,植入2和4周,带有蓝色核标记的细胞形成的管状或泡状结构,呈β1整合素、CK15、CK19、CEA和CK18阳性,6和8周后,HE染色汗腺样结构呈CEA、CK18阳性。结论ES细胞源性表皮干细胞与骨髓MSCs构建的类真皮,在同种小鼠皮下可分化出角化复层上皮、汗腺样、毛囊样、皮脂腺样等结构。
- 刘爱军黄锦桃李海标
- 关键词：ES细胞表皮干细胞定向分化
- 乳没生肌散对组织工程皮肤修复皮肤缺损的研究被引量：8
- 2009年
- 目的研究乳没生肌散对组织工程皮肤修复皮肤缺损创面的促进作用。方法将人成纤维细胞种植入胶原海绵,人角质形成细胞种植在表层,构建组织工程皮肤,并移植入裸鼠皮肤缺损创面。移植后2d,将SPF级裸鼠随机分为实验组和模型对照组,每组4只。实验组选用乳没生肌散对创面进行外敷治疗,隔日换药;模型对照组创面不用药物治疗,隔日涂以生理盐水。组织工程皮肤移植后9d取材,取移植处组织行冰冻切片,HE染色,观察创面局部表皮厚度及真皮中毛细血管增生情况,免疫荧光双标检测真皮层中Ln、Ⅰ型胶原的表达。结果组织工程皮肤移植后9d,实验组与模型对照组相比,创面移植处表皮增厚,真皮中毛细血管增生较多,Ln、Ⅰ型胶原的的分泌增强。结论乳没生肌散具有促进组织工程皮肤修复皮肤创面的作用。
- 刘爱军靳俊峰黄粤杜标炎
- 关键词：组织工程皮肤皮肤缺损
- ES细胞源性表皮干细胞与类真皮构成皮肤类似物的分化被引量：5
- 2007年
- 【目的】以ES细胞源性表皮干细胞为种子细胞构建皮肤类似物,探讨其在皮下的分化潜能。【方法】Hoechst33342标记E14-ES细胞,经羊膜诱导4d后,形成表皮干细胞克隆,并以其作为种子细胞,取129胎鼠成纤维细胞与复合凝胶-明胶海绵复合,形成皮肤类似物,埋植于129小鼠皮下组织。术后2周、4周、6周、8周取材,做HE染色观察,β1整合素、CK15、CK19、CEA、CK18免疫组化荧光双标和免疫组化观察。【结果】术后2周和4周,植块内可见单层立方或柱状上皮构成的管状和泡状结构,6周和8周后,可见角化复层上皮、毛囊样、汗腺样、皮脂腺样等结构,免疫双标结果显示,植入2周和4周,带有蓝色核标记的细胞形成的管状或泡状结构呈β1整合素、CK15、CK19、CEA和CK18阳性,6周和8周后,HE染色中汗腺样结构呈CEA、CK18阳性。【结论】ES细胞源性表皮干细胞与类真皮构建的皮肤类似物,在同种小鼠皮下有分为角化复层上皮、汗腺样、毛囊样、皮脂腺样等结构的潜能。
- 刘爱军黄锦桃李海标
- 关键词：ES细胞表皮干细胞定向分化羊膜
- 生肌中药对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的:探讨乳没生肌散、龙血竭对组织工程皮肤移植后VEGF表达的影响。方法:利用人成纤维细胞、角质形成细胞构建组织工程皮肤,并植入裸鼠皮肤缺损创面,实验动物随机分为乳没生肌散外敷组、龙血竭外敷组、龙血竭内服组、龙血竭外敷并内服组5组,并以不用药组为对照组。术后9d取材,冰冻切片,行HE染色,免疫荧光双标检测VEGF的表达。结果:术后9d,各组创面愈合,表皮层较厚,真皮层致密,生肌中药治疗后毛细血管增生明显,VEGF阳性表达增强,龙血竭外敷并内服组表达最强。结论:生肌中药能促进组织工程皮肤移植后VEGF的表达,有利于再血管化。
- 靳俊峰刘爱军杜标炎
- 关键词：组织工程皮肤龙血竭
- 人皮肤成纤维细胞的高效分离培养及鉴定被引量：12
- 2008年
- 目的建立高效的人皮肤成纤维细胞的原代培养和体外连续培养体系,为组织工程皮肤真皮的构建提供充足的种子细胞。方法取临床无菌切除的幼儿包皮,利用Ⅱ型胶原酶分离表皮和真皮,再用胰蛋白酶消化,剪碎真皮,接种于培养瓶,加少许含10%胎牛血清的高糖-DMEM培养液进行培养,次日补加培养液。原代长满后,进行传代,并对所培养的细胞进行形态学观察及免疫荧光鉴定。结果接种次日倒置镜下可见有长梭形细胞迁出、生长,3～4d进行传代,传代后3d长满,可长期传代。细胞免疫荧光检测,Vimentin表达阳性。结论该方法可快速高效获得构建组织观察皮肤真皮所需的成纤维细胞。
- 刘爱军靳俊峰
- 关键词：组织工程皮肤成纤维细胞细胞培养免疫荧光
- 龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤缺损的作用被引量：25
- 2009年
- 【目的】观察龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤缺损创面的促进作用。【方法】将人成纤维细胞种植入胶原海绵,人角质形成细胞种植在表层,构建组织工程皮肤,并移植入裸鼠皮肤缺损创面;实验动物随机分为4组,选用"活血圣药"龙血竭于移植后2d分别进行创面外敷、单纯口服、创面外敷+口服治疗,并设空白对照组。组织工程皮肤移植后9d取材检测,观察创面局部表皮厚度、真皮层中层粘连蛋白(Ln)、Ⅰ型胶原蛋白的表达及毛细血管增生情况。【结果】龙血竭能促进组织工程皮肤移植后表皮的发育及真皮层中毛细血管的增生,增强Ln、Ⅰ型胶原蛋白的分泌,龙血竭外敷+口服组效果最佳。【结论】龙血竭对组织工程皮肤修复皮肤创面有促进作用。
- 刘爱军朱永红赵钟祥张立群杜标炎邝枣园李彩霞易华
- 关键词：皮肤移植细胞培养
