深圳市科技计划项目(201203089)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- 发文基金：深圳市科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 布比卡因致高糖培养SH-SY5Y细胞内质网应激增强与活性氧簇增多及凋亡增加被引量：3
- 2014年
- 目的将布比卡因作用于高糖培养的SH-SY5Y细胞，观测其对细胞内活性氧簇（reactiveoxygenspecies，ROS）及细胞凋亡的影响。方法不同浓度葡萄糖培养基培养SH-SY5Y细胞，经1mmol／L布比卡因作用6h。采用流式细胞仪检测细胞内ROS产量及细胞凋亡情况、MTT法检测细胞存活率、Westernblot技术检测细胞内GRP78相关蛋白的变化。结果葡萄糖浓度为5．6、6．1、7．0mmol／L的3组间ROS含量差异无统计学意义（P〉0．05）；葡萄糖浓度为7．8、11．1、13.3mmol／L时ROS产量分别高于5．6、6．1、7．0mmol／L组（P〈0．05）。各组细胞存活率（％）依次为（4．29±0．20）、（3．30±0．19）、（6．31±0．14）、（7．89±0．09）、（2．81±0．12、（1．01±0．11，组间差异均具有统计学意义（砌．05）。各组细胞凋亡率（％）依次为（1．80±0．09）、（2．82±0．11）、（3．30±0．21）、（4．31±0．18）、（6．28±0．13）、（7．89±0．08），组间差异均具有统计学意义（P〈0.05）。Grp78表达结果为5．6mmol／L组和6．1mmoUL组分别为（1．02±0．12）和（0．97±0．06），均高于7．0mmol／L组（0．39±0．04）；7．8mmol]L组（0．98±0．06）高于7．0mmol／L组（0．39±0．04）；11．1mmol／L与13．3mmo]／L组低于其他各组，差异均具有统计学意义（P〈0．05）；5．6mmol／L组、6．1mmol／L组和7．8mmo]／L组相比，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论细胞内ROS增多及细胞凋亡增加可能与布比卡因增强高糖培养的SH-SY5Y细胞内质网应激有关，引起细胞内ROS爆发，从而导致细胞损伤和凋亡；而Grp78功能减弱进一步增强细胞内质网应激。
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词：SH-SY5Y细胞活性氧簇
- Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装及鉴定
- 2014年
- 目的探讨Grp78基因过表达慢病毒载体的构建、包装和滴度检测。方法采用慢病毒载体,运用基因工程技术,获取目的基因片段并构建重组质粒,然后制备感受态细胞并转化,将重组质粒导入感受态细胞;用PCR技术鉴定阳性克隆和进行DNA序列分析及对慢病毒包装和滴度检测。结果阳性克隆测序比对结果说明测通。熔解曲线中既没出现杂峰也没出现主峰的异常增宽,表明实验中未出现污染、引物二聚体和非特异性扩增。结论 Grp78基因过表达慢病毒载体构建和包装成功。
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词：慢病毒载体基因工程
- 布比卡因对高糖培养SH-SY5Y细胞毒性研究被引量：1
- 2015年
- 目的布比卡因作用高糖培养的SH-SY5Y细胞,观测细胞内活性氧(ROS)及凋亡影响。方法 1mmol/L布比卡因作用不同浓度葡萄糖培养基培养的SH-SY5Y细胞6h,检测细胞内ROS、GRP78水平变化及凋亡情况。结果葡萄糖浓度为7.80、11.10、13.30mmol/L组ROS产量均高于5.56、6.10、7.00mmol/L组(P<0.05)。细胞凋亡率组间差异均有统计学意义(P<0.05)。GRP78表达结果为5.56mmol/L组(1.02±0.12)、6.10mmol/L组(0.97±0.06),7.80mmol/L组(0.49±0.04),高于7.00mmol/L组(0.46±0.06);11.10mmol/L组(0.22±0.03)与13.30mmol/L组(0.15±0.07)低于其他各组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论细胞内ROS增多及凋亡增加与布比卡因增强细胞内质网应激(ERS)有关。GRP78功能减弱进一步增强细胞ERS。
- 李亚文徐世元张庆国李乐赖露颖郑艇苏娇玲杨耐梅李元涛
- 关键词：SH-SY5Y细胞
