山西省回国留学人员科研经费资助项目(201007)
- 作品数:2 被引量:2H指数:1
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- 假单胞菌YZ-26来源环酰亚胺水解酶中半胱氨酸残基的反应性及功能
- 2011年
- 【目的】研究环酰亚胺水解酶(Imidase,CIH)中的两个半胱氨酸残基的反应性及功能。【方法】设计了3个半胱氨酸突变酶:CIH7,108、CIH7、CIH108。将天然酶以及突变酶基因分别与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行融合表达,融合蛋白经纯化后得到了电泳纯的样品。使用5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)对天然酶CIH的巯基基团进行修饰,并分析了DTT对分子状态的影响。进一步研究了经H2O2处理后CIH及其突变酶的锌离子结合能力及分子状态。【结果】酶活测定表明CIH7,108和CIH7的活力基本丧失,而CIH108仍保持了72%的酶活性。CIH中的两个半胱氨酸残基以游离形式存在,不形成链内或链间二硫键。CIH与CIH108为四聚体结构且具有一定的锌离子结合能力,CIH7,108为多聚体,CIH7为单体及多体的混合物且都不具备锌离子结合能力,随着H2O2浓度的增加,CIH中的链内二硫键及CIH108中的链间二硫键逐渐增加。【结论】说明Cys7是结合锌离子和稳定CIH分子结构的必要残基。
- 钮利喜刘晓琴石亚伟
- 关键词:半胱氨酸反应性
- 以丙氨酸消旋酶为靶标的中药抗菌成分的初步筛选被引量:2
- 2013年
- 目的从89种具有抗菌、消炎作用的药材中筛选能够抑制丙氨酸消旋酶活性的中药。方法利用旋光仪测定丙氨酸消旋酶在有无中药材浸出物情况下酶活性,从而对89种中药进行初步筛选。结果 89种中药中有25种能够不同程度地抑制丙氨酸消旋酶活性,其中6种具有明显的抑制作用(抑制率大于35%)。结论虎杖、黄芩、麻黄、吴茱萸、栀子、鸡屎藤6种中药能明显抑制丙氨酸消旋酶活性。
- 王敏兰石亚伟
- 关键词:中草药抗菌抑制剂