首都医学发展科研基金(2005-3086)
- 作品数：9 被引量：16H指数：3
- 相关作者：肖文华萨仁高娃吴岩李秋文耿排力更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院第一附属医院内蒙古医学院青海大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 卵巢癌腹水来源exosomes的免疫分子检测被引量：1
- 2010年
- 目的通过检测卵巢癌腹水中exosomes免疫相关分子的表达,探讨以exosomes为基础的肿瘤免疫治疗的可行性。方法采用离心超滤联合蔗糖密度梯度离心法分离出4例恶性腹水中的exosomes,经透射电镜观察其超微结构。通过免疫胶体金技术和Western杂交技术鉴定和确定exosomes的HSP70、HLA-Ⅰ、HLA-Ⅱ、NY-ESO-1、MAGE-A1及MAGE-C2等抗原分子表达。结果卵巢癌患者恶性腹水中exosomes为直径30～80nm的膜性囊泡结构,圆形或椭圆形,腔内为低电子密度成分;经上述相应抗原的抗体-胶体金免疫电镜标记,囊外膜及腔内可见颗粒状电子致密物沉积。Western杂交也证实上述抗原的存在,但在4例卵巢癌恶性腹水来源的exosomes中,各类免疫相关分子的表达谱或表达量是不同的。结论卵巢癌腹水来源的exosomes富含各类肿瘤抗原、HSP70、HLA-Ⅰ和HLA-Ⅱ等免疫相关分子,并且在不同的卵巢个体存在明显的异质性,通过对腹水中exosomes免疫相关分子检测,有可能为以exosomes为基础的肿瘤免疫治疗提供帮助。
- 李秋文肖文华宋林萍萨仁高娃朱建华康欢荣
- 关键词：卵巢癌恶性腹水EXOSOMES透射电镜BLOT
- exosomes:肿瘤免疫治疗的新进展被引量：2
- 2012年
- exosomes是一类起源于内吞体系统并被排出于细胞外，直径在40～100nm之间的双层膜性囊泡。exosomes可以由包括树突状细胞、肿瘤细胞等在内的多种细胞分泌口。最早在1981年由Trams等。
- 董伟伟肖文华
- 关键词：EXOSOMES肿瘤免疫治疗树突状细胞细胞分泌肿瘤细胞细胞外
- 外体(exosome)在肿瘤免疫治疗中的应用被引量：1
- 2009年
- 外体(exosome)是由细胞分泌至细胞外的膜性小囊泡。研究发现,来源于树突状细胞和来源于肿瘤细胞的外体富集MHCⅠ/Ⅱ类分子、协同刺激分子、热激蛋白70和90等多种活性分子和肿瘤抗原,在体内外免疫调节中起关键作用,以外体为基础的肿瘤免疫治疗已成为热点。我们简要介绍外体的特征、分离制备和临床应用研究。
- 李秋文肖文华
- 关键词：肿瘤免疫治疗
- 5-脱氧杂氮胞苷修饰的肝癌细胞来源胞外体对淋巴细胞增殖功能的影响
- 2011年
- 目的研究经5-脱氧杂氮胞苷(5-Aza-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理的肝癌细胞HepG2分泌的胞外体(exosomes)对免疫细胞增殖能力的影响。方法采用离心超滤等方法将经5-Aza-CdR处理和未处理过的肝癌细胞系HepG2细胞分泌的exosomes分离和纯化。Ficoll淋巴细胞分层液分离外周血单个核细胞(PMBC);将实验分为exosomes实验组(加药组)、exosomes对照组(未加药组)、加药exosomes提取后上清组、未加药exosomes提取后上清组、空白对照组。H3-TdR掺入法检测PBMC细胞增殖状况。结果 exosomes对照组及其上清液对淋巴细胞增殖功能有明显的抑制作用,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05);而exosomes及其上清液实验组对淋巴细胞增殖功能的影响明显减弱,与exosomes和上清液对照组比较存在显著的统计学差异(P<0.05),而与空白对照组无统计学上的差异(P>0.05)。结论经5-Aza-CdR修饰的exosomes及其上清液显著改善HepG2来源的exosomes对淋巴增殖功能的抑制作用。
- 张彩虹肖文华耿排力
- 关键词：EXOSOMES5-脱氧杂氮胞苷
- 5-脱氧杂氮胞苷对肝癌细胞分泌exosomes及其免疫相关分子的影响被引量：7
- 2009年
- 目的探讨5-脱氧杂氮胞苷（5-Aza—CdR）对肝癌细胞分泌exosomes及其负载的肿瘤相关抗原和免疫相关分子含量的影响。方法采用离心超滤联合蔗糖密度梯度离心方法，分离和纯化经5-Aza—CdR处理和未处理的HepG2和Hep3B肝癌细胞释放的exosomes，并对exosomes进行计数和蛋白定量测定。采用免疫电镜和Western blot技术，观察exosomes表达HSP70、HLA—I和NY—ESO-1蛋白的变化；以逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测5-Aza—CdR处理前后HepG2和Hep3B细胞野生型p53基因mRNA的表达。结果经5-Aza—CdR处理后，HepG2和Hep3B细胞p53基因mRNA表达较未处理组均明显增加，exosomes数量和蛋白含量均较未处理组显著增加（P〈0．05）。经免疫电镜和Western blot鉴定，exosomes上均附载有HSP70、HLA—I和NY—ESO—1蛋白，且两种细胞来源的exosomes经5-Aza—CdR处理后，HSP70、HLA—I和NY—ESO-1蛋白含量均明显增加。结论DNA甲基转移酶抑制剂5-Aza—CdR可使肝癌细胞分泌更多数量的exosomes，增加exosomes中的免疫相关分子含量，其机制可能与p53基因上调和DNA去甲基化有关。
- 萨仁高娃吴岩肖文华
- 关键词：肝肿瘤5-脱氧杂氮胞苷EXOSOMES
- 5-脱氧杂氮胞苷修饰肝癌细胞来源的exosomes对淋巴细胞增殖的影响
- 2010年
- exosomes是一些长30～100nm的膜性小囊泡，目前发现T细胞、B细胞、上皮细胞、树突状细胞以及肿瘤细胞等均可分泌exosomes；其中肿瘤细胞来源的exosornes在肿瘤免疫中可以起到抗原呈递作用，一直是肿瘤免疫治疗的热点，并被认为是生产肿瘤疫苗的最佳来源之一。然而，近年来研究发现，有些肿瘤细胞分泌的exosornes对免疫细胞的增殖具有抑制作用，给其用于肿瘤治疗带来新的问题。
- 张彩虹耿排力肖文华
- 关键词：EXOSOMES淋巴细胞增殖5-脱氧杂氮胞苷细胞来源肝癌修饰
- exosome与肿瘤免疫治疗的研究进展被引量：3
- 2008年
- 萨仁高娃吴岩肖文华
- 关键词：EXOSOME肿瘤免疫治疗网织红细胞抗原提呈细胞成熟红细胞
- 蔗糖密度梯度离心联合超滤技术分离恶性胸腹水来源的exosomes被引量：2
- 2008年
- 目的:对常规的蔗糖密度梯度离心方法进行改进,以获取高质量和高数量的exosomes。方法:采用常规的蔗糖密度梯度离心方法,再联合超滤技术分离恶性胸腹水来源的exosomes,经透射电镜观察其形态。结果:离心超滤方法只需超速离心1次,可显著减少超速离心次数,缩短分离操作时间,降低样品污染和损失,回收率高;所获exosomes在透射电镜下呈圆形或椭圆形膜性囊泡状结构,直径30～100nm,分散均匀。结论:蔗糖密度梯度离心法联合超滤技术提纯恶性胸腹水来源exosomes的方法简便、高效。
- 李秋文萨仁高娃李宏涛肖文华
- 关键词：超滤超速离心EXOSOMES透射电镜
- 肝癌细胞来源的exosomes提取方法的改进及电镜观察被引量：3
- 2008年
- 目的：分离提纯两种肝癌细胞HepG2细胞和Hep3B细胞来源的exosomes，并在透射电镜下观察exosomes的形态特征，为肿瘤免疫治疗寻找肿瘤新抗原提供实验材料。方法：采用离心超滤联合蔗糖密度梯度离心等方法分离出HepG2和Hep3B细胞释放exosomes，经透射电镜观察其超微结构。结果：HepG2和Hep3B细胞分泌释放的exosomes为直径50-100nm的膜性微囊结构，圆形或椭圆形，腔内为低电子密度成分。结论：离心超滤和蔗糖密度梯度离心法分离提纯exosomes方法是较为简便高效，对肿瘤细胞培养上清提纯exosomes而言具有可行性。
- 萨仁高娃吴岩肖文华
- 关键词：EXOSOMESHEPG2细胞HEP3B细胞透射电镜
