福建省省级财政专项(STIF-Y02)
- 作品数：12 被引量：50H指数：5
- 相关作者：程龙飞陈红梅施少华傅光华黄瑜更多>>
- 相关机构：福建省农业科学院福建出入境检验检疫局福建农林大学更多>>
- 发文基金：福建省省级财政专项福建省自然科学基金福建省科技计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- TGEV与PEDV核衣壳蛋白双价基因原核质粒的构建与表达被引量：2
- 2011年
- 运用DNA重组技术将猪传染性胃肠炎病毒核衣壳基因、猪流行性腹泻病毒核衣壳基因编码最大局部亲水性抗原决定簇基因片段进行串联,克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建预防仔猪冠状病毒性腹泻双价基因原核表达质粒。将该质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳结果显示,双价重组基因表达出约86.8 kD的融合蛋白。Western-blotting检测结果表明,该融合蛋白具有良好的反应原性。
- 王劭陈少莺朱小丽程晓霞林锋强陈仕龙李兆龙朱晓琳
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒猪流行性腹泻病毒核衣壳蛋白
- 鸭病毒性肝炎病毒NA株全基因序列测定及分析被引量：2
- 2010年
- 应用RT—PCR方法分段扩增DHV—NA株cDNA，并进行基因组全序列测定及同源性等分析。结果显示DHV—NA株基因组全长7692bp（不包括PolyA），5’和3’非编码区长度分别为626bp和316bp，有1个单一开放阅读框架（ORF，627～7376nt），编码2249个氨基酸；与Ⅰ型DHV（DHV—Ⅰ）参考株比较，其核苷酸和氨基酸同源性分别为94．3％～96．9％和97．8％～98．8％；与新型DHV（N—DHV）90D株比较，其核苷酸和氨基酸同源性分别为72．6％和82．3％。表明NA株与DHV—Ⅰ参考株遗传进化关系较密切，而与N—DHV遗传关系较远。
- 王劭陈少莺朱小丽程晓霞陈仕龙林锋强李兆龙
- 关键词：鸭肝炎病毒全基因组
- 鸭疫里氏杆菌敏感烈性噬菌体的分离鉴定被引量：10
- 2009年
- 为探索鸭疫里氏杆菌病的生物疗法,以富集法对健康番鸭的粪便进行了分离,获得1株鸭疫里氏杆菌敏感的烈性噬菌体,命名为RAP15。该噬菌体能裂解2株鸭疫里氏杆菌(RAf63和RAf71),说明噬菌谱较窄。透射电镜观察结果显示,该噬菌体由呈多面体的头部(直径约55 nm)和细长的尾部(长约200 nm)组成。RAP15的基因组可以被DNaseⅠ消化,但不能被RNase A和绿豆核酸酶消化,提示其核酸类型为双股DNA。形态学和分子特征提示,RAP15属于长尾病毒科。
- 程龙飞钟敏郑腾傅光华陈红梅施少华白泉阳黄瑜
- 关键词：鸭疫里氏杆菌
- 2型鸭疫里默氏菌抗体效价与免疫保护率的相关性测定被引量：3
- 2009年
- 以在实验室条件下制备的2型鸭疫里默氏菌(RA-2)油佐剂灭活疫苗免疫7日龄雏番鸭后,每隔7d采血,采用间接ELISA法测定免疫鸭血清中的抗体效价,并同时进行攻菌保护试验,寻找血清中RA-2ELISA抗体效价与免疫保护率之间的相关性。结果表明血清中RA-2ELISA抗体效价为1∶100时,其免疫保护率为70%;为1∶200时,免疫保护率为83.3%;而在抗体效价≥1∶400时,其免疫保护率高达100%。可见,血清中RA-2ELISA抗体效价与免疫保护率呈正相关。
- 程龙飞施少华傅光华彭春香黄瑜陈红梅万春和
- 关键词：鸭疫里默氏菌抗体效价保护率
- 番鸭细小病毒和鹅细小病毒的抗原相关性研究被引量：15
- 2013年
- 应用微量交叉中和试验(NT)和胶乳凝集抑制试验(LPAI)比较番鸭细小病毒、鹅细小病毒和番鸭源鹅细小病毒之间的抗原相关性。结果显示:3种病毒与同源抗血清的中和效价和LPAI效价均明显高于异源血清;番鸭细小病毒与番鸭源鹅细小病毒、鹅细小病毒之间的R值均小于0.1;番鸭源鹅细小病毒与鹅细小病毒的R值大于0.25。结果表明番鸭细小病毒与鹅细小病毒(番鸭源或鹅源)的抗原相关性较低,提示番鸭源鹅细小病毒与鹅细小病毒属于同一血清型的不同亚型。
- 程晓霞陈仕龙陈少莺林锋强王劭朱小丽
- 关键词：番鸭细小病毒鹅细小病毒
- 猪流行性腹泻病毒N蛋白的原核表达及生物学活性鉴定被引量：4
- 2013年
- 为研究猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)的N蛋白特性及在诊断中的应用,本研究采用RT-PCR方法从猪流行性腹泻病毒FJ-11A株中扩增其N蛋白基因片段,并将其克隆到原核表达载体pET-32a上,构建原核表达重组质粒pET32a-PEDV-N,进行条件优化诱导表达、SDS-PAGE、Western blot和ELISA试验。结果表明,该重组目的蛋白(约60 kDa)得到表达,且具有良好的免疫学活性,该研究为开发猪流行性腹泻病毒诊断方法和研究N蛋白功能奠定基础。
- 陈如敬吴学敏车勇良王隆柏魏宏庄向生刘玉涛严山周伦江
- 关键词：猪流行性腹泻病毒N蛋白原核表达
- Ⅰ型鸭疫里氏杆菌基因组质粒表达文库的构建被引量：5
- 2007年
- 提取Ⅰ型鸭疫里氏杆菌的基因组DNA，以睁nI进行酶切，回收、纯化0．5—6kb之间的DNA片段，与经同样酶切并去磷酸化的质粒载体pQE30连接，转化BL21（DE3）感受态细胞，从而构建了Ⅰ型鸭疫里氏杆菌基因组的质粒表达文库，经试验表明其库容量为12000个。随机挑选的阳性克隆提取质粒酶切后证明有外源DNA片段的插入，该文库为应用体内诱导抗原技术筛选鸭疫里氏杆菌的体内诱导基因奠定了基础。
- 程龙飞傅光华施少华陈红梅彭春香黄瑜林芳林建生
- 关键词：鸭疫里氏杆菌
- 鸭疫里氏杆菌敏感烈性噬菌体RAP44的生物学特性被引量：5
- 2010年
- 为了解鸭疫里氏杆菌烈性噬菌体RAP44的临床应用潜力,按常规方法对其生物学特性进行了测定。结果显示,该噬菌体在pH5～pH9的环境中稳定;55℃以下作用30min仍可保持较高裂解活性;加入15mmol/L的Mg2+或20mmol/L的Ca2+后噬菌体RAP44的出斑率分别提高61.9%和53.8%;最佳感染复数为1/40;潜伏期为10min,裂解期为40min,裂解量为83;SDS-PAGE分析结果显示,有2种主要的衣壳蛋白,分子质量分别为40ku和17ku;其基因组约为40kb。表明,噬菌体RAP44潜伏期短,裂解量大,可作为生物防治鸭疫里氏杆菌的候选噬菌体株。
- 钟敏程龙飞郑腾陈红梅傅光华施少华白泉阳黄瑜
- 关键词：鸭疫里氏杆菌生物学特性
- PRRSV GP5抗原表位的串联表达及生物学活性鉴定被引量：5
- 2014年
- 为研究猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)GP5蛋白抗原表位在诊断和基因工程疫苗中的应用,本研究选取(PRRSV)GP5蛋白已鉴定的抗原表位(aa31~37和aa192~198)进行串联后克隆到原核表达载体pGEX-6p-1上,转化E.coli BL21后进行条件优化诱导表达。SDS-PAGE、Western blotting结果表明,该重组目的蛋白(约31 000)得到分泌表达,且具有良好的免疫学活性。
- 陈如敬吴学敏车勇良王隆柏刘玉涛严山魏宏周伦江
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白抗原表位
- 番鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗在番鸭体内中和抗体消长规律的研究被引量：2
- 2014年
- 为明确番鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗在番鸭体内中和抗体消长规律,采用固定病毒稀释血清法,测定了经弱毒疫苗免疫后的雏番鸭不同时间其血清中和抗体效价。结果显示:疫苗注射1日龄雏番鸭,免疫后28d部分鸭血清中出现抗体,35d全部鸭血清中出现抗体;6个月抗体效价达高峰,有效免疫期在18个月以上。表明番鸭呼肠孤病毒弱毒疫苗诱导的中和抗体产生期较晚,但持续期长。
- 程晓霞陈少莺林锋强陈仕龙朱小丽王劭
- 关键词：中和抗体持续期
