广东省医学科学技术研究基金(B2010208)
- 作品数：2 被引量：7H指数：2
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- 两种方法分离子宫内膜干细胞的比较被引量：3
- 2013年
- 背景:目前国内外尚无统一方法分离培养子宫内膜干细胞,实验重复性较差。目的:寻找一种方便、高效、科学的体外分离子宫内膜干细胞的方法。方法:采用混合法(机械和酶消化相结合)及胶原酶Ⅰ法分离子宫内膜干细胞,比较两种方法分离所得活细胞数及细胞生长周期的差异;并采用免疫细胞化学法和RT-PCR法检测CD90和CD117的表达情况。结果与结论:经过15d的原代培养后,子宫内膜干细胞形态呈圆梭形,细胞贴壁平铺生长,具有成纤维细胞形态,细胞排列无极性;细胞化学染色及RT-PCR法均检测到干细胞标志物CD90和CD117表达,证明培养的细胞具有干细胞特性。混合法获得的活细胞数多于胶原酶Ⅰ法,其差异有显著性意义(P<0.01),两种方法分离所得的细胞具有相同的生长周期。结果说明混合法是一种方便、高效、科学的体外分离子宫内膜干细胞的方法。
- 马颖何援利
- 关键词：干细胞子宫内膜干细胞胶原酶酶消化CD90CD117
- 人子宫内膜中存在一群具有克隆增殖能力的细胞被引量：4
- 2012年
- 背景:克隆形成能力是干细胞的重要特性,多项研究证明,子宫内膜在起源上具有单克隆性。目的:通过体外培养,检测人子宫内膜细胞克隆形成能力。方法:采用机械和酶消化相结合的方法分离出人子宫内膜细胞,培养腺上皮细胞和基质细胞,观察细胞形态及生长特性并检测波形蛋白和角蛋白的表达,采用流式细胞仪对细胞进行CD133,CD34,CD45,CD90,CD73及CD29表型鉴定;观察细胞克隆生长特点、测量细胞克隆大小和计算克隆形成率。同时取人子宫肌细胞培养作为对照。结果与结论:经过12d的原代培养后,腺上皮细胞和基质细胞均可形成大、小两种克隆。角蛋白表达阳性为腺上皮细胞,波形蛋白表达阳性为基质细胞。流式细胞术检测子宫内膜细胞表达CD90、CD29、CD73等表面标记,不表达CD34、CD45,CD133。腺上皮细胞、基质细胞大克隆和小克隆大小及形成率比较,差异均有显著性意义(P<0.05);人子宫肌细胞用有限稀释法原代培养无细胞克隆生长。说明子宫内膜细胞在体外培养中,腺上皮细胞和基质细胞大克隆增殖能力均高于小克隆。这些细胞可能是子宫内膜干细胞。
- 马颖何援利
- 关键词：子宫内膜细胞克隆有限稀释法
