国家自然科学基金(30801177)
- 作品数：11 被引量：32H指数：4
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- 胶质瘤干细胞趋化神经干细胞迁移及其机制研究被引量：6
- 2011年
- 目的观察神经干细胞（NSC）向胶质瘤干细胞（GSC）及其分化细胞的迁移能力，探讨其趋化机制。方法干细胞条件培养U251和3例原代胶质瘤干细胞，以流式细胞术和Westernblot对其鉴定；Transwell小室法检测GSC和其分化细胞条件培养液（CM）对NSC迁移的趋化能力；酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测CM中血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的分泌水平，并以表皮生长因子（EGF）、bFGF为对照分析CM对NSC的化学趋化作用；进一步以Dio和Dil分别标记NSC和GSC，体外混合培养观察NSC向GSC的迁移、以及对肿瘤干细胞球生长的影响。结果干细胞培养条件下的胶质瘤干细胞球，高表达干细胞标志物Nestin和／或CD133（11．02％-33．55％）；分化后干细胞标志物表达下降，分化标志物胶质纤维酸性蛋白（GFAP）表达增加（P〈0．05）；GSC与其分化细胞比较，分泌高水平的趋化因子VEGF和bFGF（P〈0．05），并对NSC有高度趋化能力；体外混合接触培养也显示NSC向肿瘤干细胞球的迁移和包绕，并且能够显著抑制肿瘤干细胞球的生长（P〈0．05）。结论GSC体外可趋化NSC向其迁移，其趋化作用较分化的肿瘤细胞更为显著，并且与其分泌高水平的生长因子有关；向肿瘤干细胞球迁移的NSC可抑制其体外生长。
- 张所军胡峰谢蕊繁王宝峰叶飞万锋郭东生雷霆
- 关键词：神经干细胞胶质瘤干细胞迁移趋化因子
- 凝胶侵袭模型对胶质瘤细胞体外侵袭力研究的应用初探
- 2010年
- 目的 初步探讨凝胶侵袭模型用于人胶质瘤细胞体外侵袭力研究的可行性,观察普通培养的胶质瘤细胞与胶质瘤干细胞在凝胶侵袭模型中侵袭力的差异,为胶质瘤的体外研究寻求新的实验手段.方法 经纯化的Ⅰ型和Ⅲ型胶原与MEM培养基混合制备凝胶液,将原代培养的胶质瘤细胞经悬滴法制成的细胞球和胶质瘤干细胞所形成的细胞球种植于其中,每个细胞球含（10-15）×103个细胞,在添加含有不同药物浓度基质金属蛋白酶抑制剂GM6001（0、25、50、75、100μmol/L）的相应培养基中培养4 d,测量不同药物浓度组肿瘤细胞侵袭距离及其差异.结果 不同处理组胶质瘤细胞在凝胶侵袭模型中生长良好,最初的细胞球形态呈规则圆形,随着时间的推移肿瘤细胞侵袭距离逐渐增加;且对GM6001的抑制作用表现出不同程度的剂量依赖性,以75 μmol/L GM6001对普通培养的胶质瘤贴壁细胞的侵袭抑制作用最为明显（均P=0.000）;而25μmol/L GM6001对胶质瘤干细胞球的侵袭抑制作用最显著（P=0.002,0.012,0.000）.结论 凝胶侵袭模型适用于普通贴壁培养的胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞球.
- 谢蕊繁张所军高宝成万锋雷霆
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤侵润胶原基质金属蛋白酶类
- 进一步研究脑肿瘤干细胞调节机制及其应用被引量：11
- 2010年
- 在神经干细胞广泛研究基础上，越来越引起人们注意的是脑肿瘤干细胞（Braintumorstemcell，BTSC）的存在。随着对BTSC研究的深入，提示其在肿瘤的发生和发展过程中起着重要作用。BTSC是肿瘤细胞中具有自我更新能力的少数细胞群体，这部分细胞能够产生各种异质性的子代胶质瘤细胞，
- 雷霆万锋
- 关键词：脑肿瘤干细胞细胞调节自我更新能力神经干细胞胶质瘤细胞细胞群体
- 侧群细胞分析法在脑肿瘤干细胞研究中的应用及其局限性被引量：2
- 2009年
- 目前，用来分选和培养肿瘤干细胞（TSCs）的方法主要有两种：一种是利用特异性的细胞表面标记物，例如CD133分选胶质瘤干细胞（GSCs），但该方法不能用于那些缺乏已知标记物的肿瘤细胞，且正常干细胞标记物不一定是肿瘤干细胞标记物；另一种是利用肿瘤干细胞在特定培养基中悬浮生长形成干细胞球的特性，特异性富集肿瘤干细胞。除此之外，还有一种方法是侧群细胞（SP）分析法，
- 高宝成万锋陈坚雷霆
- 关键词：脑肿瘤神经胶质瘤肿瘤干细胞
- CD133剪接变体在脑胶质瘤中的表达研究
- 2012年
- 目的判断CD133剪接变体的表达与AC133抗原决定簇的关系。方法对AC133阳性和阴性胶质瘤细胞中剪接变体的表达进行了对比，并进行了AC133阳性胶质瘤干细胞诱导分化下CD133剪接变体的表达研究。以lit—PCR针对性的扩充CD133mRNA条件外显子集中序列，并通过DNA测序确定其条件外显子，同时以实时荧光定量PCR进行了条件外显子表达的定量分析。结果AC133阳性和阴性细胞均表达相同的CD133mRNA剪接变体，剪接变体的表达与CD133蛋白的亚细胞分布无关联。AC133阳性胶质瘤干细胞诱导分化过程中，含3号条件外显子的剪接变体的表达显著上调（P〈0．05）。结论在脑胶质瘤中，未能证实与AC133抗原决定簇表达呈特异关联的剪接变体，含3号条件外显子的剪接变体表达与胶质瘤细胞的分化表型相关联。
- 曾令成王煜万锋叶飞郭东生雷霆
- 关键词：神经胶质瘤肿瘤干细胞抗原CD133
- 基质金属蛋白酶抑制剂对胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞体外侵袭抑制作用的比较被引量：8
- 2010年
- 目的 观察基质金属蛋白酶（MMP）抑制剂对常规贴壁培养的人脑胶质瘤细胞和胶质瘤干细胞侵袭能力的影响及两者间的差异.方法 应用一种三维胶原凝胶侵袭模型,将常规贴壁培养的胶质瘤细胞与无血清、悬浮细胞球条件下培养的胶质瘤干细胞（1. 0×104～1.5×104个/样本）分别接种于该模型中,加入不同浓度的MMP抑制剂GM6001（0、25、50、75、100 μmol/L）培养4 d,通过观察各组细胞侵袭距离及其差异,判断该抑制剂对两种细胞侵袭能力的影响及差异.结果 两组细胞对GM6001的抑制作用表现出不同程度的剂量依赖性,75μmol/L GM6001对常规培养的胶质瘤细胞侵袭抑制最明显,而25 μmol/L GM6001对胶质瘤干细胞的侵袭抑制最显著.结论 MMP抑制剂在体外对胶质瘤细胞具有侵袭抑制作用,胶质瘤干细胞显示出对MMP抑制剂更高的敏感性.
- 谢蕊繁张所军高宝成万锋郭东生雷霆
- 关键词：胶质瘤基质金属蛋白酶抑制剂
- CD133作为胶质瘤干细胞标志物应用的局限性被引量：4
- 2010年
- 胶质瘤是神经外科最常见的恶性肿瘤,临床尚缺乏有效的治疗手段。肿瘤干细胞被认为是胶质瘤发生、发展的源头而受到越来越多的关注。干细胞标志物CD133广泛表达于人体多种肿瘤中,同时,它也是研究得最多且应用最广的胶质瘤干细胞表面标志物。然而,利用CD133进行胶质瘤干细胞的鉴定和筛选正逐渐受到质疑。本文将对近年来人们发现的CD133作为胶质瘤干细胞标志物应用的局限性进行综述。
- 谢蕊繁万锋雷霆
- 关键词：胶质瘤干细胞CD133
- CD133：脑胶质瘤干细胞标志物？被引量：1
- 2012年
- 过去十五年，癌症研究中的重大进展之一为“肿瘤干细胞”模式的提出。该模式认为，恶性肿瘤的发生类似于正常组织发生，最初起源于与“正常干细胞”具有相类似的自我更新和多向分化潜能特性的“肿瘤干细胞”。
- 曾令成万锋韩林雷霆
- 关键词：干细胞标志物CD133脑胶质瘤肿瘤干细胞多向分化潜能自我更新
- 神经球培养方法在脑肿瘤干细胞研究中的应用及其局限性
- 2011年
- 脑肿瘤干细胞（brain tumor stem cell,BTSC）在肿瘤细胞中仅占很小的比例,却是肿瘤发生、发展和维持的真正＂元凶＂.传统的针对全体肿瘤细胞的研究策略,正转移到以BTSC为靶点的治疗上来[1-4].
- 张所军万锋郭东生雷霆
- 关键词：脑肿瘤干细胞神经球CELL肿瘤发生
- Comparative study on the stem cell phenotypes of C6 cells under different culture conditions被引量：3
- 2011年
- 背景 Glioma 干细胞(GSC ) 假设安置那在 gliomas 以内的房间的 subpopulation 有真 clonogenic 和 tumorigenic 潜力。显著地，到 GSC 的更争论的相互关联是处于不同文化条件的房间可能显示不同干细胞性质。就这些可能性而言，我们使用了在不同文化 conditions.Methods C6 细胞下面比较 C6 glioma 细胞的干细胞特征的一条途径在三个不同生长条件下面是有教养的，即，支持者生长在常规 10 浆液媒介，在没有浆液的媒介的非支持者范围生长，象在没有浆液的媒介的laminin涂的烧瓶上的支持者生长一样。生长特征通过 neurosphere 形成试金和房间周期分析对比地被检测。标记被 immunofluorescence，亲戚量的反向的抄写(RT )-PCR,Western 弄污和流动 cytometry 决定。方面人口房间经由流动 cytometry 被分析。肿瘤模型被磁性的回声成像和 hematoxylin 与曙红染色检测。数据分析与软件(17.0 ).Results C6 房间(C6-Adh， C6-SC-Sph 和 C6-SC-Adh ) 显示出的社会科学统计套装软体被执行到推迟 C6-SC-Sph，支持者 C6-Adh 和 C6-SC-Adh 的特殊生长模式和增长 capacity.Compared 显示了更高的生长比率。C6-SC-Sph 和 C6-SC-Adh 显示出 neurosphere 形成和自强的提高的能力。高方面人口比率在 C6-SC-Sph 和 C6-SC-Adh 被检测。CD133 没在所有三种房间被检测。相反地， Nestin 并且 -- 导管素被表明积极，尽管如此没有统计意义(P 0.05 ) 。有趣地，降低 glial fibrillary 的表示酸的蛋白质在 C6-SC-Sph 和 C6-SC-Adh 被表明。C6-Adh， C6-SC-Sph 和 C6-SC-Adh 都在 situ oncogenicity 被显示，当幸存时间的统计差别不是 confirmed.Conclusions C6 glioma 时当转了进干细胞文化状况时，房间线被赋予以能中等在 vitro 被充实的一些 GSC 显型。结果的肿瘤范围可以不是一个前提或 GSC 的健全来源，在干细胞媒介的支持者文化不是赞成在 vivo 膨胀的 GSC 的一个生长条件。
- ZHANG Suo-jun YE Fei XIE Rui-fan HU Feng WANG Bao-feng WAN Feng GUO Dong-sheng LEI Ting
- 关键词：细胞表型C6细胞WESTERN印迹法流式细胞仪分析
