国家自然科学基金(39770569)
- 作品数：6 被引量：72H指数：4
- 相关作者：鲍恩东赵茹茜李玉保王志亮张洪英更多>>
- 相关机构：南京农业大学中国动物卫生与流行病学中心聊城大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中德农业科技合作项目博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- HSP70及HSP70 mRNA在热应激肉鸡组织中的定位
- 利用间接法免疫组织化学技术和RNA探针原位杂交技术,研究了HSP70及HSP70 mRNA在热应激6 h处理肉鸡心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏、胸腺和法氏囊等组织中的分布。结果显示,热应激6 h时HSP70 mRNA主要分...
- 孙培明刘雨田王清华王志亮鲍恩东
- 关键词：热休克蛋白70心血管系统原位杂交肉鸡
- 文献传递
- 运输应激猪HSPs mRNA转录、分布及免疫器官病理性损伤相关性研究被引量：12
- 2008年
- 【目的】研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平,探讨其相关性。【方法】利用组织学、原位杂交和本实验室建立的猪HSPs mRNA一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台等方法,研究长途运输应激对猪免疫器官的病理性损伤、HSPs mRNA的分布和转录水平的变化。【结果】在长途运输应激初期(1～2h),淋巴结和脾脏出现急性病理性损伤变化,损伤程度较为严重;运输应激4h时,组织的病理性损伤与应激初期相似,但血管的充血程度有所减轻;淋巴结和脾脏中HSP70 mRNA的转录水平随着运输应激时间的延长一直呈现出上升的趋势,运输应激持续到10h时,HSP70 mRNA的转录水平升到最高,分别为对照组的9.59和11.46倍;HSP90 mRNA的转录水平在应激初期(1～2h)急剧升高(P<0.01),运输应激2h时,淋巴结和脾脏中HSP90 mRNA的转录水平分别为对照组的59.67和13.03倍,到运输应激持续到6h后,升高不再显著。HSPs mRNA在淋巴结和脾脏细胞中的定位无肉眼可见的随着应激时间的延长而发生相应的变化,但HSP70和HSP90 mRNA之间的定位存在着差异。【结论】运输应激可以导致组织损伤和HSPs mRNA转录水平的变化,但对不同家族的HSPs mRNA转录水平的影响不同;HSP90 mRNA的转录水平与组织损伤有着良好的相关性,有望成为猪运输应激的判定指标之一。
- 李玉保裴兰英鲍恩东王志亮赵茹茜
- 关键词：热休克蛋白运输应激
- 运输应激猪骨骼肌中热应激蛋白HSP_(70)和HSP_(90)家族的表达被引量：31
- 2001年
- 利用Westernblot技术 ,检测长途运输试验猪骨骼肌 (背最长肌和臀大肌 )中分属于HSP70 家族和HSP90 家族的 4种应激蛋白 (HSP70 ,HSP72 ,HSP86和HSP90 )的表达。所有运输应激猪和对照猪肌肉组织中均检测到了上述 4种HSP。对照猪组织中HSP的表达说明HSP除了在受应激的细胞内行使生理功能外 ,还具有独立于应激刺激应答以外的其它作用。6h的长途运输后 ,HSP的表达量明显不同 ,HSP70 和HSP72 在肌肉组织中的表达虽然有一定的增加 ,但统计学分析差异不显著 (P >0 0 5 ) ;而HSP86和HSP90 在骨骼肌中的表达明显下降 ,尤以HSP90 下降最为显著 (P <0 0 1)。提示HSP90 家族成员与肉品品质相关 。
- 鲍恩东K R SultanB NowakJ Hartung
- 关键词：运输应激骨骼肌热应激蛋白肉品品质
- 原位杂交法检测hsp mRNA在猪组织细胞中的分布
- 2008年
- 根据hsp70和hsp90 mRNA基因序列,设计并合成引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,利用体外转录系统,制作地高辛标记的RNA探针,建立检测hsps mRNA原位杂交方法。利用自建的原位杂交方法,对hsp70、hsp90 mRNA进行组织细胞定位研究。结果显示:hsp70 mRNA和hsp90 mRNA广泛分布于各组织细胞中,尤其在细胞核中相对集中,在肾小管上皮细胞胞浆中也呈强阳性着色。
- 李玉保鲍恩东赵茹茜
- 关键词：原位杂交HSPMRNA体外转录
- 猪hsp70和hsp90荧光定量RT-PCR检测方法的建立被引量：4
- 2008年
- 根据hsp70、hsp90和GAPDH基因mRNA序列,设计并合成3对引物,将PCR扩增的基因片段克隆到pGEM-T载体,重组质粒经筛选、鉴定,体外转录出RNA,系列稀释作为阳性标准品,用于标准曲线的绘制和样品检测,并用持家蛋白GAPDH基因对样品进行归一化,建立了一步法实时荧光定量RT-PCR技术平台,并对其扩增效率、敏感性、特异性进行了检测。结果证明,建立的一步法荧光定量RT-PCR技术可以真实地反映反应管中模板的数量,可用于猪hsp70、hsp90和GAPDH基因mRNA水平的检测。
- 李玉保鲍恩东赵茹茜王志亮
- 关键词：HSP70HSP90GAPDH荧光定量RT-PCR
- 热应激对雏鸡自然杀伤(NK)细胞活性和T淋巴细胞转化率的影响被引量：20
- 2000年
- 10 0羽雏鸡笼养于 2 0℃ ,相对湿度为 75 %的环境中 ,然后将试验组鸡 (5 0羽 )转移至 40℃ ,相对湿度为 90 %的环境中 ,观察热应激对雏鸡自然杀伤 (NK)细胞活性和T淋巴细胞转化率的影响。结果表明 ,在应激 2h内 ,T淋巴细胞转化率显著降低 (P <0 0 5 ) ,而NK细胞活性则显著升高 (P <0 0 5 )。耐过鸡的T淋巴细胞转化率在 6～ 8h后基本恢复正常 ,NK细胞活性也接近正常水平。对应激鸡的胸腺、法氏囊、脾脏的病理组织学动态观察发现 ,应激持续 6～ 8h后 ,均出现出血、萎缩、颗粒变性、水泡变性、脂肪变性为特征的变化。
- 张洪英鲍恩东
- 关键词：热应激NK细胞T淋巴细胞转化率
