广东省自然科学基金(04000793)
- 作品数：4 被引量：16H指数：2
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- 乙型肝炎病毒全长基因组的扩增被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨扩增乙肝病毒全长基因组合适的PCR反应条件。方法:设计针对负链5′末端引物,PCR一步法扩增乙肝病毒全长基因。改变PCR反应条件,决定最佳退火温度和最佳引物浓度,并观察不同乙肝病毒DNA模板量对PCR扩增效率的影响。结果:最佳退火温度为68℃,最佳引物浓度为0.5μmol/L,模板量在150拷贝以上能扩增出乙肝病毒全长基因,但模板量达到105拷贝抑制扩增效率。结论:退火温度为68℃、引物浓度为0.5μmol/L、乙肝病毒DNA模板量在150～105拷贝为乙肝病毒全长基因扩增的合适PCR反应条件。
- 周豪杰聂咏梅付涌水汪传喜陶黎阳郑优荣
- 关键词：肝炎病毒乙型基因组聚合酶链反应
- 常温保存期血小板数量及功能的变化被引量：10
- 2005年
- 目的探讨保存期机采血小板数量及功能的变化。方法血细胞分离机采集血小板8人份,22℃振荡保存,分别在保存0、1、3和5d,在100级超净台内取样10ml,进行血小板计数、pH值、乳酸脱氢酶(LDH)、血小板凋亡数及CD62P表达的检测。结果在0、1、3和5d的Plt没有显著性差异;pH值比较,有显著性差异;0d与3d和5d相比,LDH有显著性差异;0d与第1、3、5d相比,血小板凋亡数有显著性差异;0d与1d、5d相比,CD62P表达有显著性差异。结论在血小板保存期,随着保存期的延长,机采血小板的pH值下降;LDH水平逐步增高;血小板凋亡数逐渐增高;CD62P的表达也逐渐增高,激活的血小板数增多。
- 聂咏梅付涌水江朝富陶黎阳周豪杰邓晶黄可君廖剑锋徐国胜
- 关键词：乳酸脱氢酶
- 乙肝病毒全长基因组真核表达载体构建被引量：3
- 2007年
- 目的构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体。方法PCR一步法扩增乙肝病毒全长基因组;乙肝病毒基因组和真核表达载体pcDNA3.1(+)经HindⅢ和EcoRⅠ双酶切,连接并转化大肠杆菌DH5α。结果PCR、酶切和测序表明乙肝病毒全长基因组成功插入真核表达载体pcDNA3.1(+)。结论成功构建乙肝病毒全长基因组真核表达载体。
- 周豪杰聂咏梅付涌水汪传喜郑优荣
- 关键词：乙肝病毒基因组基因克隆
- 载体介导的RNAi抑制乙肝病毒S基因的研究被引量：1
- 2010年
- 目的构建针对乙肝病毒S基因的RNAi表达载体,观察其对HBV表达的影响。方法合成针对HBVS基因的RNAi寡核苷酸,克隆入pSUPER载体,与pHBV质粒共转染HepG2细胞。ELISA和Westernblot检测HBsAg表达。结果成功构建针对HBVS基因的RNAi表达载体pSUPER-S1和pSUPER-S2对HBsAg的抑制率分别为79.0%和43.2%,无关序列的RNAi表达载体无此作用。结论载体介导的RNAi能高效、特异地抑制HBVS基因的表达。
- 周豪杰汪传喜滕青聂咏梅
- 关键词：乙型肝炎病毒RNA干扰乙肝病毒表面抗原
