国家自然科学基金(U0932005)
- 作品数：16 被引量：37H指数：3
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- 钙拮抗剂通过非钙通道依赖机制抗缺氧/复氧诱导的心肌细胞凋亡被引量：3
- 2017年
- 目的:观察钙拮抗剂通过非钙通道依赖途径,减少缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡。方法:用EGTA螯合缺氧液和复氧液中的钙离子,建立无钙液H9c2心肌细胞H/R损伤模型。实验分为对照组(Ctrl)、0钙组(OCa)、0钙+药物组(0Ca+药物)、模型组(H1/R1)、溶剂组(DMSO)、模型+药物组(H1/R1+药物)。Ctrl组用DMEM培养基培养2h,0Ca组用复氧液培养2h,0Ca+药物组在复氧液中加入与H1/R1+药物组相同浓度的药物,培养2h。H1/R1+药物组在缺氧液和复氧液中均加入1×10^(-5)mol/L的钙拮抗剂,缺氧1h复氧1h(H1/R1)。H/R结束后,通过Western-blot检测Cleaved Caspase-3(Caspase-3)表达和AnnexinV-FITC/PI检测心肌细胞的早晚期凋亡。结果:Western-blot结果显示,Ver、Nif和F_2组能减少无钙液培养的H9c2心肌细胞H/R后Caspase-3的表达。AnnexinV-FITC/PI流式细胞术结果显示,Ver、Nif和F_2能减少无钙液培养H9c2心肌细胞H/R后早期和晚期凋亡。结论:Ver、Nif和F_2能通过非钙通道依赖途径拮抗H/R诱导的心肌细胞凋亡。
- 林泓蔡文锋王远航周巧玲汪彬石刚刚郑付春
- 关键词：凋亡钙拮抗剂
- 钙拮抗剂对缺氧/复氧心肌细胞早期生长反应基因的作用及抗损伤的研究被引量：13
- 2011年
- 目的观察钙离子拮抗剂维拉帕米、地尔硫卓和硝苯地平对大鼠缺氧/复氧心肌细胞早期生长反应基因(Egr-1)及抗细胞损伤的作用。方法取生长d 5～6的大鼠心肌细胞分为对照组、缺氧/复氧(H/R)组、DMSO组、维拉帕米(2μmol.L-1)组、地尔硫卓(10μmol.L-1)组和硝苯地平(10μmol.L-1)组,除对照组外其他组制作心肌细胞H/R损伤模型。测定肌酸激酶、乳酸脱氢酶、超氧化物歧化酶及丙二醛的变化,观察心肌细胞损伤情况;RT-PCR方法检测培养心肌细胞中Egr-1mRNA表达水平;Western blot方法检测培养心肌细胞中Egr-1蛋白的表达水平。结果与H/R组相比,维拉帕米组、地尔硫卓组和硝苯地平组Egr-1mRNA及蛋白表达明显减少(P<0.05),心肌细胞损伤程度明显减弱(P<0.01)。结论维拉帕米、地尔硫卓和硝苯地平均可抑制Egr-1的表达,减轻H/R心肌细胞的损伤,这可能是钙离子拮抗剂保护心肌细胞H/R损伤的共同机制之一。
- 郑付春黄展勤石刚刚
- 关键词：早期生长反应基因-1维拉帕米地尔硫卓
- 钙拮抗剂阈下剂量对大鼠心肌缺血再灌注损伤作用的研究被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨钙拮抗剂阈下剂量对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤的保护作用。方法:结扎大鼠左冠状动脉前降支,建立心肌I/R损伤模型;腹腔注射(mg/kg)维拉帕米(Ver,0.75)、硝苯地平(Nif,0.2)、地尔硫卓(Dil,0.5)、碘化氮正丁基氟哌啶醇(F2,1.5);测定大鼠血清中乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平及心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活力与丙二醛(MDA)浓度;检测大鼠心肌组织梗死面积。结果:Ver、Nif可减少心肌组织中LDH、CK、CK-MB漏出;Ver、Nif、Dil、F_2可不同程度提高心肌组织SOD活力,降低MDA浓度;Ver、Nif、F_2可明显减少心肌梗死面积。结论:经典钙拮抗剂具有非L型钙通道阻断途径抗心肌I/R损伤作用。
- 凌震王远航蔡文锋汪彬林泓周巧玲石刚刚
- 关键词：心肌缺血再灌注钙拮抗剂
- 碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心肌细胞肌浆网钙泵的保护作用
- 2011年
- 目的:研究碘化-N-正丁基氟哌啶醇(F2)对大鼠心肌细胞肌浆网钙泵(SERCA)的保护作用。方法:通过结扎成年SD大鼠冠状动脉左前降支造成急性心肌缺血再灌注(I/R)模型,舌下静脉给予不同剂量(0.3、0.5、1.0、2.0和4.0mg/kg)F2,测定SERCA的活性和蛋白表达变化。结果:I/R组SERCA活性为对照组的57.7%、不同剂量F2组分别为67.1%、72.8%、77.4%、84.1%和86.7%。结论:F2能量效-依赖地减轻I/R导致的SERCA活性降低。
- 王春燕石刚刚
- 关键词：碘化N-正丁基氟哌啶醇肌浆网钙泵缺血再灌注
- 钙拮抗剂通过肿瘤坏死因子-α/NF-κB环路介导的非钙依赖机制对缺氧复氧心肌细胞的保护作用
- 2013年
- 目的:研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)等钙拮抗剂通过肿瘤坏死因子(TNF)-α/NF-κB环路介导的非钙依赖机制对缺氧复氧(H/R)心肌细胞的保护作用。方法:在体外培养的H9C2细胞上,建立无钙H/R模型,实验分为对照组、无钙组、无钙H/R组、无钙H/R+DMSO组及无钙H/R+不同剂量钙拮抗剂组。ELISA检测培养上清液中TNF-α的释放量;实时荧光定量PCR检测培养心肌细胞中TNF-α的mRNA。Western blot验证p-IKB-α、IKB-α、p-p65、p65在H9C2中的表达。比色法检测培养上清液中大鼠乳酸脱氢酶(LDH)浓度。结果:无钙缺氧0.5 h复氧0.5 h可引起TNF-α升高(P<0.05),无钙1h TNF-α无变化。F2和维拉帕米(Ver)能剂量-依赖性抑制无钙H/R所致的TNF-α、LDH的生成以及p-IKB-α、p-p65表达。结论:F2和Ver通过对TNF-α/NF-KB环路的介导,在无钙条件下对心肌细胞H/R损伤起保护作用。
- 周伶俐石刚刚
- 关键词：肿瘤坏死因子-Α碘化N-正丁基氟哌啶醇钙拮抗剂
- 碘化N-正丁基氟哌啶醇抑制大鼠过氧化氢作用心肌细胞L型钙通道电流的增大
- 2014年
- 目的本实验旨在研究碘化N-正丁基氟哌啶醇(F2)对过氧化氢作用大鼠心肌细胞L-型钙电流的抑制作用,并探讨其保护机制。方法采用Langendorff灌流系统灌流SD大鼠心脏,标准酶解法消化分离得到单个心室肌细胞,给予正常台氏液灌流5 min,灌流含过氧化氢的台氏液建立过氧化氢模型。采用全细胞膜片钳记录对照、模型以及不同浓度F2(0.1、1、10μmol·L-1)对L-型钙通道电流,观察过氧化氢作用后,F2对L-型钙通道电流的影响。结果过氧化氢作用后L-型钙通道电流增大,I-V曲线下移。F2呈浓度依赖地抑制L-型钙通道电流,I-V曲线上移。结论 F2能抑制L-型钙电流,防止过氧化氢作用时心肌细胞的钙超载,从而保护心肌细胞。
- 黄勇攀高分飞石刚刚
- 关键词：碘化N-正丁基氟哌啶醇过氧化氢L-型钙电流钙超载心肌细胞
- 巨噬细胞移动抑制因子研究进展被引量：2
- 2013年
- 巨噬细胞移动抑制因子(MIF)是一种多效蛋白分子,具有细胞因子、激素和酶等特点。研究发现,MIF具有多种生物学功能,在动脉粥样硬化、肿瘤、糖尿病、缺血-再灌注损伤和心肌梗死等疾病中发挥重要作用。本文就MIF在疾病中的作用作一综述。
- 汪彬石刚刚
- 关键词：巨噬细胞移动抑制因子动脉粥样硬化肿瘤缺血再灌注损伤心肌梗死
- ERK信号转导通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用被引量：9
- 2012年
- 细胞外信号调节激酶(ERK1/2)作为丝裂原活化蛋白激酶家族中一个重要的亚族,在调节细胞的生长、分化、应激以及死亡中起重要作用。大量研究表明,ERK信号通路在体内外心肌缺血/再灌注损伤过程中被激活并发挥了重要作用。激活ERK既可以促进细胞存活,也可以介导细胞损伤,这与细胞种类的不同或缺血/再灌注的程度及时程的不同有关。本文就ERK信号转导通路在心肌缺血再灌注损伤中的作用及其机制作一综述。
- 陈高勇张艳美石刚刚
- 关键词：细胞外信号调节激酶缺血再灌注损伤心肌
- 碘化N-正丁基氟哌啶醇对大鼠心脏微血管内皮细胞缺氧复氧损伤保护机制的研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察碘化Ⅳ.正丁基氟哌啶醇（N-n-butylhalo-peridol iodide，F2）对培养的内皮细胞缺氧／复氧（anoxia／reoxygenation，A／R）损伤及早期生长反应基因-1（early growth response gene1，Egr-1）蛋白表达的影响。方法应用新生SD大鼠进行心脏微血管内皮细胞（cardiacmicrovas．eularendothelialcells，CMECs）原代培养，取3-4代的CMECs建立A／R模型。通过测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）及CMECs中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量，观察CMECs损伤程度；应用ELISA法测定细胞培养上清液肿瘤坏死因子-d（TNF-α）的含量，观察CMECs炎症反应水平；Westernblot法检测培养CMECs中Egr一1的蛋白表达水平。结果A／R造成CMECs内MDA升高，SOD下降，上清液中LDH、TNF—α含量升高，A／R刺激下细胞Egr-1的蛋白表达水平明显升高；A／R刺激前给予F2：可减轻CMECs的损伤及炎症反应程度，抑制Egr-1蛋白的表达。结论F：对心脏微血管内皮细胞A／R损伤具有保护作用，该作用可能与其抑制Egr-1的表达有关。
- 周燕琼周燕琼张艳美高分飞黄展勤陈一村郑燕珊
- 关键词：碘化N-正丁基氟哌啶醇心脏微血管内皮细胞缺氧复氧EGR-1
- 钙拮抗剂调节钙非依赖磷脂酶A_2拮抗心脏微血管内皮细胞缺氧/复氧损伤的研究被引量：5
- 2017年
- 目的探讨经典钙拮抗剂维拉帕米(Ver)、硝苯地平(Nif)、地尔硫(Dil)及本课题组合成的新型钙拮抗剂-碘化N-正丁基氟哌啶醇(F_2)通过调节钙非依赖磷脂酶A_2(iPLA_2)抗心脏微血管内皮细胞(CMECs)缺氧/复氧(H/R)损伤的作用与机制。方法培养大鼠原代CMECs,制作H/R模型,在H/R的基础上,用不同浓度梯度的钙拮抗剂及F_2处理细胞,比色法测定细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的漏出反映细胞损伤程度;酶联免疫吸附法(ELISA)测定白介素-6(IL-6)和花生四烯酸(AA)的含量;TUNEL法检测细胞晚期凋亡水平;Real-time PCR检测iPLA_2mRNA表达,Western blot检测iPLA_2蛋白表达。结果钙拮抗剂F_2、Ver和Nif均可量效-依赖性地减少H/R过程中LDH漏出(P<0.05),降低IL-6和AA含量(P<0.05),减少细胞凋亡(P<0.05),而Dil对上述指标均无作用;同时,F_2和Ver均可量效-依赖性地降低iPLA_2mRNA和蛋白表达水平,Nif和Dil对H/R过程中iPLA_2mRNA和蛋白表达水平并无影响。结论H/R可导致CMECs损伤,钙拮抗剂F_2、Ver、Nif能保护CMECs抗H/R损伤,Dil无抗H/R损伤的作用;而F_2和Ver是部分通过调节iPLA_2抗H/R损伤作用的。
- 周巧玲王远航林泓汪彬石刚刚郑付春
- 关键词：钙拮抗剂碘化N-正丁基氟哌啶醇心脏微血管内皮细胞
