国际科技合作与交流专项项目(2009DFB30510)
- 作品数：4 被引量：63H指数：4
- 相关作者：王毅张萌王怡龚婉肖扬更多>>
- 相关机构：天津中医药大学浙江大学浙江中医药大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生理学更多>>
- 磁珠富集与液相色谱-质谱联用结合筛选枳壳中脂肪酶抑制剂被引量：6
- 2012年
- 提出了一种磁珠收集与液相色谱-质谱联用(LC-MS)结合用于快速筛选中药提取物中的脂肪酶抑制剂的方法.通过制备键合脂肪酶的磁珠,将其与枳壳总黄酮孵育后,筛选出枳壳中脂肪酶的配体.通过LC-MS分析发现,4个化合物均是潜在的脂肪酶抑制剂,鉴定其分别为柚皮苷、新橙皮苷、橙皮苷和枸橘苷.对4个化合物进行了体外脂肪酶抑制活性验证.研究结果表明,新橙皮苷、橙皮苷和枸橘苷具有显著的脂肪酶抑制活性,IC50分别为48.04,52.45和46.18μg/mL,其中枸橘苷具有脂肪酶抑制活性为首次报道.结果表明,磁珠富集与LC-MS集成技术能够用于快速发现中药活性成分.
- 陈锥陶益王怡王毅
- 关键词：脂肪酶磁珠富集枳壳
- Z-藁本内酯对人脐静脉内皮细胞保护作用及其机制研究被引量：9
- 2013年
- 目的通过观察Z-藁本内酯对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及核因子-κB(NF-κB)表达的影响,探讨其对炎性因子损伤内皮细胞的保护作用及其机制。方法向体外培养的HUVEC中加入TNF-α10 ng/mL造成细胞损伤,同时加入不同浓度(5、10、20μmol/L)的Z-藁本内酯,共同孵育24 h,MTT法检测各组细胞活力,ELISA法测定细胞培养液中ICAM-1和VCAM-1的量,Westernblotting法检测各组细胞NF-κB蛋白表达。结果与对照组比较,TNF-α可造成HUVEC明显损伤(P<0.05、0.01),显著增加HUVEC中ICAM-1和VCAM-1的表达(P<0.01)。与模型组比较,Z-藁本内酯可以剂量相关地降低ICAM-1(P<0.01)和VCAM-1(P<0.05)的表达,显著减少细胞NF-κB蛋白的表达(P<0.05)。结论 Z-藁本内酯可减轻TNF-α对HUVEC的损伤,其作用机制可能与通过抑制NF-κB的激活,进而减少ICAM-1和VCAM-1的表达有关。
- 王迎超黄怡王毅王怡张萌
- 关键词：人脐静脉内皮细胞细胞间黏附分子-1血管细胞黏附分子-1核转录因子-ΚB
- 丹参总酚酸及三七总皂苷配伍对缺氧复氧损伤心肌细胞的保护作用研究被引量：35
- 2013年
- 目的:探索丹参总酚酸及三七总皂苷配伍对心肌细胞缺氧复氧(hypoxia-reoxygenation,HR)损伤的保护作用机制。方法:采用缺氧复氧损伤H9c2细胞模型,MTT法测定丹参总酚酸、三七总皂苷配伍对细胞活力的影响,并测定细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,评价丹参总酚酸、三七总皂苷配伍对心肌细胞的保护作用;采用Hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡,并用流式细胞术检测不同药物干预后心肌细胞凋亡率;采用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2,Bax,Caspase-3的表达情况;定磷法检测细胞内Na+,K+-ATPase,Ca2+,Mg2+-ATPase的变化,化学发光法检测细胞内ATP含量的变化。结果:丹参总酚酸、三七总皂苷分别在0.05～0.5,5～50mg·L-1配伍时对缺氧复氧损伤的心肌细胞具有浓度依赖性的协同保护作用;丹参总酚酸与三七总皂苷均能减轻缺氧复氧导致的心肌细胞的凋亡并且改善心肌细胞的能量代谢,配伍后作用更为明显。结论:丹参总酚酸、三七总皂苷配伍具有协同增效作用,可通过抑制细胞凋亡和改善能量代谢对抗缺氧复氧对心肌细胞的损伤。
- 龚婉肖扬张萌王毅王怡
- 关键词：丹参总酚酸三七总皂苷H9C2配伍
- 赤芍中护肝活性物质的筛选与鉴定被引量：13
- 2012年
- 目的:建立中药潜在护肝活性物质快速筛选新方法,辨识赤芍内具有护肝活性的化学成分。方法:在半乳糖胺HepG2细胞损伤模型上,采用二乙酸荧光素荧光标记法和MTT法筛选赤芍中具有护肝活性的组分,使用色谱-质谱联用技术分析其化学组成,并对筛选出的赤芍护肝活性成分进行实验验证。结果:从赤芍中筛选发现具有明显护肝活性的化学组分3个,并分析鉴定出芍药苷、棕榈酸乙酯和亚油酸乙酯3个成分。验证实验表明,这3个化合物对HepG2细胞均具有较明显的保护作用。结论:赤芍所含的芍药苷、棕榈酸乙酯和亚油酸乙酯具有潜在的护肝活性。
- 陆琳张萌王毅张玉峰赵筱萍
- 关键词：赤芍药效物质荧光标记
