河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目(2012GGJS166) 作品数:7 被引量:123 H指数:5 相关作者: 赵龙飞 徐亚军 闫永峰 曹冬建 李源 更多>> 相关机构: 商丘师范学院 河北大学 清华大学 更多>> 发文基金: 河南省高等学校青年骨干教师资助计划项目 国家自然科学基金 河南省教育厅科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 文化科学 更多>>
枸骨益生菌的筛选及其抑菌作用 被引量:10 2015年 采用涂布平板法分离药用植物枸骨可培养内生细菌,采用对峙法和发酵滤液培养法筛选对植物病原菌具高抑制作用的菌株,通过镜检和显微摄影观察处理组菌丝的变化,对16S r DNA PCR产物进行测序和同源性分析菌株的系统发育关系,通过形态、生理生化特征和16S r DNA序列比对确定菌株的分类地位.从枸骨健康植株的根、茎、叶及果实中分离得到85株内生细菌,筛选出对烟草赤星病菌、稻瘟病菌、棉花枯萎病菌等有较强抑菌作用的10株菌,初步鉴定为4属7种.其中,抑菌效果最强的GG78(60.3%)、GG31(48.1%)、GG3(61.0%)分别属于阴沟肠杆菌、路德维希肠杆菌和蜡样芽孢杆菌.受抑制病原菌菌丝均发生畸形、扭曲,局部膨大形成原生质浓缩球、菌丝基部出现毛发状细分支等现象,可能与内生菌分泌到胞外具有一定抑菌或杀菌作用的代谢物质如抗生素、水解酶类、生物碱等有关. 赵龙飞 徐亚军 赖心河 寇田超 闫俊利 周佩佩 范闪闪 闫永峰关键词:内生细菌 抑菌作用 代谢产物 生物技术专业创新人才培养模式优化与探讨 被引量:4 2014年 生物技术是现代生物学发展与相关科学交融的产物,是理论与实践并重的新型综合性学科。文章主要针对高校生物技术专业人才培养存在的问题,提出加强专业课程建设、提高教材建设水平、创新教学方法、强化实习环节等改革措施,以探讨生物技术专业的人才培养模式,旨在培养合格的生物技术专业应用型人才,适应社会的需求,服务地方区域经济。 赵龙飞 徐亚军关键词:生物技术 溶磷性大豆根瘤内生菌的筛选、抗性及系统发育和促生 被引量:51 2015年 对采自河南省不同地区的大豆根瘤进行内生菌分离纯化、溶磷性筛选试验。根据能否产生溶磷圈及溶磷圈直径(D)、菌落直径(d)和D/d值大小确定菌株溶磷能力,采用钼锑抗比色法测定培养液中有效磷含量;平板筛选法对筛选菌株进行耐盐性、耐酸碱、重金属等抗性测定,并对筛选菌株进行理化特性、16S r DNA、rec A序列和系统发育分析。结果表明,从分离纯化的324株内生菌中筛选出36株具有溶磷特性,其中20株有较强溶磷性。菌株DD291发酵液中可溶性磷含量最高(452 mg/L),发酵液p H与对照相比均有不同程度下降,最大降幅达2.92。大部分溶磷性内生菌具有较强耐盐碱性,对Pb2+、Cr6+和Cu2+有较高耐受性,对Ni2+和Hg2+抗性较弱。结合细胞形态、生理生化、16S r DNA、rec A序列和系统发育分析结果,菌株确定为Bacillus cereus,Enterobacter cancerogenus,E.cloacae和Pseudomonas putida。部分溶磷菌株对大豆的生长有促进作用,显示出潜在的应用前景。 赵龙飞 徐亚军 曹冬建 李源 厉静杰 吕佳萌 朱自亿 秦珊珊 贺学礼关键词:大豆 根瘤内生菌 抗性 系统发育分析 具ACC脱氨酶活性大豆根瘤内生菌的筛选、抗性及促生作用 被引量:43 2016年 【目的】从大豆根瘤中筛选具ACC(1-氨基环丙烷-1-羧基)脱氨酶活性的内生细菌,对活性菌株的抗盐碱性、系统分类地位以及代表菌株的促生长作用进行研究,为发掘和应用抗逆、促生优良菌种资源提供理论基础。【方法】以ACC作为唯一氮源测定菌株产ACC脱氨酶特性,采用标准曲线法测定α-丁酮酸含量,比色法定量测定ACC脱氨酶活力,固体平板筛选法对活性菌株进行抗性分析,通过菌体形态及生理生化特性测定、16S rRNA基因序列同源性分析鉴定菌株分类地位,采用盆栽试验验证代表菌株的促生作用。【结果】从河南省13个市(地区)36个点采集的大豆根瘤中筛选出8株ACC脱氨酶内生细菌,其中菌株DD132的酶活性最高(15.712 U/mg)。筛选菌株可耐受4%–6%NaCl,其中菌株DD165、DD132可耐受9%NaCl盐浓度。在pH 11时5株(DD14、DD132、DD67、DD141、DD131)生长良好,说明这些菌株有较强耐碱性。8株产ACC脱氨酶菌株分属于4属,即芽孢杆菌属(Bacillus)、肠杆菌属(Enterobacter)、寡养单胞菌属(Stenotrophomonas)和泛菌属(Pantoea)。接种试验表明内生菌DD132对小麦幼苗生长具有明显促生长作用。【结论】大豆根瘤内具ACC脱氨酶高活性菌株有较强耐盐碱性,其中菌株DD132对小麦幼苗生长有明显促生长作用。为发掘和应用抗逆、促生的优良菌种资源提供理论基础。 赵龙飞 徐亚军 常佳丽 李敏 张艳玲 党永杰 王梦思 程亚稳 张斌月关键词:ACC脱氨酶 根瘤内生菌 抗性 系统发育 促生作用 稻瘟病菌拮抗性大豆根瘤内生细菌的筛选及抑制效果 被引量:11 2016年 【目的】从河南大豆根瘤的内生细菌资源中筛选对稻瘟病菌有拮抗作用的菌株,初步探讨其抑菌效果,为进一步研究其抑菌机理提供菌种资源。【方法】以稻瘟病菌为供试病原菌,采用对峙法进行拮抗性菌株筛选,显微观察法研究受抑制病原菌菌丝变化,对筛选拮抗性菌株进行细胞形态学及生理生化特性试验、16S rRNA基因测序和系统发育分析及接种防效试验。【结果】经复筛有17株内生菌拮抗效果较明显,最高抑制率为62.16%;受抑制病原菌丝呈现弯曲打结、断裂、原生质浓缩等畸形状态。拮抗性筛选过程中内生菌快速生长形成生物薄膜,包埋菌丝并使其断裂。拮抗菌株分布在7属9种,稻瘟病拮抗性大豆根瘤内生菌呈现种属多样性。防效试验表明内生菌处理组稻苗发病率和病情指数均显著降低,防治效果最高达74.19%。【结论】大豆根瘤内生拮抗性菌株具有种属多样性,拮抗性菌株处理组稻苗发病率和病情指数均显著降低,防治效果显著,为进一步研究其抑菌机理提供菌种资源。 赵龙飞 徐亚军 彭顶华 赵瑞英 陈乐乐 刘备备关键词:大豆 稻瘟病菌 根瘤内生菌 拮抗作用 植物病原菌拮抗性山药内生菌的筛选和特性研究 被引量:1 2013年 通过研磨法和平板涂布法对山药根状茎不同部位的内生菌进行分离,共获34株菌,并对其作病原真菌拮抗性筛选,对筛选出的菌株作了菌体大小、革兰氏染色、芽孢染色、生长曲线等生物学特性分析。结果表明:经初筛有7株菌具明显的抑菌作用,经复筛有4株内生菌对棉花枯萎病和烟草赤星病菌兼有明显的抑菌效果,最大抑制率分别为42.47%和35.29%,这4株菌分离自铁棍山药根状茎的中部、底部。生物学分析表明,HNSQSY30、HNSQSY32呈丝状,属放线菌类;菌株HNSQSY13呈球状,而HNSQSY16、HNSQSY22菌体呈杆状,长2.5~5.9μm,且有芽孢,属于细菌类。抑制病原菌内生菌的筛选和研究为开发生物农药、防治植物疾病的发生,维持农业的可持续发展将有重要的意义。 赵龙飞 闫永峰关键词:山药 内生菌 植物病原菌 植物病原菌拮抗性野生艾蒿内生菌的分离、筛选和鉴定 被引量:22 2013年 从野生艾蒿的根茎叶部位分离出内生细菌共68株,以棉花枯萎病、稻瘟病、烟草赤星为供试病原菌,采用对峙法对内生菌分别进行抑菌试验,对筛选出的菌株进行了16S rDNA序列测定和系统发育分析。结果表明:从野生艾蒿分离到的内生菌经初筛、复筛,获得抑制病原菌效果最明显的3株菌,结合生理生化特性、菌落特征、细胞形态特征和16S rDNA测序分析结果,菌株L8、S11和R6分别鉴定为Bacillus subtilis,Bacillus cereus,Paenibacillus polymyxa。拮抗实验表明,棉花枯萎病原菌菌丝发生弯曲、打结,烟草赤星的受作用菌丝生长端分枝明显增多,生长端边缘呈珊瑚状分枝,并且出现明显的畸形和萎缩现象。分析表明,可能是由于在培养过程中内生菌产生了化感物质,对病原菌的菌丝产生抑制作用的结果。 徐亚军 赵龙飞 陈普 蒋晓瑞 韦革宏关键词:内生细菌 植物病原菌 抑菌作用 芽孢杆菌属