国家自然科学基金(30370662)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 相关作者：孙脊峰杜德伟杨洁李占亭杨安钢更多>>
- 相关机构：第四军医大学唐都医院第四军医大学生物化学与分子生物学教研室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 缺氧调控载体功能活性的研究被引量：1
- 2007年
- 目的构建具有缺氧调控活性的基因治疗载体,其表达可由缺氧选择性诱导,用于转导基因的可控性表达。方法合成各种缺氧应答基因的缺氧应答元件（HRE）寡核苷酸序列,与巨细胞病毒（CMV）启动子组合,驱动荧光素酶报告基因和治疗基因人红细胞生成素（hEPO）的转录。检测荧光素酶的活性和hEPO的表达以确定其缺氧转录活性。结果在各种缺氧调控载体中,由鼠磷酸甘油酸激酶（mPGK）的HRE与CMV启动子组合而成的缺氧应答启动子显示出高缺氧应答性,而且缺氧诱导的表达水平与完整的CMV启动子在常氧环境下的转录水平相近。结论3HRE/mPGK/CMV缺氧调控载体对于实现治疗基因的精确调控表达可能非常有用。
- 杨洁张翔陈锐杜德伟李占亭赵晶杨安钢孙脊峰
- 关键词：转录荧光素酶报告基因
- 缺氧调控报告载体的构建与鉴定被引量：3
- 2006年
- 目的:构建能用来检测缺氧应答启动子转录调控作用的萤火虫荧光素酶报告载体.方法:合成缺氧应答元件(HRE)的寡核苷酸序列及其突变对照,克隆入pCIneo,构建HRE/CMV重组载体.然后采用PCR方法将HRE/CMV启动子定向亚克隆入pGL3Basic.结果:酶切和测序鉴定分析,所克隆的基因产物酶切结果与预期值一致,序列无碱基的突变.结论:成功构建了缺氧应答启动子的荧光素酶报告载体,为进一步研究其缺氧调控作用提供了条件.
- 杨洁李占亭杜德伟柴青焕王丽张惠中孙脊峰
- 关键词：转录缺氧反应元件荧光素酶报告基因
- 开发缺氧调控载体用于肾性贫血的基因治疗被引量：2
- 2007年
- 目的:开发具有缺氧调控活性的基因治疗载体,其表达可由缺氧选择性诱导,用于肾性贫血的逆转和治疗。方法:合成源于各种缺氧应答基因的缺氧应答元件(HRE)寡核苷酸序列,与CMV启动子连接组合,测定荧光素酶的相对活性以确定缺氧转录活性。结果:在各种缺氧调控载体中,由鼠PGK(mPGK)基因的HRE序列和CMV启动子组合成的缺氧应答启动子显示出14.6倍的高缺氧应答性,而且缺氧诱导的表达水平与完整的CMVI.E启动子在常氧环境下的转录水平相近。结论:3HRE/mPGK/CMV缺氧调控载体对于肾性贫血等一系列疾病实现目的基因的精确调控表达可能非常有用。
- 杨洁杜德伟李占亭贾林涛赵晶许彦鸣杨安钢孙脊峰
- 关键词：转录荧光素酶报告基因
