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链球菌致热外毒素SpeB致病性研究进展被引量：4: 2012年; 链球菌致热外毒素B（Streptococcal exotoxin B,SpeB）是A群链球菌（group A Streptococcus,GAS）以酶原形式分泌到胞外后形成的活性巯基蛋白酶。其能降解宿主胞外基质、免疫球蛋白和补体成分以及GAS自身表面黏附素M蛋白、F1蛋白、C5a肽酶和其他一些分泌蛋白,破坏宿主防御系统,帮助细菌逃避免疫清除，协助GAS最初感染部位的扩散和入侵宿主深层组织。; 张波李学如江南屏任瑶瑶; 关键词：A族链球菌免疫病原菌

链球菌烯醇化酶与致热外毒素B成熟的相关性被引量：2: 2013年; 在化脓性链球菌致热外毒素B(SpeB)活性阳性菌株对数生长末期的细胞培养液中发现1个分子量约为50000的蛋白,该蛋白随后消失;用聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分离,串联质谱(MS/MS)分析确认该蛋白为链球菌烯醇化酶(Enolase,Eno);通过基因敲除方法构建eno基因缺失突变株,研究了Eno蛋白对SpeB活性形成的影响.结果表明,eno基因的缺失推迟SpeB成熟的时间;通过Far-Western blot分析显示,Eno与SpeB之间能发生相互作用.考虑到化脓性链球菌胞外蛋白通过同一通道分泌,推测Eno可能参与了SpeB酶原分泌到胞外的过程,为新发现的SpeB蛋白分子伴侣.; 胡珊马超李学如黎明刘彦宏江南屏郭泰林姚宁; 关键词：烯醇化酶化脓性链球菌

构建无抗性标记双拷贝透明质酸合成酶基因工程菌被引量：1: 2012年; 【目的】探讨一种构建无抗生素选择标记链球菌透明质酸合成酶基因工程菌的方法。【方法】PCR扩增链球菌透明质酸合成酶操纵子hasABC基因,用温度敏感载体pJR700构建携带hasABC基因重组质粒pXL32;电转化pXL32质粒到马链球菌兽疫亚种感受态细胞,卡那霉素(Kanamycin,kan)平板37℃培养筛选重组子,在不含kan液体培养基中30℃传代,37℃平板分离挑取抗生素敏感菌落,RT-PCR检测工程菌染色体hasABC基因表达,Bitter-Muir法测定菌体透明质酸含量。【结果】在无抗生素选择压力条件下,获得透明质酸产率提高34%的马链球菌兽疫亚种透明质酸合成酶基因工程菌。【结论】用pJR700温度敏感载体系统,构建能提高透明质酸产量的无抗生素选择标记的基因工程菌是可行的。; 蓝小玲张波李学如李尧郭泰林孟涛任瑶瑶江南屏; 关键词：马链球菌兽疫亚种

化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白的制备: 2016年; 生物信息分析化脓性链球菌溶血素O(streptolysin O,Slo)蛋白结构表明,Slo蛋白除含有由461氨基酸残基组成的溶血活性结构域Thiol_cytolysin外,在N端还有一跨膜结构域。利用pET101-GENE蛋白表达系统,成功构建出表达具有Slo活性重组蛋白的重组子,采用镍柱亲和层析分离技术,纯化目的蛋白;纯化蛋白SDS-PAGE检测分析表明,重组蛋白与预测的溶血活性结构域的分子量相一致;溶血实验显示,纯化重组蛋白具有溶血活性。以纯化的重组蛋白为免疫原,对大鼠进行4次免疫,所获得免疫血清经Elisa检测,抗Slo血清效价达到1∶12 800;Western blot检测猪链球菌、马链球菌和化脓性链球菌中的链球菌溶血素结果显示,抗Slo多克隆抗体仅能与化脓性链球菌溶血素O发生反应,表明研究制备的化脓性链球菌溶血素O活性结构重组蛋白抗原具有较好的特异性,所制备的抗原Slo可用于进一步开发抗链球菌溶血素O(ASO)试剂盒。; 杨思源潘敬梅王硕邓开轩邓强黄新河李学如; 关键词：化脓性链球菌多克隆抗体

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国家自然科学基金(31070117)