上海市卫生局青年科研基金(2008Y029)
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
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- 不同温度对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤的影响
- 2010年
- 目的探讨不同温度对小鼠肾脏急性缺血再灌注损伤(IRI)的影响及其机制。方法雄性C57BL/6N小鼠随机分为假手术组(sham组)、轻度低温IRI组(LTI)、常温IRI组(NTI)和高温IRI组(HTI)。采用夹闭双侧肾蒂35min再灌注48h制成IRI模型。观察IRI小鼠肾脏组织病理学改变,检测肾功能、肾组织丙二醛(MDA)含量和肾小管上皮细胞凋亡数目。结果与Sham组相比,常温IRI组小鼠发生中等程度肾损伤,其Scr升高(237.0±41.2)μmol/L,肾组织形态学改变,肾组织中MDA含量升高(1.54±0.37)μmol·L-1·mg-1,肾小管上皮细胞凋亡数目增加。高温明显加重小鼠的IRI损伤(P<0.05),轻度低温对小鼠IRI具有保护作用。结论缺血阶段体温的高低明显影响小鼠肾IRI的程度,轻度低温可能通过抑制脂质过氧化反应和细胞凋亡对小鼠发挥保护作用;高温则可能通过促进脂质过氧化反应和细胞凋亡加重肾IRI。
- 张晓丽夏世金严震文肖婧张振兴叶志斌
- 关键词：肾脏缺血再灌注凋亡
- 二甲基乙二酰基甘氨酸对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞损伤的保护作用及其机制被引量：2
- 2010年
- 目的通过脯氨酸羟化酶抑制剂二甲基乙二酰基甘氨酸（DMOG）稳定缺氧诱导因子1α（HIF—1α）表达，探讨其对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞（HKC）损伤的保护作用及其机制。方法制作无糖缺氧复氧细胞损伤模型，用不同浓度的DMOG预处理，锥虫蓝染色和乳酸脱氢酶（LDH）活性方法检测细胞活力及损伤；AnnexinV和PI染色流式细胞仪技术检测细胞凋亡；实时荧光定量PCR方法检测红细胞生成素（EPO）、热休克蛋白70（HSP70）和血红素氧合酶1（HO—1）mRNA的表达；Western印迹法检测HIF—1α、活性caspase-3和Bcl-2蛋白表达。结果正常情况下HKC细胞内几乎无HIF-1α蛋白表达，DMOG刺激6h后HIF-10【蛋白及其靶基因EPO、HSP70和HO-1mRNA表达均显著上调（均P〈0．01），且呈浓度依赖性。500μmol／L或1mmol／LDMOG预处理可明显改善缺氧复氧诱导的细胞损伤，表现为细胞存活率升高（95．6％±1．8％、96．1％±1．0％比83．3％±3．1％）；培养上清液中LDH活性下降；细胞凋亡减少（8．6％±2．7％、6．1％±2．3％比19．2％±4．0％）（均P〈0．05）。另外，细胞内活性caspase-3蛋白表达显著下调，而Bcl-2蛋白表达则显著上调（均P〈0．05）。结论DMOG预处理可稳定肾小管上皮细胞内HIF—1α表达，对缺氧复氧诱导的肾小管上皮细胞损伤具有-定保护作用。其机制可能与促进EPO、HSP70和HO—1表达，抑制caspase-3活化，上调Bcl-2表达有关。
- 张晓丽盛蔚文陈伟军肖婧张振兴叶志斌
- 关键词：肾小管上皮细胞缺氧复氧损伤
- 脯氨酸羟化酶抑制剂对人肾小管上皮细胞缺氧/复氧损伤的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨脯氨酸羟化酶抑制剂——二甲基乙二酰基甘氨酸(DMOG)通过稳定人肾小管上皮细胞(HKC)中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达抗缺氧/复氧损伤(HRI)的作用及其机制。方法无糖缺氧12 h,复氧6 h制作HKC细胞HRI模型,分别于缺氧前2、4、6、12 h给予DMOG预处理,四甲基偶氮唑蓝比色法(MTT法)检测细胞增殖活性,试剂盒检测细胞培养液中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,Annexin/PI染色流式细胞仪技术检测细胞凋亡,实时荧光定量PCR方法检测bcl-2和bax mRNA的表达,Western印迹检测HIF-1α、bcl-2和bax蛋白的表达。结果 DMOG预处理使HKC中HIF-1α表达增加,细胞损伤明显改善,表现为细胞增殖活性提高,培养上清液中MDA含量下降、SOD活性增强,细胞凋亡率下降(P<0.05);同时baxmRNA和蛋白表达下调(P<0.05),bcl-2 mRNA和蛋白表达上调(P<0.05)。结论 DMOG可通过稳定HIF-1α,影响凋亡相关基因的表达,改善HRI诱导的HKC细胞损伤。
- 张晓丽司徒碧颖肖婧张振兴叶志斌
- 关键词：低氧诱导因子肾小管上皮细胞
