深圳市科技计划项目(200702112)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 分泌性表达融合蛋白CFP10-ESAT6重组卡介苗构建研究
- 2009年
- 目的构建分泌表达融合蛋白CFP10-ESAT6的重组卡介苗。方法采用基因拼接(Gene SOEing)法,体外扩增结核杆菌CFP10-ESAT6融合基因,插入大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pBCG3000,构建重组穿梭表达质粒pBCG3000-CFP10-ESAT6,用电穿孔法将pBCG3000-CFP10-ESAT6质粒转化BCG细胞,得到重组卡介苗,热诱导表达CFP10-ESAT6融合蛋白,SDS-PAGE电泳观察CFP10-ESAT6融合蛋白的表达,Westernblot鉴定其生物活性。结果经PCR、酶切及测序鉴定,证实成功构建重组质粒pBCG3000-CFP10-ESAT6,经热诱导表达出约22kDa的CFP10-ESAT6蛋白,可分别被鼠抗ESAT6血清、鼠抗CFP10血清识别。结论分泌性表达融合蛋白CFP10-ESAT6的重组卡介苗构建成功。
- 张红宇李晓恒范兴罗道泉吴少庭
- 关键词：融合蛋白CFP10ESAT6重组卡介苗
