国家自然科学基金(30370654)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 低盐诱导的致密斑细胞环氧化酶2表达与p38丝裂素激活蛋白激酶信号通路被引量：6
- 2006年
- 目的探讨低盐(LS)培养对小鼠致密斑细胞(MMDD1)环氧化酶2(COX-2)表达、前列腺素E2(PGE2)释放的诱导作用及p38丝裂素激活蛋白激酶(MAPK)信号通路的调控作用。方法采用RT-PCR和免疫印迹方法检测正常盐(NS)与LS培养对MMDD1细胞COX-2表达的影响。用ELISA法检测上清液PGE2的含量。用免疫印迹检测细胞内p-p38 MAPK表达的变化。结果与NS培养相比,LS培养均能诱导MMDD1细胞COX-2 mRNA和蛋白表达增加(16 h时高峰mRNA 0．94±0．12比0．26±0．09,28 h时高峰蛋白0．59±0．02比0．25±0．07,P均< 0．01);PGE2分泌各时间点均显著升高,于24 h达高峰[(644．33±26．54)ng／L比(224．0±18．33) ng／L,P<0．01]。LS培养后,MMDD1细胞内p38MAPK的磷酸化程度显著上调,180 min时较高(从0．17±0．01升至0．28±0．01,P<0．01)。20μmol／L p38抑制剂SB-203580下调LS诱导的COX-2蛋白表达(从0．58±0．01降至0．19±0．02,P<0．01)。结论低盐培养促进MMDD1细胞COX-2的表达和PGE2的分泌。p38 MAPK激活介导了低盐诱导的MMDD1细胞COX-2表达。
- 刘冬妍李学旺李航文煜冰段琳李艳
- 关键词：环氧化酶2前列腺素E类P38丝裂原活化蛋白激酶类MAP激酶信号系统
- 致密斑细胞COX-2的表达及AP-1、NFκB信号通路
- 2007年
- 目的评估低盐(LS)培养对小鼠致密斑(MMDD1)细胞环氧化酶-2(COX-2)表达及核因子-κB(NF-κB)和活化蛋白-1(AP-1)活性的影响。方法经脂质体转染含NF-κB或AP-1的报告质粒,采用瞬时表达方法检测正常盐(NS)与LS培养对NF-κB和AP-1转录活性的影响。采用RT-PCR检测MMDD1细胞COX-2表达的变化,Westernblot方法检测细胞内p-p38MAPK、p-p44/42、c-Jun、c-Fos和COX-2蛋白的表达。结果LS培养促进了MMDD1细胞COX-2mRNA和蛋白表达(P<0.01)。LS培养后,p38和p44/42的磷酸化程度显著上调(P<0.01),180min后达到高峰。p38抑制剂SB-203580、p44/42抑制剂PD-98059可降低LS诱导的COX-2表达(P<0.01)。LS培养促进了c-Jun、c-Fos蛋白表达(P<0.01),激活了AP-1和NF-κB的转录活性(P<0.01)。25μmol/LNF-κB抑制剂PDTC和20μmol/LAP-1抑制剂curcumin下调了LS诱导的NF-κB、AP-1活性(P<0.01)。25μmol/LPDTC、20μmol/Lcurcumin降低了LS诱导的COX-2mRNA和蛋白表达(P<0.01)。结论LS培养可促进MMDD1细胞COX-2的表达,其作用可能与促进p38MAPK、p44/42激酶的磷酸化,增加NF-κB和AP-1的活性有关。
- 刘冬妍李学旺李航李雪梅叶文玲
- 关键词：环氧化酶-2核因子-KB活化蛋白-1丝裂素激活蛋白激酶
- 低盐通过激活ERK和AP-1通路诱导小鼠致密斑细胞系COX-2的表达被引量：2
- 2007年
- 目的探讨低盐培养对小鼠致密斑(mouse macula densa derived cells,MMDD1)细胞环氧化酶-2(cyclooxygen-ase,COX-2)表达和p44/42激酶(ERK)、AP-1活性的影响。方法经脂质体转染含AP-1的报告质粒,采用瞬时表达方法检测AP-1转录活性;RT-PCR检测MMDD1细胞COX-2的表达;免疫印迹方法检测细胞内p-p44/42、C-JUN、C-FOS和COX-2蛋白的表达。用ELISA法检测上清液PGE2的含量。结果低盐(LS)培养促进MMDD1细胞COX-2mRNA和蛋白表达。培养后ERK的磷酸化程度显著上调,180min达到高峰;ERK抑制剂PD-98059降低LS诱导的COX-2表达和PGE2分泌;LS培养促进C-JUN、C-FOS蛋白表达,激活AP-1的转录活性。AP-1抑制剂curcumin(20μmol/L)下调LS诱导的AP-1活性、COX-2mRNA和蛋白表达。结论LS促进MMDD1细胞COX-2的表达,其作用可能与促进ERK的磷酸化、增加AP-1的活性有关。
- 刘冬妍李学旺李航李雪梅
- 关键词：COX-2PGE2AP-1ERK
