国家教育部博士点基金(20111401110011) 作品数:11 被引量:30 H指数:2 相关作者: 李卓玉 宋莉 单树花 李宗伟 武海丽 更多>> 相关机构: 山西大学 太原师范学院 山西医科大学 更多>> 发文基金: 国家教育部博士点基金 国家自然科学基金 山西省国际科技合作计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
地皮菜水应激蛋白对结肠癌DLD1细胞黏附的影响 被引量:3 2015年 目的探讨地皮菜水应激蛋白(water stress proteins,WSP1)对结肠癌DLD1细胞-细胞、细胞-基质之间黏附的影响和分子机制。方法结肠癌细胞DLD1经WSP1处理后,利用细胞黏附实验检测DLD1细胞-细胞、细胞-基质之间黏附的影响。利用real time PCR和Western blot技术检测DLD1细胞内E-cadherin、N-cadherin、vimentin和integrinβ1 mRNA和蛋白的表达情况。结果经WSP1处理DLD1细胞后,DLD1细胞-细胞黏附率升高(P<0.01),细胞-基质黏附率降低(P<0.01),E-cadherin表达水平升高,N-cadherin,vimentin和integrinβ1表达水平降低。结论 WSP1能够促进DLD1细胞间黏附并降低细胞-基质间黏附,进而抑制结肠癌细胞的侵袭和浸润。 郭松佳 郭向荣 单树花 武海丽 赵良启 李卓玉关键词:结肠癌 Gli1与β-catenin相互作用促进二者在结肠癌细胞中的协同核输入(英文) 被引量:1 2014年 Wnt信号通路和Hedgehog(Hh)信号通路在胚胎和干细胞的发育中发挥重要作用.此外,这两条信号途径在结肠癌复发和浸润的过程也至关重要.然而,Wnt信号通路、Hedgehog信号通路二者之间具体的交互作用机制目前仍不清楚.本文发现,这两条途径的关键分子Gli1和β-联蛋白之间存在蛋白质相互作用.Gli1与β-联蛋白之间的分子相互作用有助于二者的核输入.同时发现,在肠癌细胞系中,Gli1与β-联蛋白协同上调表达.Li Cl激活细胞Wnt信号通路使Gli1表达水平增加,RNA干扰抑制Wnt信号通路,Gli1的表达水平下降.同时,Gli1的过表达也提高了细胞内β-联蛋白的表达水平,并且用Hedgehog信号通路抑制剂GANT61处理细胞,降低Gli1的表达后细胞内β-联蛋白的表达相应下降.本研究揭示了Gli1和β-联蛋白的相互作用及二者协助核输入在Wnt、Hedgehog信号通路交互调节中发挥重要作用,Wnt、Hedgehog信号通路交互作用为大肠癌发生发展研究提供了细胞水平交互调控机制. 李文玲 任桦 宋莉 李卓玉 朱镭 郭素堂 祝文思关键词:相互作用 GLI1 WNT信号通路 HEDGEHOG信号通路 结肠癌 低浓度p,p'-滴滴涕对大肠腺癌SW620细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2 2015年 目的探讨低浓度p,p'-滴滴涕暴露对大肠癌SW620细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法用p,p'-滴滴涕1×10-12~1×10-6mol·L-1作用于SW620细胞48和96 h后,采用MTT实验检测细胞存活率。用p,p'-滴滴涕1×10-10,1×10-9和1×10-8mol·L-1处理SW620细胞96 h后,用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率。Western蛋白质印迹法检测Wnt/β-连环蛋白信号通路成员β-连环蛋白、磷酸化β连环蛋白和磷酸化糖原合成酶激酶3β,下游靶蛋白c-Myc和细胞周期蛋白D1,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、胱天蛋白酶原8和胱天蛋白酶原3表达水平。结果 p,p'-滴滴涕1×10-12~1×10-7mol·L-1作用96 h,明显促进SW620细胞存活(P〈0.01);p,p'-滴滴涕1×10-10,1×10-9和1×10-8mol·L-1处理SW620细胞96 h,与对照组相比,G1期细胞百分率显著减少(P〈0.01),S期细胞百分率显著增加(P〈0.01),细胞凋亡率显著降低(P〈0.01);Wnt/β-连环蛋白信号通路成员β-连环蛋白和磷酸化糖原合成酶激酶3β以及下游靶蛋白c-Myc和细胞周期蛋白D1水平显著升高(P〈0.01),磷酸化β连环蛋白水平显著降低(P〈0.01);凋亡相关蛋白Bcl-2、胱天蛋白酶原8和胱天蛋白酶原3表达显著升高(P〈0.01),Bax表达和胱天蛋白酶3活性显著降低(P〈0.01)。结论低浓度p,p'-滴滴涕可能通过激活Wnt/β-连环蛋白信号通路及影响凋亡相关蛋白表达,进而促进SW620细胞增殖,抑制SW620细胞凋亡。 刘建新 赵君宇 晋小婷 李卓玉 宋莉关键词:Β-连环蛋白 p,p'-DDT对大肠癌细胞DLD1细胞黏附的影响 被引量:2 2014年 为了探讨p,p'-DDT对大肠癌细胞黏附的影响及机制,以肠癌细胞DLD1为试验材料,采用细胞聚集试验、细胞与基质间黏附分析方法,研究了1 nmol/L的p,p'-DDT作用于DLD1细胞48 h后,p,p'-DDT对DLD1细胞-细胞黏附和细胞-基质黏附的影响。通过Real time PCR和Western blot方法检测了细胞黏附关键因子E-cadherin、CD29的表达变化。结果表明:1 nmol/L的p,p'-DDT作用于DLD1细胞48 h后,DLD1细胞-细胞黏附率明显降低(p<0.01),细胞-基质黏附率明显升高(p<0.01);1 nmol/L的p,p'-DDT作用于DLD1细胞48 h后,降低了E-cadherin的表达水平,同时提高了CD29的表达水平。研究表明,p,p'-DDT具有降低DLD1细胞-细胞黏附并提高其细胞-基质黏附的作用。p,p'-DDT可能通过改变黏附关键因子E-cadherin和CD29的表达来影响细胞黏附,进而促进肿瘤细胞的浸润和侵袭。 赵君宇 刘建新 晋小婷 贾慧 贾丹 李丹丹 李卓玉 宋莉关键词:环境学 粟糠活性大分子对人结肠癌细胞凋亡的影响 寻找疗效高、毒性低的天然抗癌成分,一直是国内外医学界研究的热点。大量研究表明,许多天然产物中含有低毒、高效的抗肿瘤活性成分,如一些小分子物质:黄酮、生物碱类、挥发油类、萜类、苷类等。近年来随着分子生物学、分子肿瘤学、现代... 单树花 武海丽 李宗伟 史通麟 赵亚蕊 赵超 付荣 李卓玉关键词:结肠癌 细胞增殖 细胞凋亡 结肠腺瘤息肉蛋白突变经PI3K/AKT信号通路影响犬肾细胞MDCK的细胞粘附(英文) 2014年 结肠腺瘤息肉蛋白(APC)是一个肿瘤抑制因子,它不仅参与Wnt信号通路的传导,而且对细胞粘附、细胞骨架的组织和迁移等都有影响.APC突变发生于大多数结肠癌中.为了探讨APC突变对细胞粘附的影响及机制,本研究利用细胞粘附实验分析了MDCK-APC-N1和对照MDCK-GFP稳定表达细胞株系的细胞粘附情况.实验结果显示,在MDCK细胞中过表达APC-N1导致细胞-细胞间的粘附减少,细胞-基质间的粘附增加.荧光定量PCR和Western印迹实验表明,在MDCKAPC-N1细胞中,E-cadherin表达水平降低,CD29、P-FAK(Y397)、β-catenin和P-AKT(T308)表达水平升高.在MDCK-APC-N1细胞中,敲减β-catenin导致E-cadherin表达量升高,而CD29表达没有明显变化.进一步利用PI3K抑制剂LY294002处理MDCK-APC-N1细胞,结果发现,E-cadherin表达量明显升高,CD29表达量明显降低.这些结果揭示,APC-N1可活化PI3K/AKT信号通路,进而改变粘附蛋白E-cadherin和CD29影响细胞粘附. 宋莉 尉文霞 常姣 李卓玉关键词:P13K AKT信号通路 地皮菜中一种新型水应激蛋白基因的克隆表达及其抗人结肠癌细胞SW480的作用 被引量:1 2014年 利用聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增出地皮菜(Nostoc commune Vauch.)一种新型水应激蛋白(water stress protein,WSP)的基因(GenBank序列号:KF003026),连接到原核表达载体pET28a上,测序鉴定后转化入大肠杆菌BL21,获得一种新型水应激蛋白表达工程菌;经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达及镍离子亲和层析柱(Ni-NTA)纯化后,得到了带6×His标签、分子质量大小为40 kD的可溶性目的蛋白,称其为重组水应激蛋白1(recombinant water stress protein 1,Re-WSP1)。细胞增殖抑制实验结果表明,Re-WSP1蛋白可以抑制结肠癌细胞SW480的增殖,而对正常结肠上皮FHC细胞无明显作用;DAPI细胞核染色结果表明,该蛋白能够诱导SW480细胞凋亡小体的形成;Western blotting结果显示,Re-WSP1蛋白能够促进Procaspase-3和Procaspase-8的活化剪切。以上结果表明:Re-WSP1蛋白能够明显的抑制结肠癌SW480细胞的增殖,并可能通过Caspase依赖途径诱导SW480细胞凋亡。 郭松佳 单树花 晋小婷 李宗伟 宋莉 李卓玉关键词:结肠癌 细胞凋亡 腺瘤性结肠息肉(APC)蛋白截短突变对MDCK细胞中细胞-基质和细胞-细胞间黏附的影响(英文) 被引量:2 2013年 目的探讨腺瘤性结肠息肉(adenomatous polyposis coli,APC)蛋白截短突变对MDCK细胞中细胞-细胞和细胞-基质之间黏附的影响及机制。方法应用细胞黏附测定实验检验MDCK-N2-APC及MDCK-GFP稳定表达株系的黏附率。相对于对照细胞MDCK-GFP,MDCK-N2-APC细胞为稳定突变株,表达APC蛋白N端449-781氨基酸片段。免疫荧光染色、荧光定量PCR及Western blot测定在细胞黏附过程中发挥重要作用的黏附分子(CD29、E-cadherin)的表达情况。结果与对照细胞相比,N2细胞-基质之间黏附率增加,平均升高约180%,而细胞-细胞间黏附率约下降30%。在MDCK-N2-APC细胞中CD29的表达水平增加,E-cadherin的表达水平降低。结论 APC蛋白在细胞-基质及细胞-细胞间黏附中发挥重要作用。其截短突变片段N2可能通过改变CD29和E-cadherin等黏附分子的表达量来影响细胞黏附,进而影响细胞的侵袭和浸润。 李文玲 祝文思 牛海波 朱峰 宋莉 李卓玉小米米糠中抗癌细胞增殖活性蛋白的分离纯化 被引量:13 2013年 采用丙酮沉淀、硫酸铵沉淀、Q阴离子交换柱、SP阳离子交换柱、蛋白热变性法对小米米糠蛋白进行逐步分离纯化,并结合细胞增殖抑制实验(MTT法),筛选纯化出小米米糠中抗肿瘤活性蛋白(FMB)。体外抗肿瘤活性实验表明:不同质量浓度(0.025、0.05、0.075、0.1μg/μL)的FMB均可抑制人结肠癌细胞株DLD1和人宫颈癌细胞株HeLa的增殖,并且具有明显的剂量依赖性;而对正常人肝细胞HL-7702无明显抑制作用。倒置显微镜下观察细胞形态特征发现:经FMB处理48h后,DLD1和HeLa细胞出现细胞核明显皱缩、部分细胞漂浮死亡等凋亡特征;而对正常肝细胞株HL-7702无明显影响。 单树花 武海丽 李宗伟 袁琳洁 赵文彬 刘庆午 郭茂林 李卓玉关键词:分离纯化 增殖活性 靶向肿瘤细胞表面GRP78的胰蛋白酶抑制剂对结肠癌细胞增殖的影响 葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)是位于细胞内质网中的重要分子伴侣蛋白。GRP78在肿瘤细胞中通常发生过表达,促进多个肿瘤恶性特征的形成。值得关注的是,肿瘤细胞中的... 赵超 付荣 彭亚男 史通麟 单树花 李卓玉 李宗伟关键词:胰蛋白酶抑制剂 细胞增殖