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中国博士后科学基金(20080441162)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：齐宗利孙晓聪王东阳夏海滨边晔更多>>
相关机构：陕西师范大学更多>>
发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇生物学

主题

  • 1篇抑素
  • 1篇肿瘤
  • 1篇肿瘤抑素
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇腺病毒科
  • 1篇RGD
  • 1篇TUMSTA...
  • 1篇EGFP

机构

  • 1篇陕西师范大学

作者

  • 1篇赵俊丽
  • 1篇边晔
  • 1篇夏海滨
  • 1篇王东阳
  • 1篇孙晓聪
  • 1篇齐宗利

传媒

  • 1篇解放军医学杂...

年份

  • 1篇2010
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
RGD修饰携带tumstatin及eGFP新型腺病毒载体的构建及其表达研究
2010年
目的构建RGD修饰表达绿色荧光蛋白（eGFP）和肿瘤抑素（tumstatin）的新型腺病毒载体。方法PCR扩增tttrnstatin基因，经克隆后构建pAd5CMV／tumstatin穿梭载体。重叠PCR方法将RGD序列插入到Ad5纤维蛋白的HI环中，获得pMfiber-RGD穿梭载体。穿梭载体与腺病毒骨架载体线性化后共转化EcoliBJ5183，构建pAd-RGD-eGFP骨架载体。最后，使用磷酸钙法将pAd5-CMV／tumstatin穿梭载体和pAd-RGD-eGFP骨架载体共转化HEK293细胞。7-10d后收集细胞裂解物得到Ad—RGD-tumstatin／eGFP病毒。将经过修饰的Ad-RGD-tumstatin／eGFP和未修饰的Ad—WT-tumstatin／eGFP病毒分别感染脑胶质瘤U87MG细胞（病毒剂量分别为1、10、100Vp／细胞），通过观察其荧光强度评估其感染效率。以上两种病毒分别感染HeLa细胞，并分别采用RT-PCR及Western blotting检测tumstatin细胞mRNA及培养上清中蛋白的表达水平。结果病毒感染48h后，可观察到修饰后的腺病毒Ad-RGD-tumstatin／eGFP对U87MG细胞的感染效率明显高于未修饰的腺病毒斛WT-tumstatin／eOFP。RT-PCR及Western blotting可检测到感染Ad-RGD-tumstatin／eGFP后的HeLa细胞中tumstatin的转录和表达。结论成功构建经RGD修饰并表达tumstatin和eGFP基因的新型腺病毒载体，为进一步研究turnstatin在低表达柯萨奇一腺病毒受体的肿瘤中的作用奠定了良好基础。
齐宗利王东阳边晔赵俊丽孙晓聪夏海滨
关键词：RGD腺病毒科肿瘤抑素
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