国家自然科学基金(30672039)
- 作品数：7 被引量：10H指数：3
- 相关作者：沈晨阳张小明宣成睿李清乐焦洋更多>>
- 相关机构：北京大学内蒙古医学院内蒙古医科大学更多>>
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- 趋化素样因子1对血管平滑肌细胞核因子-κB的影响被引量：2
- 2011年
- 目的应用重组腺病毒载体介导的趋化素样因子1（CKLFl）基因转染大鼠血管平滑肌细胞（SMC），观察CKLFI对SMC内核因子（NF）一KB活性的影响。方法用腺病毒介导的CKLFl以不同时间梯度转染刺激SMC，采用免疫细胞化学、荧光定量聚合酶链反应（PCR）和Westernblot等方法分析细胞内CKLF1和NF—KB激活表达：结果静息状态下SMC中NF—KB有基础表达量，经CKLF1刺激后2～14d，其活性迅速增加，免疫细胞化学染色细胞质和核呈棕色，CKLF1荧光定量PCR和Westernblot结果分别为1．050±0．0681、3．3090±0．1523、2．854±0．1219、1．705±0．0944、1．435±0．0858和1．186±0．061、2．264±0．185、2．397±0．149、1．617±0．101、1．381±0．033，与对照组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。NF—KB的Westernblot结果为1．184±0．111、2．046±0．221、1．747±0．068、1．4984-0．051、1．412±0．087，与对照组比较5～14d差异有统计学意义（P〈0．05）。两组刺激后5～8d为表达高峰期，且NF—KB活性与CKLFI表达量间明显相关。结论CKLF1可导致NF—KB表达增加并随刺激时间梯度改变，提示NF—KB信号通路可能参与了CKLF1对SMC的增殖和迁移作用。
- 张韬沈晨阳李清乐周冰莹张小明
- 关键词：趋化素样因子1核因子-KB血管平滑肌细胞
- 趋化素样因子1在大鼠主动脉损伤模型中的表达被引量：2
- 2009年
- 目的探讨趋化素样因子1在动脉内膜增生病变中的作用。方法雄性SD大鼠85只，随机分组，损伤模型分为8组，每组10只，球囊损伤法建立腹主动脉球曩损伤模型，分别在术后12h，1、3d，1、2、4、6、8周取材。对照组5只，接受假手术。测量内膜面积／中膜面积评估术后内膜增生程度；免疫组织化学法检测CKLF1蛋白水平的表达，IPP6．0测定阳性染色平均光密度作为评价指标；RT—PCR检测趋化素样因子1（CKLFI）在mRNA水平的表达，以B—aetin表达作为内参，CKLF1／β—actin比值作为CKLF1相对表达量。结果术后1周可见明显新生内膜形成，至术后4周内膜面积／中膜面积升高最明显，此后呈消退趋势，但仍明显高于术后1周及对照；免疫组化检测显示CKLF1在新生内膜表达强度高于中膜（P=0．016），新生内膜中CKLF1表达在术后1周较高；RT—PCR检测发现CKLF1表达在术后3d出现高峰，逐渐减退，但仍高于基础水平（P〈0．05）；内膜增生程度与CKLF1相对表达量呈正相关（R=0．70），但无统计学意义（P=0．188）。结论动脉损伤后趋化素样因子1表达上调，新生内膜中表达强度明显高于中膜组织，推测趋化素样因子1对内膜增生的发展可能起一定作用。
- 李清乐张小明沈晨阳解基严
- 关键词：主动脉趋化素样因子1动物
- 趋化素样因子1在人动脉粥样硬化斑块组织中表达的研究被引量：5
- 2009年
- 目的研究人动脉粥样硬化斑块组织和正常动脉壁中趋化素样因子1（CKLF1）mRNA及蛋白水平的表达的差异。方法通过实时定量PCR技术检测24例下肢动脉硬化闭塞症患者髂股动脉斑块标本（实验组）和25例尸体器官移植供体正常髂股动脉（对照组）标本中CKLF1mRNA水平的表达；通过连续薄层切片免疫组织化学染色技术检测17例实验组标本和10例对照组标本中CKLF1蛋白水平的表达。结果动脉粥样硬化斑块组织中CKLF1阳性表达的细胞类型有内皮细胞、平滑肌细胞和巨噬细胞。CKLF1mRNA在对照组中存在基础表达，相对量为2．4，在实验组中表达明显上调（相对量为132．2，P〈0．05）；CKLF1蛋白在实验组标本平滑肌细胞中的阳性表达率为100％，在对照组中为70％，表达明显上调（P〈0．01）。结论CKLF1在动脉粥样硬化斑块组织中表达显著上调，可能在动脉粥样硬化的免疫和炎症反应过程中起重要作用。
- 焦洋沈晨阳张小明
- 关键词：动脉粥样硬化趋化因子类肌细胞平滑肌
- 趋化素样因子1对人动脉平滑肌细胞的增殖促进作用被引量：3
- 2011年
- 目的观察人趋化素样因子1(CKLF1)对人外周动脉血管平滑肌细胞(ASMCs)的作用。方法用CKLF1真核细胞表达载体瞬时转染293T细胞,72 h后收集上清培养液,采用ELISA方法检测培养上清中CKLF1;用该上清培养人ASMCs细胞后,MTT法检测该上清对细胞增殖的影响。结果 MTT结果显示,10倍稀释的转染上清刺激ASMCs 72 h后,实验组OD490=0.480±0.024,与对照组OD490=0.424±0.011相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CKLF1对人ASMCs具有促增殖作用。CKLF1可能参与动脉粥样硬化血管内膜增厚的过程。
- 宣成睿塔拉沈晨阳
- 关键词：趋化素样因子1血管平滑肌细胞细胞增殖
- 人趋化素样因子1对人动脉血管平滑肌细胞的趋化作用被引量：3
- 2009年
- 目的:观察人趋化素样因子1(chemokine-like factor1,CKLF1)对人外周动脉血管平滑肌细胞(arterial smooth muscle cells,ASMCs)的趋化作用。方法:收集用CKLF1真核细胞表达载体(pEGFP-N1-CKLF1)瞬时转染293T细胞72h后的上清培养液,采用细胞迁移实验检测CKLF1对ASMCs的趋化作用。结果:未稀释和10倍稀释的上清培养液孵育后的实验组迁移细胞数与对照组(pEGFP-N1)迁移细胞数相比,差异有统计学意义(114±4vs41±4,P<0.05;74±4vs34±3,P<0.01)。而100倍和1000倍稀释的上清培养液孵育后实验组迁移细胞数和对照组的迁移细胞数相比,差异无统计学意义(28±4vs25±5,P>0.05;26±5vs23±5,P>0.05)。ASMCs分别被不同浓度百日咳毒素(pertussis toxin,PTX)处理后,PTX浓度为0和2μg/L时,10倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数与对照组迁移细胞数相比,差异有统计学意义(74±4vs34±3,P<0.01;45±3vs34±3,P<0.01)。PTX浓度为10μg/L,10倍稀释的上清培养液实验组迁移细胞数与对照组迁移细胞数相比,差异无统计学意义(37±4vs34±3,P>0.05)。结论:CKLF1对人动脉平滑肌细胞具有明显趋化作用,且该趋化作用可被PTX所阻断。
- 宣成睿陈瑶何培英沈晨阳
- 关键词：趋化因子类趋化作用动脉粥样硬化
- C19、C27多肽对人主动脉平滑肌细胞的趋化活性被引量：1
- 2016年
- 趋化因子超家族（CKLFSF）在人类有九个成员,即：趋化素样因子（CKLF）和CKLFSF1-8。该基因家族的基因编码的产物特点为其结构介于经典的趋化因子和四次跨膜蛋白之间。CKLF1具有CC家族趋化因子的结构特征和基本功能,即连续两个半胱氨酸的特征性结构和趋化功能。本研究选择CKLF1 C端的两段多肽——C19、C27多肽,体外观察二者对人主动脉平滑肌细胞的趋化活性。
- 宣成睿沈晨阳
- 关键词：趋化素样因子1血管平滑肌细胞趋化作用动脉粥样硬化
- 健择对裸鼠未分化甲状腺癌的治疗作用
- 2014年
- 目的通过建立甲状腺未分化癌裸鼠体内实验模型，检验健择对裸鼠甲状腺未分化癌的治疗作用。方法选取3—4周龄雌性无胸腺清洁级裸鼠84只，体质量13～17g，单细胞悬液裸鼠皮下注射的方法建立滤泡状癌（WRO）、乳头状癌（NPA）、未分化癌（ARO）3种甲状腺癌异体移植模型。待肿瘤体积达到50mm3后分为4组给予治疗：①健择组；②放疗组；③健择＋放疗组；④盐水对照组。比较各组治疗前和治疗后肿瘤体积变化，观察健择组和健择＋放疗组裸鼠组织器官的副损伤程度。结果成功建立甲状腺癌异体移植模型。健择组3种甲状腺癌裸鼠治疗前后肿瘤体积差异显著（85．40±20．01）傩（52．08±14．24）mm3，（84．78±22．07）vs（51．96±14．35）mm3，（121．22±40．34）vs（85．13±21．35）mm3，P〈0．01；放疗组3种甲状腺癌裸鼠治疗前后肿瘤体积无显著差异（P〉0．05）；健择＋放疗组3种甲状腺癌裸鼠治疗前后肿瘤体积差异显著（92．22±25．98）vs（49．14±13．90）mm3，（110．16±39．57）135（58．93±15．21）mm3，（124．72±37．37）郴（55．08±13．27）mm3，P〈0．01；健择组与健择＋放疗组治疗前后肿瘤体积在未分化癌组有统计学意义（F=10．96，P〈0．01）。健择＋放疗组裸鼠食管、肺脏出现纤维化，健择组未见纤维化出现。结论单细胞悬液裸鼠皮下接种法可建立稳定的甲状腺癌动物模型；健择对裸鼠甲状腺未分化癌有治疗作用，辅以放射治疗可提高疗效但易导致脏器纤维化副损伤。
- 陈磊张青云杨植高建国郭风玲刘彦春陈序吾
- 关键词：健择甲状腺未分化癌化疗裸鼠
