辽宁省教育厅资助项目(05L500)
- 作品数：7 被引量：19H指数：3
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- 相关机构：中国医科大学附属第一医院中国医科大学更多>>
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- Nav1.5/SCN5A基因新的变构体编码人脑组织Nav1.5 Na^+通道被引量：6
- 2007年
- 河豚毒-抵抗性(TTX-R)Nav1.5 Na+通道是心肌的特异性Na+通道,虽然研究发现神经元中也存在河豚毒-抵抗性Na+电流及Nav1.5/SCN5A mRNA的表达,但其确切的cDNA序列尚不清楚.采用RT-PCR法对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA进行克隆发现:人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA有2种变构体,hB1和hB2(accession number EF629346,EF629347),其中hB1全长6201个碱基,其开放读码框架(ORF)参与编码2016个氨基酸,和人心肌Nav1.5 Na+通道氨基酸序列相同率高达98%,共有28个不同的氨基酸,其中7个集中位于第6A外显子与第6外显子编码区.与人心肌Nav1.5/SCN5A基因cDNA不同的是,在对人脑组织Nav1.5/SCN5A基因cDNA的克隆中未发现该基因第18外显子的选择性剪接,但却发现其第24外显子的选择性剪接,2种选择性剪接体(hB1和hB2)在脑组织中基本同时表达,表达比率接近1∶1,但在心脏中二者的表达比率却与年龄有关.人Nav1.5/SCN5A基因的第24外显子定位于染色体3P21区,共有54个碱基,参与编码18个氨基酸.RT-PCR法证实第24外显子的选择性剪接也可发生在大鼠心脑之外的其他组织中,竞争性PCR法证明,不同组织中2种选择性剪接体的表达比率不同,且随着周龄的增加,2种选择性剪接体在各组织中表达的变化趋势不同.此外,RT-PCR法还发现Wistar大鼠全身16种组织中均可检测到Nav1.5/SCN5A mRNA的表达.上述实验结果说明,Nav1.5 Na+通道在全身组织中分布广泛,但编码人脑组织Nav1.5 Na+通道与心肌组织该离子通道的cDNA序列不同,是Nav1.5/SCN5A基因的2种变构体,这为深入研究不同组织中Nav1.5 Na+通道的功能提供了基础.
- 欧绍武宗志红王军王运杰
- 关键词：基因克隆选择性剪接脑组织
- 大鼠脑组织Nav1.5钠通道的基因克隆及分布分析被引量：2
- 2007年
- 为了阐明大鼠脑组织Nav1.5钠通道α亚单位的编码基因、分子特性及其在不同发育阶段各脑叶的分布差异,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法,对大鼠脑组织Nav1.5钠通道α亚单位进行了克隆(命名为rN1),并比较其在不同发育阶段各脑叶的分布情况.rN1基因编码2016个氨基酸残基,序列分析显示,其与rH1氨基酸相似性为96.53%,与hNbR1相似性为96.13%.在DI-S3～S4发现与rH1不同的一个新的外显子(第7外显子),同时发现DⅡ～Ⅲ选择性剪切了第20外显子(53个氨基酸残基)的异构体(命名为rN1-2).分布结果显示,大鼠脑组织Nav1.5钠通道α亚单位在不同发育阶段各脑叶分布有明显的差异,研究证实,Nav1.5钠通道在大鼠脑组织显著表达,存在脑叶的分布差异,而且随着脑组织的发育,其表达逐渐趋于稳定,实验证实Nav1.5钠通道基因编码了一个新的外显子而且其表达范围更加广泛.
- 任成涛欧绍武王运杰林毅宗志红
- 关键词：钠通道基因克隆脑组织
- 编码脑组织Nav1.5钠通道新外显子的克隆、鉴定和分布被引量：9
- 2007年
- Nav1.5电压-门控钠通道(VGSC)被认为是心肌的特异性通道,但最近的研究发现,该通道在脑组织尤其是边缘系统中亦广泛分布.此前,在对人神经母细胞瘤细胞钠通道的基因克隆中,发现Nav1.5/SCN5A基因的第6A外显子参与编码该通道.采用人及鼠脑组织,通过RT-PCR法对Nav1.5钠通道基因进行克隆发现:Nav1.5/SCN5A基因中的第6A外显子参与编码了该通道,而心肌等其他组织却是第6外显子参与编码该通道.人Nav1.5/SCN5A基因的第6A和第6外显子都定位于3号染色体,共有92个碱基,都可以编码产生30个氨基酸,但却有7个氨基酸不同.人和鼠脑组织Nav1.5/SCN5A基因的第6A外显子仅有一个碱基不同,却产生相同的氨基酸序列.RT-PCR法证实第6A外显子在鼠脑的不同部位表达不同,第6外显子在大鼠不同组织中的表达也不同,这为深入研究不同系统中Nav1.5钠通道的功能提供了基础.
- 王军宗志红欧绍武王运杰任成涛林毅孟晓娜
- 关键词：基因克隆脑组织
- nNav1.5在人脑星形细胞瘤中的表达及意义被引量：2
- 2010年
- 目的:研究nNav1.5 mRNA及蛋白在人脑星形细胞瘤组织和正常脑组织中的表达差异。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及western blot法分别检测nNav1.5 mRNA及蛋白在30例人脑星形细胞瘤组织和8例正常脑组织中的表达水平。结果:人脑星形细胞瘤组织中nNav1.5基因及蛋白的表达值显著高于正常脑组织(P<0.01),且随病理级别的增高而升高。结论:nNav1.5 mRNA及蛋白在人脑星形细胞瘤组织中的表达水平显著升高,这可能与星形细胞瘤细胞增殖活跃及侵袭性生长等生物特性有关。
- 欧绍武王军王运杰宗志红
- 关键词：星形细胞瘤MRNA
- 电压-门控Na^+通道基因突变与癫痫
- 2007年
- 电压-门控Na+通道和癫痫的关系十分密切,许多癫痫综合征的发生已被证明是由Na+通道基因突变引起,且编码α和/或β亚单位的基因发生突变均可以引起癫痫。基因突变后产生的异常Na+通道蛋白引起癫痫的发病机制仍不明确。基因和细胞治疗为治疗离子通道基因突变引起的癫痫提供了新的思路。
- 王军欧绍武王运杰
- 关键词：基因突变基因治疗细胞治疗癫痫
- 电压-门控Na^＋通道α亚单位Nav1．5被引量：2
- 2008年
- Nav1·5α亚单位是电压-门控Nav1·5Na+通道发挥作用的核心亚单位,在心肌中首先被成功克隆,是心脏电生理活动最主要的Na+通道α亚单位.最新的研究发现,Nav1·5不仅可以在神经元等非心肌组织中表达,而且其表达的选择性剪接体的类型及电生理学特性与心肌Nav1·5亦不同.目前,不仅对Nav1·5发挥功能的调控机制及与心脏传导功能障碍等疾病的发病关系有了深入的了解,而且一些常见疾病,如肿瘤和癫痫等的发生也被认为可能和Nav1·5有关.本文结合国内外对Nav1·5的最新研究及本小组的工作,对Nav1·5的结构、选择性剪接、基因定位、电生理学活性及与疾病的关系作一详细综述.
- 王军欧绍武王运杰宗志红
- 关键词：选择性剪接疾病
- 9种Na^＋通道mRNA在5个不同发育阶段大鼠16种组织中表达及变化趋势被引量：8
- 2008年
- 电压-门控Na^＋通道由1个可单独发挥作用的α亚单位和2～4个起辅助作用的β亚单位构成,在可兴奋细胞动作电位的产生及传导等过程中起重要作用.采用RT-PCR法对5个不同发育阶段（P1、P9、P40、P80、P120）Wistar大鼠16种不同组织的9种Na^＋通道α亚单位及1种β亚单位的mRNA进行检测发现：同种类型Na^＋通道mRNA在大鼠不同组织中的表达不同,不同类型Na^＋通道mRNA在大鼠同一组织中的表达不同.其中,神经系统和心肌组织中Na^＋通道mRNA的表达最高,随着日龄的增加,Na^＋通道mRNA在不同组织中表达的变化趋势不同.Na^＋通道在全身组织中的广泛分布及随发育周期的不同变化趋势,为离子通道病的研究及治疗提供了理论基础.
- 王军王运杰欧绍武宗志红
- 关键词：Α亚单位Β亚单位WISTAR大鼠
