西安市科技计划项目(GG05163)
- 作品数：5 被引量：6H指数：2
- 相关作者：王静波惠延年关娟张延军杨丽更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院中国人民解放军总医院广州军区广州总医院更多>>
- 发文基金：西安市科技计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 剪切力对视网膜色素上皮细胞syndecan-1,血管细胞黏附分子-1,E-选择素蛋白表达和肌动蛋白的影响被引量：3
- 2006年
- 目的:研究剪切力对视网膜色素上皮(RPE)细胞synde-can-1,血管细胞黏附分子(VCAM)-1和E-选择素(se-lectin)表达和细胞骨架的影响。方法:体外培养人RPE细胞,应用2dyns/cm2大小的剪切力干预0,0.25,0.5,0.75,1,1.5,3h后,用免疫荧光染色法观察RPE细胞syndecan-1,VCAM-1和E-selectin表达和肌动蛋白的变化。结果:静态下的RPE细胞呈多角形和不规则形。2dyns/cm2剪切力作用0.75h后,细胞间隙加大,部分细胞形状变圆、变小;作用后1.5h,细胞极性改至与剪切力作用方向一致。静态条件下,肌动蛋白呈黄绿色丝状分布于中央细胞内,排列松散不规则且微丝较细;剪切力作用3h后,肌动蛋白增多增粗,且沿切力方向排列于中央和远周边细胞。剪切力作用后,RPE细胞syndecan-1的表达在0.5h时最弱,1h时最强;VCAM-1的表达在0.5h时最弱,1.5h时最强;E-selectin的表达在0.75h时最低,3h时最高。结论:剪切力可引起RPE细胞syndecan-1,VCAM-1和E-selectin及细胞骨架蛋白发生变化,它们之间的相互协作对RPE细胞的形态、黏附和力学信号转导起重要作用。
- 王静波惠延年
- 关键词：剪切力色素上皮肌动蛋白
- 前囊膜划伤诱导小鼠晶状体上皮细胞早期生长反应因子-1的表达
- 2008年
- 目的观察前囊膜划伤对小鼠晶状体上皮细胞早期生长反应因子-1(early growth response factor-1,Egr-1)表达的影响。方法36只成年雄性昆明小鼠,随机分为6组,制作小鼠晶状体前囊膜划伤模型。采用Westernblot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察前囊膜划伤后不同时间(0,0.5,0.75,1,2,5h)晶状体上皮细胞Egr-1蛋白和mRNA的表达变化。结果在正常未划伤的晶状体上皮细胞,Egr-1mRNA低表达,划伤后0.5h表达即增强,并在2h时达到峰值,随后逐渐减弱。正常未划伤的晶状体上皮细胞Egr-1蛋白表达微弱,划伤后0.5h,Egr-1蛋白表达即显著增强,并在2h时达到峰值,随后开始减弱。结论前囊膜划伤可诱导小鼠晶状体上皮细胞Egr-1mRNA和蛋白的表达。
- 王静波惠延年关娟
- 关键词：晶状体上皮细胞划伤早期生长反应因子-1
- THP-1细胞对体外培养的人视网膜色素上皮细胞c-fos表达的上调作用被引量：1
- 2009年
- 目的检测与单核/巨噬细胞株THP-1细胞共培养的人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞c-fos的表达。方法在Transwell小室中共培养THP-1细胞和人RPE细胞达不同的时间(0,2h,3h,24h,48h,72h),采用免疫荧光染色法和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)观察RPE细胞c-fos蛋白和mRNA的表达变化。结果在未与THP-1细胞共培养的RPE细胞中,c-fos表达微弱或不表达,细胞浆和部分细胞核为浅黄绿色荧光。与THP-1细胞共培养达2h时,RPE细胞的荧光强度逐渐增强并出现核移位。随着与THP-1细胞共培养时间的延长,RPE细胞c-fosmRNA的表达(0h,0.40±0.07)开始逐渐增强,于2h时达峰值(2h,0.91±0.10,P=0.002),随后表达减弱,至3h时(3h,0.51±0.08)降至近未共培养时的水平。结论与THP-1细胞共培养可在短期内迅速上调体外培养的人RPE细胞c-fos蛋白和mRNA的表达,且蛋白表达出现核移位现象,提示THP-1细胞可引起RPE细胞c-fos的活化。
- 王静波惠延年关娟杨丽
- 关键词：视网膜色素上皮THP-1细胞C-FOS
- 细胞因子对培养的人视网膜色素上皮细胞早期生长反应基因-1的影响被引量：2
- 2007年
- 目的检测细胞因子对人视网膜色素上皮（RPE）细胞早期生长反应基因-1（Egr1）的影响。方法体外培养人RPE细胞，采用免疫荧光染色、Western blotting和逆转录聚合酶链反应（RTPCR）定性定量观察不同刺激因素作用下Egr-1蛋白和mRNA的表达变化。刺激因素包括：20μg／ml脂多糖（LPS）、40ng／ml肿瘤坏死因子（TNF）-α、10U／ml干扰素（IFN）-γ、30％单核／巨噬细胞株（THP1细胞）七清液和正常人玻璃体液分别刺激O（未受刺激）、10、20、30、40、60min。结果在未受刺激的RPE细胞中Egr-1呈弱阳性表达，细胞浆为浅黄绿色荧光，随着刺激因素的作用，Egr-1的表达明显增强，细胞浆和部分细胞核呈强绿色荧光。20μg／mlLPS、40ng／mlTNF—α、10U／mlIFN-γ、30％THP-1细胞上清液和玻璃体液刺激RPE细胞后，与未受刺激的RPE细胞相比，Egr-1 mRNA的最大增强幅度分别为1．9、1．3、1．4、1．2、1．4倍，Egr1蛋白的最大升高幅度分别为3．4、1．2、1．7、3．2、1．3倍。结论LPS、TNF—α、IFN-7、THP-1细胞上清液和玻璃体液可上调体外培养的人RPE细胞Egr-1 mRNA和蛋白的表达，且出现核转位现象，说明这些刺激因素可引起Egr-1的活化。
- 王静波张延军惠延年
- 关键词：色素上皮肿瘤坏死因子Α脂多糖类干扰素Γ
- Egr-1在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的表达
- 2008年
- 目的观察早期生长反应因子-1(Egr-1)在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞的表达。方法用免疫荧光染色法观察25例(26眼)年龄相关性白内障患者和5例健康人的正常透明晶状体上皮细胞Egr-1蛋白的表达。结果在正常透明的晶状体上皮细胞Egr-1表达微弱,且主要表达在细胞核内;在年龄相关性白内障晶状体上皮细胞Egr-1的表达明显增高,主要定位于细胞浆。结论与正常细胞相比,年龄相关性白内障晶状体上皮细胞Egr-1的表达显著增强。
- 王静波惠延年周健胡丹杜红俊蔡莉刘洪雷崔志利
- 关键词：早期生长反应因子-1白内障上皮细胞晶状体免疫荧光
