国家自然科学基金(30370646)
- 作品数：9 被引量：17H指数：3
- 相关作者：龚燕芳屠振兴李兆申李兴华金晶更多>>
- 相关机构：第二军医大学上海市第八人民医院上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人胰腺癌胰液蛋白质差异表达分析被引量：6
- 2008年
- 目的:应用蛋白质组学方法分析人胰腺癌患者胰液蛋白质表达。方法:通过内镜下逆行胰胆管造影术(ERCP)中放置鼻胰管引流收集患者胰液,利用双向凝胶电泳,分离5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液(200μg)的总蛋白质,用图像分析软件识别差异表达的蛋白质;应用质谱仪得到相应的肽质指纹图谱,搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点。结果:1)经ERCP留置鼻胰管成功收集胰液标本,胰液量约为35～200ml,Brad-ford法测定蛋白质浓度为0.8～4.6μg/μl。同一胰液标本(200μg)的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性;5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石等量混合胰液自身比较后可重复的蛋白质点均在75%以上。2)对图像分析软件识别的9个差异蛋白质点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析,鉴定出胰腺癌相关的差异表达蛋白质。结论:人胰腺癌、慢性胰腺炎和胆总管结石患者胰液的蛋白质谱存在一定的差异。
- 朱峰吕顺莉高军龚燕芳李兆申
- 关键词：胰腺癌胰液双向凝胶电泳
- 人胰腺组织及胰腺癌细胞株蛋白质组的双向电泳分析被引量：3
- 2004年
- 目的 建立具有高分辨率和稳定性的胰腺癌蛋白质组研究的双向电泳方法。方法 取正常胰腺、胰腺癌手术标本和胰腺癌细胞株 ,分别制备组织、细胞匀浆 ,提取蛋白质组分 ,进行双向电泳。结果 加大蛋白酶抑制剂 ,应用两性电解质 ,可以得到理想的胰腺组织、细胞的蛋白质组分 ,并获得清晰、重复性良好的双向电泳图谱。结论 胰腺组织细胞蛋白质双向电泳中 ,样本的制备和双向电泳的条件是关键因素。
- 李兴华徐云虹龚燕芳满晓华李兆申屠振兴
- 关键词：胰腺癌癌细胞蛋白质组双向电泳分析平衡液
- 人胰腺癌胰液蛋白质谱差异表达初步分析被引量：2
- 2008年
- 目的应用蛋白质组学方法分析胰腺癌胰液与慢性胰腺炎、胆总管结石患者胰液间差异蛋白质的表达，初步探索胰液中可能的胰腺癌标志物，为临床胰腺癌和慢性胰腺炎的鉴别诊断提供依据。方法内镜下逆行胰胆管造影（ERCP）放置鼻胰引流管收集患者胰液，双向凝胶电泳（2-DE）分离5例胰腺癌、6例慢性胰腺炎和3例胆总管结石患者等量？昆合胰液的蛋白质，运用图像分析软件进行比较和分析，识别差异表达蛋白质。应用基质辅助激光解析电离飞行时问质谱（matrix-assisted laser desorption／ionization time-of-flight mass spectrometry，MALDI-TOF-MS）鉴定部分差异蛋白质点。结果收集到胰液总量35～200ml，Bradford法测定蛋白质浓度为0．8～4．6μg／μI。胰腺癌、慢性胰腺炎和胆总管结石患者等量混合胰液凝胶的蛋白质点数分别为196±12、209±15和199±10，三组间两两对比后的平均匹配率均在75％以上。部分差异蛋白质点经MALDI—TOF-Ms鉴定显示：相比胆总管结石和慢性胰腺炎，转甲状腺素蛋白（TTR）二聚体支链A在胰腺癌患者胰液中表达增高；载脂蛋白A1（ApoA-1）支链A、胰石蛋白支链、Reglβ再生蛋白前体表达降低。结论人胰腺癌、慢性胰腺炎和胆总管结石患者胰液的蛋白质谱存在一定的差异，TTR、ApoA-1、胰石蛋白和Reglβ再生蛋白可能成为胰腺癌胰液中的肿瘤标志物，为临床胰腺癌和慢性胰腺炎的鉴别诊断提供依据。
- 朱峰李兆申高军龚燕芳吕顺莉许国铭
- 关键词：胰腺肿瘤胰液蛋白质组学质谱
- 人胰腺癌相关蛋白质的差异表达研究被引量：1
- 2005年
- 胰腺癌5年存活率不超过5%,蛋白质组学(proteomics)的出现为寻找一种特异性高、敏感性强的胰腺癌肿瘤标志物带来了希望.蛋白质组学技术改变传统的分割式研究单个蛋白质的模式,建立全面、立体、快速的分析方法,以透视全体基因在特定细胞或组织的表达.本研究针对人正常胰腺、胰腺癌、胰腺癌旁组织,利用双向凝胶电泳(2-DE)技术以及质谱技术和生物信息学,分析胰腺组织不同生理状态下蛋白质的差异表达,旨在寻找胰腺癌早期诊断的肿瘤标志物,为早期诊断奠定基础.
- 李兴华屠振兴龚燕芳李兆申
- 关键词：相关蛋白质人胰腺癌蛋白质组学技术双向凝胶电泳癌旁组织5年存活率
- 人胰液蛋白质组的双向电泳被引量：2
- 2006年
- 目的建立优化的用于胰液蛋白质组研究的双向电泳方法。方法经内镜逆行胰胆管造影(ERCP)术收集纯胰液标本5例,分别进行多次双向电泳,比较不同标本保存时间、制备方法、泡胀液组成、固相pH胶条、等电聚焦条件及染色方案等因素对双向电泳图谱质量的影响。结果胰液标本在-80℃保存4个月做双向电泳对图谱没有明显影响。根据图谱质量比较,三氯乙酸/丙酮沉淀继以含硫脲的泡胀液复溶是优化的标本制备方法;应用窄范围固相pH胶条可以在增加标本上样量的同时改善分辨率;银染和兼容质谱的银染方案所获得的图谱同样具有良好的重复性和分辨率;不同病理状态的胰液标本的双向电泳图谱表现出一定程度的相似性。结论标本制备是胰液双向电泳的关键,优化的方法可以获得重复性好、分辨率高的双向电泳图谱,为不同病理状态下胰液蛋白质组学差异的研究奠定基础。
- 陈清宇龚燕芳金晶董春燕刘苗屠振兴
- 关键词：胰液蛋白质组双向电泳
- 胰腺癌组织相关蛋白质分子的差异表达
- 2006年
- 目的用双向凝胶电泳的方法建立胰腺癌、癌旁组织和正常胰腺组织的蛋白质组二维图谱并分析差异蛋白质点。方法提取人正常胰腺组织、胰腺癌和癌旁组织总蛋白质,双向电泳分离蛋白,比较不同组织中蛋白质表达的差异。每份组织均重复电泳3次。结果在同一份组织的3张银染的凝胶蛋白质图谱上均可辨识1000个左右的蛋白质点,蛋白质点在形状、位置和密度上一致,重复性好。在不同组织之间发现了22个明显差异的蛋白质点,初步确定了其等电点和分子量。正常胰腺组织有一个高表达的蛋白质点,癌和癌旁组织有21个高表达的蛋白质点。结论正常胰腺组织、胰腺癌、癌旁组织蛋白质组二维图谱存在明显的差异,部分差异蛋白质可能具有诊断应用价值。
- 李兴华屠振兴赵航龚燕芳许爱芳李兆申
- 关键词：胰腺肿瘤蛋白质组基因表达
- 胰腺癌患者血清相关蛋白质差异表达的研究
- 2010年
- 目的利用肿瘤血清蛋白质组分析方法（serologic proteome analysis，SERPA）对胰腺癌患者血清和正常人血清进行蛋白质组的分析，寻找胰腺癌特异的肿瘤标记物。方法利用HPLC柱去除血清中的白蛋白，通过双向电泳分离蛋白质，经图像采集与分析，切取胰腺癌患者血清和正常人血清的差异蛋白质点，进行质谱分析鉴定。结果共获得4个差异蛋白质。正常人血清含量高而胰腺癌患者血清含量低的蛋白质为胍裂解环化酶激活蛋白2（guanylate cyclase-activating protein 2）。胰腺癌患者血清含量高而正常人血清含量低的蛋白质3个，分别为结合珠蛋白2α（haptoglobin 2 alpha）、转甲状腺素蛋白（transthyretin）及KIAA1018蛋白。结论KIAA1018有望成为胰腺癌筛选和早期诊断的肿瘤标记物。
- 李兴华方德宁沈奕曾钗明邓淑娟
- 关键词：胰腺肿瘤蛋白质组学肿瘤标记
- 化疗药物对胰腺癌细胞株SW-1990蛋白质谱表达的影响被引量：1
- 2006年
- 目的探讨化疗药物作用下胰腺癌细胞株蛋白质谱的变化,寻找差异表达的蛋白质,为临床化疗提供理论依据。方法利用蛋白质组学技术,观察胰腺癌细胞株SW-1990经吉西他滨和5-氟尿嘧啶(5-FU)处理后,其蛋白质谱的变化,鉴定其差异表达的蛋白质。结果培养细胞受抑制约50％时,吉西他滨为1-100ng／ml。5-FU为250-2500 ng／ml。质谱鉴定了6个差异表达的蛋白质,对照组1个,加药组5个。结论对细胞株的作用,吉西他滨明显优于5-FU。吉西他滨参与了糖代谢和酯类代谢。β-肌动蛋白、MGC:19713、KIAA1058蛋白等某些高表达的差异蛋白质可能成为观察化疗效果的重要指标。
- 李兴华李兆申龚燕芳吴红玉许爱芳金晶屠振兴
- 关键词：蛋白质组学胰腺癌吉西他滨5-氟尿嘧啶
- 人胰腺组织蛋白质组的双向电泳分析被引量：3
- 2005年
- 目的利用双向电泳技术建立正常人胰腺组织的蛋白质组表达图谱。方法取正常人胰腺组织3例,经蛋白质的提取、一向、二向电泳、染色、扫描及图像采集分析,对各种条件进行比较优化。结果获得了分辨率及重复性均较好的双向电泳图谱。结论通过对各种条件的优化,初步建立了胰腺的双向电泳技术。
- 李兴华李兆申龚燕芳吴红玉金晶许爱芳屠振兴
- 关键词：胰腺蛋白质组双向电泳
