上海市教育发展基金会“曙光计划”项目(07SG19)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：张志愿蒋欣泉张秀丽严明李金忠更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院苏州大学上海市口腔医学重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市教育发展基金会“曙光计划”项目国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Nell-1基因修饰骨髓基质细胞复合β-磷酸三钙提升兔上颌窦底的实验研究被引量：1
- 2010年
- 目的:评价Nel样I型分子(Nell-1)基因修饰骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,bMSCs)复合β-磷酸三钙提升兔上颌窦底的效果。方法:抽取兔骨髓进行bMSCs培养,体外采用腺病毒载体携带Nell-1基因(AdNell-1)及绿色荧光蛋白EGFP基因(AdEGFP)转染bMSCs,GFP表达检测转染效率、Nell-1免疫细胞化学检测目的基因的表达。碱性磷酸酶(ALP)染色、半定量检测及钙结节茜素红染色检测细胞成骨分化。将基因修饰bMSCs与β-磷酸三钙颗粒复合用于兔上颌窦底提升,分别在术后2周和8周取材,HE染色,测量成骨面积,并采用SPSS11.0软件包对2组间数据进行t检验。结果:AdEGFP基因修饰组GFP表达效率可达60%～80%,Nell-1细胞化学染色显示,AdNell-1基因修饰组呈阳性表达。AdNell-1基因修饰组ALP染色及钙结节茜素红染色均高于AdEGFP基因修饰组,ALP半定量检测具有统计学差异(P<0.05)。体内实验研究中,AdNell-1基因修饰组新骨形成面积在8周时显著高于AdEGFP基因修饰组(P<0.05)。结论:采用AdNell-1基因转染兔bMSCs可促进其成骨分化,体内可促进上颌窦底提升的效果。
- 徐袁瑾夏伦果张秀丽蒋欣泉张志愿
- 关键词：骨髓基质细胞上颌窦底提升
- 骨形成蛋白2基因修饰的山羊耳软骨细胞体内异位植入研究被引量：5
- 2008年
- 目的:应用AdBMP-2基因修饰体外培养的山羊耳软骨细胞,并与F127pluronic支架材料复合,进行裸鼠皮下异位植入研究,探索BMP-2基因修饰高等哺乳动物软骨细胞促进软骨组织重建的可行性。方法:体外培养山羊耳软骨细胞,转染AdBMP-2和AdLacZ基因,X-gal染色检测基因转染效率。将基因修饰的细胞与可吸收生物材料PluronicF127复合形成细胞—生物材料复合物,并注射到裸鼠皮下,分别在术后2周和4周取材,观察2周标本CollX染色,4周标本X-gal、阿利新蓝、BMP-2及VEGF免疫组化染色。结果:50pfu/细胞可以获得80%的转染效率,AdBMP-2组在2周时出现大量成熟的软骨组织,4周时出现较多的骨样组织,BMP-2和VEGF染色强阳性;而AdLacZ组2周时尚未形成明显的软骨样组织,4周出现小块的软骨组织,未见骨样组织及VEGF阳性表达。结论:实验条件下,BMP-2基因转染早期即促进了软骨的成熟和分化,但随后发生了骨化,提示可尝试将其应用于软骨原位缺损或筛选更为理想的生长因子,以促进软骨再生。
- 蒋欣泉常庆张秀丽张志愿
- 关键词：软骨细胞骨形成蛋白2基因治疗
- 实时定量PCR检测Nel样I型分子基因对大鼠骨髓基质细胞成骨相关基因表达的影响被引量：7
- 2008年
- 目的:研究Nel-like1型分子(Nell-1)基因对体外培养大鼠骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells,bMSCs)成骨相关基因表达的影响。方法:取6周龄雄性Fischer344大鼠胫骨和股骨骨髓体外培养,以腺病毒为载体,进行基因转染,绘制生长曲线并测定转染效率。以转染β-半乳糖苷酶(β-Galactosidase,LacZ)基因的bMSCs为对照组,转染Nell-1的bMSCs为试验组,用实时定量PCR(real-time PCR)测定成骨相关基因碱性磷酸酶基因(alkaline phosphatase,ALP)、骨涎蛋白(bone sialoprotein,BSP)、骨钙素(osteocalcin,OC)、骨桥蛋白(osteopontin,OP)和Sox9的表达。以2-ΔΔCT法计算基因表达的相对比值。结果:随着Nell-1基因转染滴度的增高,细胞增殖速度减慢。基因转染效率随滴度增加而增高。Nell-1基因转染大鼠bMSCs,早期下调、中期和晚期上调ALP的表达,晚期上调OC的表达,整个成骨周期中均上调OP和BSP的表达。结论:Nell-1基因可能通过影响各成骨相关基因的表达而促进大鼠bMSCs的成骨分化。
- 胡镜宙蒋欣泉张志愿李金忠严明
- 关键词：骨髓基质细胞实时定量PCR基因表达
