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国家高技术研究发展计划(2004AA207140): 作品数：10 被引量：90H指数：6; 相关作者：王汉宁张金文王芳贾小霞梁慧光更多>>; 相关机构：甘肃农业大学甘肃省农业科学院甘肃省作物遗传改良与种质创新重点实验室更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学更多>>

玉米高直链淀粉基因ae的特异性PCR鉴定被引量：4: 2007年; 根据ae基因序列设计21对引物,对4个常规玉米自交系和4个具有aeae纯合基因型的高直链淀粉玉米自交系及其杂交种进行特异性PCR鉴定。结果表明,引物8可将具有AeAe基因型的普通玉米自交系与具有aeae基因型高直链淀粉玉米区分开来,为将普通玉米自交系快速改良成高直链淀粉玉米自交系提供了一种有效的分子标记检测技术。; 王汉宁王芳王化俊鱼小军; 关键词：玉米高直链淀粉

抗真菌和抗除草剂基因多价植物表达载体构建及对烟草遗传转化的研究被引量：14: 2009年; 利用基因重组技术,将木霉几丁质酶基因(Chi)和-β1,3-葡聚糖酶基因(Glu)进行融合并将其引入含bar基因的载体pAHC25中,成功构建了由Ubiquitin启动子分别驱动Chi-linker-Glu和bar的中间载体,然后将其上的Ubi-Chi-linker-Glu-nos和Ubi-bar-nos表达盒引入pBI121中,获得兼具除草剂抗性基因bar和真菌抗性基因Chi与Glu的三价植物表达载体pBIb-CG,并对烟草进行遗传转化,经PCR及Southern检测,共获得转基因烟草32株。外源基因已整合到烟草基因组中。离体抑菌试验表明转基因烟草叶片提取液对木霉菌和镰刀菌表现出一定的抗性。; 贾小霞张金文王汉宁马怀义梁慧光; 关键词：几丁质酶 BAR基因植物表达载体

玉米胚乳突变基因ae连锁累赘的SSR分析被引量：8: 2011年; 本研究通过与玉米胚乳突变基因ae连锁的SSR标记对轮回亲本不同的2个回交一代群体amylose extender(ae)基因两侧的连锁累赘进行了SSR分析,通过均匀分布在ae基因所在的Chr5连锁群上的SSR标记对这2个回交群体的染色体遗传背景回复率开展研究,结果表明,通过MAS可以将回交群体CHBC1F2染色体两侧的连锁累赘分别限定到13.2和17.2cM,将另一回交群体DHBC1F2的染色体的单侧连锁累赘限定到13.9cM。背景选择的结果表明,通过基因组的负选择可以使CHBC1F2群体中某些植株的5号染色体的遗传背景回复率达到85.7%,使DHBC1F2群体的染色体的遗传背景回复率达到87.5%。通过高密度的遗传连锁图谱(比如10～20cM)就可以直接选择在目的基因附近发生重组的个体,减少不需要的染色体片段,降低目标基因附近的搭载效应。; 乔岩王汉宁张成杨芳; 关键词：分子标记辅助选择轮回亲本

玉米品种真实性和纯度鉴定的SSR标记多重PCR体系优化被引量：20: 2010年; 为了建立稳定可靠的玉米真实性和纯度鉴定SSR标记,对DNA提取方法、SSR引物和多重PCR反应程序进行了优化。结果表明,用预热到75℃以上的研钵和95℃的1.5×CTAB提取缓冲液进行材料研磨,可得到纯度高、完整性好的DNA,并且提取成本较低。利用软件Primer Premier 5.0和Oligo 6.72对玉米指纹鉴定的SSR核心引物进行重新分析与设计,建立了21对SSR通用引物构成的8组多重PCR复合扩增体系和3步法扩增程序,均能在统一的PCR扩增条件下进行,扩增片段之间不存在交叉现象,扩增条带清晰,扩增结果稳定,这一扩增体系检测效率比单对SSR引物提高2.6倍以上。; 常宏王汉宁张金文王威路则权李瑛王蒂; 关键词：玉米纯度 DNA提取 SSR引物多重PCR

玉米基因组DNA的快速高效提取(简报)被引量：8: 2006年; 采用改良的十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)法,以玉米Zea mays的黄化苗叶片为材料提取玉米基因组DNA,提取的DNA经0．8％的琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明,此法具有快速、高效和DNA质量好、纯度高等优点。; 王芳王汉宁张金文鱼小军; 关键词：玉米基因组DNA

导入Chi-linker-Glu和Bar基因获得抗真菌和抗除草剂的转基因烟草: 2011年; 构建重组表达载体pBIb-CG(含有Chi-linker-Glu融合基因和Bar基因),利用农杆菌介导法将其携带的Chi-linker-Glu融合基因和Bar基因转化烟草(Nicotiana tobaccumL.)品种红花大金子。经根癌农杆菌侵染和共培养后,用100mg/L Kan+500mg/L Cef筛选抗性芽,获得30株抗性植株,抗性植株再生率为37%;分别对抗性再生植株中Chi-linker-Glu融合基因和Bar基因的特异性引物进行PCR检测,结果27株为阳性,占90%。PCR、Southern杂交结果证明,外源基因已整合到烟草基因组中。离体抑菌试验和除草剂抗性试验表明,转基因烟草植株对木霉菌(Tricho derma viride)、镰刀菌(Fusarium solanif sppisii)和除草剂都表现出一定的抗性。; 贾小霞张金文孔维萍杨如涛王汉宁; 关键词：几丁质酶基因 Β-1,3-葡聚糖酶基因 BAR基因

玉米基因组DNA的提取及SSR分析被引量：17: 2006年; 采用改良的CTAB法,以玉米的黄化苗叶片为材料提取玉米基因组DNA,提取的DNA经0.8%的琼脂糖凝胶电泳检测。结果表明:此法具有快速、高效、DNA质量好和纯度高等优点。对所构建的选育高直链淀粉玉米群体的双亲进行了SSR-PCR检测,得到了清晰的多态性SSR标记,为玉米分子标记辅助育种打下了基础。; 王芳王化俊王汉宁; 关键词：玉米 DNA提取 SSR

高直链淀粉玉米和普通玉米子粒发育过程中与淀粉合成相关酶活性的比较被引量：6: 2007年; 对高直链淀粉玉米和普通玉米子粒发育过程中与淀粉合成相关酶活性的变化动态进行了比较研究。结果表明,高直链淀粉玉米子粒发育过程中,束缚态淀粉合成酶(GBSS)活性高于普通玉米,可溶性淀粉合成酶(SSS)和淀粉分支酶(SBE)活性低于普通玉米。高直链淀粉玉米总淀粉积累量少、直链淀粉比例大是SSS、GBSS和SBE综合作用的结果。; 高珍妮王汉宁; 关键词：高直链淀粉玉米子粒淀粉酶活性

玉米幼胚和成熟胚愈伤组织诱导过程中内源激素的比较被引量：14: 2009年; 以玉米自交系87—1的幼胚和成熟胚为材料，用酶联免疫法测定了不同培养时间诱导的幼胚及成熟胚愈伤组织内源脱落酸（ABA）、吲哚乙酸（IAA）、赤霉素（GA3）和细胞分裂素（ZR）含量的动态变化。结果表明，在0～7d时，幼胚及成熟胚的IAA和GA3含量均急剧下降，说明在胚萌发阶段IAA和GA3需求量较大。在幼胚胚性愈伤组织发生初期（14d左右），2种激素含量出现峰值，反映出幼胚较高水平的IAA和GA3含量，有利于胚性愈伤组织的诱导。在胚萌发后的愈伤诱导阶段，成熟胚愈伤中队A、GA3和ABA含量以及IAA／ABA和GA3／ABA比值明显高于幼胚愈伤，且IAA／ABA和GA3／ABA比值均大幅度上升；而幼胚愈伤组织中IAA／ABA和GA3／ABA比值则稳定地维持在较低的水平上。可以认为，成熟胚愈伤组织中过高水平的IAA、GA3和ABA含量及IAA／ABA和GA3／ABA比值大幅度上升可能是导致其难以形成胚性愈伤组织的主要生理原因之一。; 贾小霞王汉宁孔维萍梁慧光张金文; 关键词：玉米幼胚成熟胚愈伤组织诱导内源激素

不同基因型高直链淀粉玉米的遗传效应被引量：2: 2008年; 将3个ae基因供体亲本和8个普通玉米自交系进行回交转育,测定了自交系本身及其回交转育的BC1F1和BC1F2代的千粒质量和直链淀粉含量.结果表明,BC1F2与BC1F1相比,大多数组合的直链淀粉含量有一定程度的提高,但千粒质量有降低的趋势.在回交的早代材料中,千粒质量和直链淀粉含量无明显的相关性;不同的ae基因供体亲本在遗传背景不同的轮回亲本中的表达效果有很大的差别.; 乔岩王汉宁方永丰慕平; 关键词：玉米高直链淀粉

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