国家教育部博士点基金(20060062008)
- 作品数：5 被引量：14H指数：2
- 相关作者：李宝玉陈剑秋孙晋津张旺清刘娟更多>>
- 相关机构：天津医科大学天津市北辰医院更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- hTERT启动子调控PE38KDEL基因载体的构建及其鉴定被引量：1
- 2010年
- 目的构建含有hTERT启动子和PE38KDEL基因片段的质粒phTERTp-PE38KDEL-IRES2-EGFP并对其鉴定。方法通过PCR方法扩增hTERTp,用其取代pIRES2-EGFP质粒的CMV启动子,全基因合成PE38KDEL基因片段,将其亚克隆到hTERTp-IRES2-EGFP的MCS中,经酶切及测序鉴定。结果经鉴定,成功将hTERTp及PE38KDEL两个基因片段插入亚克隆到pIRES2-EGFP中。结论成功构建phTERTp-PE38KDEL-IRES2-EGFP真核表达载体,有望使PE38KDEL阳性的胰腺癌细胞中特异性表达,起到杀伤胰腺癌细胞的作用,为肿瘤的靶向基因治疗提供了一条新思路。
- 李宝玉陈剑秋
- 关键词：HTERT启动子
- 胰腺癌的靶向治疗进展
- 2010年
- 李宝玉陈剑秋
- 关键词：胰腺癌分子靶向治疗
- 含hTERT启动子、PE38KDEL片段质粒构建及其对人胰腺癌细胞凋亡的影响被引量：2
- 2010年
- 目的构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并观察其对人胰腺癌MiaPaCa2细胞凋亡的影响。方法采用PCR法构建含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,并用双酶切法鉴定;将MiaPaCa2细胞分为5组,A组为空白对照组,仅加入含10%FBS的DMEM;B、C、D、E组分别转染pIRES2-EGFP、phTERT-IRES2-EGFP、pPE38KDEL-IRES2-EGFP、phTERTp-PE38KEDL-IRES2-EGFP,采用TUNEL法检测MiaPaCa2细胞的凋亡指数。结果重组质粒的PCR产物及酶切后片段的测序结果与GeneBank报道序列一致。A组转染24、48 h时MiaPaCa2细胞凋亡率分别为17.12%±1.66%、24.86%±2.80%,B组分别为18.14%±1.61%、26.47%±2.71%,C组为19.08%±3.84%、27.42%±7.26%,D组为29.46%±2.86%、38.12%±3.19%,E组为72.16%±4.79%、86.40%±7.71%。B^E组与A组比较,P均<0.05;E组与D组比较,P<0.05。结论成功构建了含hTERT启动子和PE38KDEL片段的重组表达质粒,该质粒可促进人胰腺癌MiaPaCa2细胞的凋亡。
- 李宝玉孙晋津陈剑秋
- 关键词：胰腺癌人端粒酶反转录酶启动子基因疗法
- hTERT启动子调控下PE38KDEL表达载体的构建及其在MiaPaCa_2人胰腺癌细胞中的表达
- 2011年
- 目的探讨端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子调控铜绿假单胞菌外毒素衍生物(PE38KDEL)表达载体的构建及其在MiaPaCa2人胰腺癌细胞中的表达。方法通过PCR法扩增hTERT启动子,全基因合成PE38KDEL,将其分别亚克隆到pIRES2-EGFP及phTERTp-IRES2-EGFP质粒的多克隆位点中;均经酶切及测序鉴定。通过脂质体法将两质粒分别转染MiaPaCa2及WI-38细胞,观察荧光表达情况,通过RT-PCR检测PE38KDEL的表达。结果经酶切及测序鉴定证实质粒构建成功,pPE38KDEL-IRES2-EGFP转染后MiaPaCa2和WI-38细胞中均有PE38KDEL基因表达;但phTERTp-PE38KDEL-IRES2-EGFP转染后仅MiaPaCa2中有PE38KDEL基因表达。结论 hTERT调控下PE38KDEL表达载体构建成功,并可在MiaPaCa人胰腺癌细胞中靶向性表达,为探讨胰腺癌的靶向基因治疗提供了实验依据。
- 李宝玉陈剑秋孙晋津
- 关键词：HTERT启动子PE38KDEL基因疗法
- EpCAM和CD44在胃癌中的表达及临床意义被引量：12
- 2014年
- 通过检测上皮细胞粘附分子（epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM）、CD44在不同胃组织中的表达差异,探讨其与胃癌发生、浸润和转移的关系。方法采用免疫组化法检测经病理证实的胃腺癌组织标本42例、不典型增生组织标本25例和正常胃组织标本25例中Ep CAM和CD44的表达,分析其表达与临床病理参数间的关系,及Ep CAM和CD44表达的相关性。结果 Ep CAM在胃腺癌组织、不典型增生组织和正常胃组织中的阳性表达率两两比较差异均有统计学意义（88.1%,64.0%,8.0%,P均〈0.01）,在胃腺癌组织中表达与淋巴结转移、浆膜侵润和TNM分期（Ⅰ~Ⅱ/Ⅲ~Ⅳ）有关（P均〈0.05）;CD44在胃腺癌组织中、不典型增生组织和正常胃组织的阳性表达率两两比较亦均有统计学差异（69.4%,40.0%,12.0%,P均〈0.01）,其在胃腺癌组织中表达与胃癌TNM分期、分化程度（中高分化/低分化）和淋巴结转移有关（P〈0.05,P〈0.01）。Ep CAM和CD44在胃腺癌组织中的表达呈正相关（r=0.363,P〈0.01）。结论 Ep CAM和CD44在胃癌的发生、发展中起重要作用,与胃癌的浸润、转移有关,联合检测可作为胃癌早期诊断、判断预后的的指标。
- 张旺清李宝玉刘娟史双全方贵龙
- 关键词：CD44胃癌预后判断
