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银杏内酯B下调切除修复交叉互补基因1表达及增加耐药卵巢癌细胞对顺铂敏感性体外研究被引量：6: 2012年; 目的:研究银杏叶提取物银杏内酯B(GB)增加耐顺铂卵巢癌细胞株(SKOV3/DDP-luc)对顺铂(CDDP)敏感性的作用及相关机制。方法:分别以DMSO及25μmol/L的GB处理SKOV3/DDP-luc细胞3、7及14d,溴化噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞经不同浓度CDDP作用72h后的活性,并据此计算出各组细胞对CDDP的IC50;同时提取上述作用时间点各组细胞的总蛋白,Western Blot检测DNA损伤修复相关蛋白ERCC1的表达情况。结果:GB作用3、7、14d后,SKOV3/DDP-luc细胞对CDDP的IC50分别降为24.2(与对照组相比P=0.07)、18.2(与对照组相比P=0.001)、11.6μmol/L(与对照组相比P=0.0004);在上述处理过程中,肿瘤细胞中ERCC1的表达逐渐下降(P<0.01)。结论:GB可显著增加耐药卵巢癌细胞株对CDDP的敏感性,这一作用通过下调肿瘤细胞中ERCC1蛋白的表达而实现,提示GB可能成为临床卵巢癌化疗过程中的一种辅助药物。; 姜伟徐丛剑丛青王宜生孙霞BINYle; 关键词：耐药顺铂银杏内酯B 切除修复交叉互补基因1

血小板活化因子对卵巢癌细胞侵袭的影响及其相关机制被引量：1: 2011年; 目的探讨血小板活化因子（PAF）对卵巢癌细胞侵袭的影响及其相关机制，为卵巢癌的治疗提供新的靶点。方法（1）以100nmoL／L的PAF分别处理卵巢浆液性癌细胞株OVCA429细胞及卵巢黏液性癌细胞株RMUG-L细胞，均以仅加入二甲基亚砜（DMSO）为对照，采用体外侵袭实验检测其穿膜细胞数。（2）以不同浓度（分别为0、0．1、1、10、100、1000nmol／L）的PAF处理后检测OVCA429细胞中环腺苷酸应答元件结合蛋白（CREB）、磷酸化CREB（P-CREB）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）蛋白的表达水平；以100nmol／L的PAF处理不同时间（分别为0、5min、10min、30min、1h及12h）后检测OVCA429细胞中有丝分裂原活化蛋白激酶p38蛋白（p38MAPK）、磷酸化p38MAPK（p-p38MAPK）、CREB及p-CREB蛋白的表达水平，上述各蛋白的表达水平均采用蛋白印迹法检测。（3）OVCA429细胞在加入PAF（100nmoL／L）的基础上，分别加入各蛋白的抑制剂，即PAF受体（PAFR）抑制剂-wEB2076（50μmol／L）、p-p38MAPK抑制剂-SB203580（10μmol／L）、CREB结合蛋白（CBP）-CREB相互作用抑制剂卅17505（25μmol／L）。实验分为6组：PAF组、PAF’WEB2076组、PAF＋SB203580组、PAF＋217505组、PAF＋SB203580＋217505组及空白对照组，采用蛋白印迹法检测各组细胞中p-p38MAPK、P-CREB、MMP-2蛋白的表达强度。结果（1）体外侵袭实验显示，予PAF处理后，OVCA429细胞的穿膜细胞数[（118±23）个]明显多于其对照细胞[（36±8）个，P〈0．01]，而RMUG-L细胞的穿膜细胞数[（45±13）个]与其对照细胞[（53±9）个]比较无明显变化（P〉0．05）。（2）不同浓度的PAF处理后，OVCA429细胞中p-CREB、MMP-2蛋白的表达水平呈明显的剂量依赖性（P〈0．01），0．1nmol／L的PAF即可引起p-CREB、MMP-2蛋白表达水平日月显升高，至100nmol／L时达高峰；而CREB蛋白的表达无明显变化。100nmol／L的PAF处理不同时间后，O; 姜伟王宜生丛青李明江Bin Ye徐丛剑; 关键词：卵巢肿瘤肿瘤浸润血小板活化因子 CAMP反应元件结合蛋白质基质金属蛋白酶2

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上海市卫生局青年科研基金(2008Y001)

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